日本应用食品材料科学研究所，日本科学专家协会，日本GydF4y2Ba
电邮：GydF4y2Ba布瓦内斯瓦里。bibleraaj@uhsm.nhs.ukGydF4y2Ba
内政部：10.15761/IMM.1000256GydF4y2Ba
使用特定化合物生成的人工活细胞对于研究生命科学中的无数问题非常有用。我已经开发了一种通过在蛋清中培养含有鞘氨醇（Sph）-DNA腺苷混合物的人工细胞种子来生成人工细胞的方法。然而，人工细胞形成的机制尚不清楚。本研究检测了蛋清中是否存在形成人工细胞所需的化学成分。研究结果表明，与腺苷结合的成分（腺苷结合的化合物；D-分数）存在于蛋清中，并且这些化合物聚集了Sph DNA。此外，将结合腺苷（F-组分）的成分添加到Sph DNA聚集体中构建细胞。TLC显示D-组分主要由腺苷脂质化合物组成，而F-组分由游离脂质组成。因此，人工细胞可按如下方式形成：Sph DNA与D-组分聚集，细胞（DNA冠状细胞）使用F-组分构建并被DNA覆盖。这些发现表明DNA冠状细胞可以在蛋清中生长。GydF4y2Ba
腺苷结合化合物，聚集，人工细胞形成，DNA冠状细胞，鞘氨醇DNAGydF4y2Ba
自20世纪60年代首次研究以来，人工细胞的生成已经取得了重大进展[1-3]，但迄今为止，可自主复制的人工细胞尚未见报道。最近关于人工细胞的研究主要集中在细胞分裂或复制[4]。我研究了产生完全可操作(自复制)人工细胞的方法[5,6]，并建立了[7]方法，通过将腺苷与鞘氨醇(Sph)和DNA结合，培养人工细胞并在蛋清中产生蛋白。GydF4y2Ba
然而，人工细胞形成的机制尚不清楚。目前的实验检测了蛋白中是否存在与腺苷结合并与细胞形成相关的成分。为此，将腺苷添加到蛋清中，然后回收并分离腺苷。腺苷在缺乏蛋白质和核酸的F组分和含有在添加乙醇后沉淀的核酸的D组分中检测到。研究了F-和D-组分对Sph-DNA的影响。结果表明，在Sph-DNA聚集体中加入D-组分后，Sph-DNA聚集体形成聚集体；在Sph-DNA聚集体中加入F-组分后，Sph-DNA聚集体形成人工细胞，称为DNA冠细胞GydF4y2Ba体外培养。GydF4y2Ba
这些聚集体(sph - dna - d组分混合物)可以在白卵内产生人工细胞，特别是在与白卵孵育时产生人工细胞。GydF4y2Ba
这些结果表明，蛋白d组分中含有聚集Sph-DNA的化合物，蛋白f组分中含有重组Sph-DNA聚集细胞的化合物。结果，DNA冠细胞被产生并在蛋清中生长。通过HPLC和TLC对D-和f -组分的结果提示了两种有趣的可能性:[1]聚集Sph-DNA的组分可能是腺苷脂，[2]构建细胞的组分可能是游离脂。GydF4y2Ba
在这里，我证明了d部分(包含腺苷-脂类)聚集Sph-DNA，并且DNA冠细胞是使用f部分(脂类)构建的。目前的发现提出了DNA冠细胞是否可以自我复制的问题。GydF4y2Ba
使用以下材料：Sph（美国西格玛），DNA(GydF4y2Ba大肠杆菌GydF4y2Ba菌株B，Sigma，美国），腺苷（Sigma，美国和Wako，日本），脂质单月桂碱（日本东京Kasei）和三贝海宁（日本东京Kasei），以及从市场购买的白色来亨氏蛋。GydF4y2Ba
Egg whites were injected with 0.5 ml of adenosine (0.1 M) and the eggs were incubated for 5 days at 37 °C, after which the egg white was collected and kept at 4 °C until use.
使用类似于用苯酚/氯仿提取DNA的方案，从蛋清制备样品。典型的程序是在65℃下孵化蛋清（300µl）GydF4y2BaｃGydF4y2Ba在微滤管中培养30分钟，然后从DNA提取试剂盒DNAs ici中提取400µl F溶液-添加F（Rizo Inc.，日本）并混合试管内容物。然后，添加400µl苯酚和400µl氯仿，并混合试管内容物，直到形成乳液。试管在6714处离心10分钟GydF4y2Ba×GydF4y2BaGGydF4y2Ba沉淀保持在4GydF4y2Ba○GydF4y2BaC.使用移液管将300µl上层（水相）转移到新鲜试管中，添加并混合等体积（300µl）的异丙醇。试管在15107处离心10分钟GydF4y2Ba×GydF4y2BaGGydF4y2Ba，收集上层，保持在4℃，作为f馏分。然后在原试管中加入1 ml 70%乙醇，在15107离心GydF4y2Ba×GydF4y2BaGGydF4y2Ba将沉淀的DNA片段溶于50µl的蒸馏水中。将馏分分为10个试管(每个5µl样品)。这个样品被用作d馏分。f馏分干燥后溶解在100µg/ml蒸馏水中。d馏分中加入蒸馏水(50µl)。样品(50~100μl)采用高效液相色谱(HPLC)和薄层色谱(TLC)分析。GydF4y2Ba
在DNA溶液(40µl)中加入Sph(90µl)，再加入d(50µl)。混合后，将一滴混合物放在玻片上，并用相衬显微镜观察。然后在DNA溶液(40µl)中加入Sph(90µl)，再加入d(50µl)。混合后，加入f组分(100µl)，混合溶液，加入溴化乙锭溶液后，将混合物滴于玻片上，用相衬显微镜观察GydF4y2Ba
和荧光显微镜。GydF4y2Ba
为了研究F-和D-级分中是否存在腺苷，将两个样品溶解在1 ml缓冲液（50 mM NaH）中GydF4y2Ba2GydF4y2Ba人事军官GydF4y2Ba4GydF4y2Ba色谱柱:develsil RPAQUEOUS (C30 UG-5, 4.6 mm i.d. × 250 mm, NOMURA CHEMICAL;有限公司、日本);流速:1.0 ml/min;温度:40°C;洗脱液:50 mM NaHGydF4y2Ba2GydF4y2Ba人事军官GydF4y2Ba4GydF4y2Ba(pH 2.4)/乙腈(97/3);样品体积:10µl;检测:260 nm紫外检测。GydF4y2Ba
用20%氯仿提取f和d组分，在薄层色谱板上进行斑点标记，用正己烷:乙醚:乙酸(80:20:1)进行色谱。在暴露于磷钼酸盐(5%)和乙醇溶液后，加热平板。以单色金葡聚糖和部族红葡聚糖为标准品。GydF4y2Ba
使用Sph-DNA-D生成人工细胞的试验如上所述（5）。简单地说，混合90µl Sph（10 mM）和40µl DNA（1.7µg/µl），然后加热混合物。添加D-馏分（50µl），然后将混合物注入蛋清（白蛋白）中。在37°C下培养7天后，将1-2 ml可能含有人工细胞的蛋清转移到含有10%牛血清（DMEM）的Dulbecco‘改良Eagles’培养基中，并在37°C下培养2天。在加入溴化乙锭溶液后，将培养基中的一滴沉淀物放置在玻片上，并使用相差显微镜和荧光显微镜进行观察。GydF4y2Ba
将F-分数（1.0 ml，100µg）添加到1.0 ml腺苷溶液（0.1 M）中。混合后，添加4.0 ml乙醇，干燥沉淀物，然后如上所述通过TLC进行分析。将干燥的沉淀物重新溶解在1 ml蒸馏水中，并按如下所述检查鞘氨醇DNA的作用。GydF4y2Ba
将Sph（90µl）添加到DNA溶液（40µl）中。混合后，添加并混合F-A溶液（50µl），然后将一滴放置在玻片上，并使用相差显微镜和荧光显微镜进行观察。接下来，将如上所述制备的Sph-DNA混合物和F-A溶液添加到Sph-DNA混合物中，然后添加F-分数（100µl）。他们是混血儿。然后，在加入溴化乙锭溶液后，将一滴放在玻片上，并使用相差显微镜和荧光显微镜进行观察。GydF4y2Ba
用腺苷注射蛋清提取F-和d组分，研究蛋清对人工细胞形成的影响。首先，将f组分添加到Sph-DNA中，混合，然后一滴滴在玻片上，立即使用相衬显微镜观察。没有观察到形状的变化。接下来，将d组分加入Sph-DNA混合物中，Sph-DNA聚合(图1a)。荧光显微镜观察罗素光(图1b)。将f组分添加到这个聚合体中，就形成了发射罗素光的圆形或颗粒聚合型电池(图2a和2b)。典型的细胞直径约为10µm(图3a)，荧光显微镜观察到细胞表面罗素光，提示细胞表面覆盖有DNA。37℃孵育60分钟后细胞聚集(图3b)。这些结果表明，加入d组分后Sph-DNA聚集，加入f组分后形成圆形或颗粒状细胞。GydF4y2Ba
图1。GydF4y2Ba鞘氨醇（Sph）-DNA与D-分数的聚集。将Sph添加到DNA中，然后添加D-馏分。聚集体形成。聚集体用溴化乙锭溶液染色。（a） 在荧光显微镜（b）下观察到聚集物表面的Russell光，表明表面由DNA组成。比例尺：20µmGydF4y2Ba
图2。GydF4y2Ba用F-分数构建细胞。将Sph添加到DNA中，混合，然后添加D-馏分，然后添加F-馏分。混合物用溴化乙锭溶液染色并涂抹在玻片上。a）和b）中的图像显示相同的视野。（a） 相差显微镜观察，显示圆形或颗粒状细胞刻度条：使用荧光显微镜在细胞中观察到50µm（b）Russell光，表明细胞中存在DNA。比例尺：50µmGydF4y2Ba
图3。GydF4y2Ba用F-分数构建的典型细胞。将Sph添加到DNA中，然后添加D-馏分，然后添加F-馏分。（a） 加入溴化乙锭溶液后，将一滴放在载玻片上，并使用荧光显微镜进行观察。（b） 将一部分混合物在37°C下培养30分钟，然后将一滴放置在载玻片上，并使用相衬显微镜进行观察。图3a在圆形细胞表面观察到Russell光，表明细胞边缘由DNA组成。标尺：20毫米GydF4y2Ba
使用以下方法测定F-和D-馏分中腺苷和脂质的存在：GydF4y2Ba这两个GydF4y2Ba高效液相色谱法和薄层色谱,GydF4y2Ba
F-组分和D-组分的HPLC色谱图分别如（图4a和图4b）所示。在6.54或6.53分钟时，F-组分和D-组分中的峰对应于腺苷（标准：6.50分钟；数据未显示），表明F-组分和D-组分中均存在腺苷。GydF4y2Ba
图4。GydF4y2Bad组分和f组分的高效液相色谱图。(a) d组分色谱图。垂直标尺为260 nm处的吸光度，垂直标尺上的章节表示保留时间(min)。保留时间为6.54分钟的峰值用箭头突出显示。(b) f组分色谱图。垂直标尺为260 nm处的吸光度，垂直标尺上的章节为保留时间(min)。保留时间为6.53分钟的峰值用箭头突出显示。纯化的腺苷保留时间为6.56 min(数据未显示)GydF4y2Ba
F-和d馏分在薄层板上进行色谱和可视化。从f分数中观察到一个点(图5a车道1)，而从d分数中观察到两个点(图5a车道2)。GydF4y2Ba
在F组分和D组分中观察到一个共同点。D分数产生了一个在F分数中看不到的斑点。这些发现表明，D-组分中的一个组分可能在聚集中起作用，因为F-组分不能聚集Sph、DNA，并且在D-组分中缺少一个斑点（图5b）。GydF4y2Ba
图5。GydF4y2BaF-馏分和D-馏分的薄层色谱图。每个样品在TLC板上斑点，色谱，然后可视化。（a） 车道1中显示了F分数的点。观察到一个斑点（箭头）。车道2显示了D分数中的点。观察到两个斑点（箭头）。在原点观察到一个点。（b） 车道3中显示了A-F分数的点。观察到两个斑点（箭头）。一个微弱的斑点与F分数的位置相同。车道4显示纯化的tribehen in，车道5显示纯化的monolaurin。（a） （b）是独立进行的。GydF4y2Ba
将Sph与DNA混合加热，加入d组分，在蛋清中孵育，蛋清与D-MEM孵育。Sph-DNA-D生成的人工细胞如图6所示。单个细胞以点或聚集的形式观察(图6a)。荧光显微镜下观察到细胞中的罗素光，提示细胞中含有DNA(图6b)。这些结果表明，sph - dna - d组分混合物可以形成人工细胞。GydF4y2Ba
图6。GydF4y2Ba人工细胞由鞘氨醇- dna - d组分混合物在蛋清中37°C孵育7天，在含10%牛血清的Dulbecco高糖改性Eagle培养基中2ml蛋清中孵育。聚集体用溴化乙锭染色并涂片于玻片上。用相差显微镜和荧光显微镜观察。(a)观察到人工细胞呈点状或聚集状。(b)荧光显微镜观察细胞表面罗素光，显示DNA覆盖细胞表面。比例尺为20μm。GydF4y2Ba
我尝试分离f馏分和腺苷混合物中的化合物，因为d馏分可能包括f馏分和腺苷。在f馏分中加入腺苷，用乙醇沉淀。聚合体(F-A)。F-A经薄层色谱处理，硫酸染色。观测到两个点(图5b lane 3)。在原始点上检测到一个小点。这一发现表明F-A由两种脂类组成。用tribehenin和单角苷标准得到的斑点分别如图5 lane 4和图5 lane 5所示。GydF4y2Ba
将F-A添加到Sph DNA溶液中，混合，并立即将一滴置于玻片上，并使用相衬显微镜和荧光显微镜进行观察。观察到两种类型的聚集体，粘液型和晶体型。典型的晶体聚集体如（图7a）所示。在晶体边缘观察到Russell光（图7b）在荧光显微镜下，表明边缘由DNA组成。当F-分数添加到聚集体中时，细胞被构建，如图8a所示。在细胞表面观察到Russell光（图8b）在荧光显微镜下，表明细胞表面被DNA覆盖。典型的荧光细胞如（图9）所示。这些观察表明，Sph DNA聚集体是使用F-A形成的，细胞是使用F-组分构建的。GydF4y2Ba
图7。GydF4y2Basph - dna聚集物与腺苷-f组分中的化合物形成的结构完整性。将Sph加入DNA中混合，然后加入化合物A-F。滴入溴化乙锭溶液后涂布于载玻片上，用相差显微镜和荧光显微镜观察。(a)观察到晶体型聚集体。(b)用荧光显微镜观察聚集体边缘的罗素光，显示边缘由DNA组成(图7b)。比例尺为50µm。GydF4y2Ba
图8。GydF4y2Ba将F-组分添加到Sph DNA聚集体中形成的细胞的结构完整性。将Sph添加到DNA中，混合，然后添加A-F化合物。混合后，添加F-组分。在玻片上涂抹一滴，并在相差显微镜和荧光显微镜下观察。（A）将细胞观察为点（箭头）（b）使用荧光显微镜在细胞表面观察到Russell光，表明细胞含有DNA（图8b）。标尺为50µmGydF4y2Ba
图9。GydF4y2Ba由F-A化合物形成的典型细胞。将Sph添加到DNA中，混合，然后添加A-F化合物，然后添加F-分数。在玻片上涂抹一滴并在荧光显微镜下观察。在细胞表面观察到罗素光，表明细胞含有DNA。标尺为20µm。GydF4y2Ba
在这项研究之前，产生人工细胞所需的机制和元素尚不清楚，这确定了蛋清中是否存在人工细胞生成所必需的元素。GydF4y2Ba
之前我报道过使用Sph-DNA-adenosine[7]可以形成生成人工细胞所需的人工细胞种子。这提示蛋清中可能存在腺苷相关因子。因此，将大量的腺苷注射到鸡蛋的蛋清中，用高效液相色谱法测定蛋清中的腺苷。初步实验表明，在腺苷给药5天后使用蛋清可能非常重要。GydF4y2Ba
在缺乏蛋白质和核酸的部分（F-部分）和从中提取核酸的部分（D-部分）中检测到腺苷。非常有趣的是，用乙醇沉淀提取DNA的部分中存在腺苷。此外，有趣的是，Sph DNA在添加D-馏分后聚集，如下所述。在F组分中未观察到这些特征。此外，TLC分析显示F-组分和D-组分之间存在差异：在D-组分中检测到两个斑点，而在F-组分中检测到一个斑点。公共点的Rf值几乎相同（图5a，车道1和车道2）。在D分数原始点中观察到第二个点（图5a，车道2）。这表明D-分数包含F-分数不包含的成分。另一方面，目前尚不清楚该点对应的成分。然而，D-组分含有腺苷和脂质，并且该组分可以作为化合物存在，尤其是作为腺苷脂质化合物存在。部分化合物可能保留在原始斑点中。作为标准点的独角龙保留在原始点（图5b，第5车道）。因此，D-部分可能含有单月桂苷。因此，D-组分可能含有腺苷脂质，因此制备并研究了腺苷-F-组分（A-F）化合物。将腺苷和F-馏分混合后，用乙醇沉淀制备A-F化合物。接下来，为了检查A-F是否聚集Shp-DNA，将A-F添加到Sph-DNA混合物中。观察到聚集体。GydF4y2Ba
接下来，我将讨论由D-组分和F-A化合物形成的聚集体。当D-组分和F-A化合物混合时，形成粘液型和晶体型两种聚集体。我在D组分中显示粘液型聚集体（图1），在A-F化合物中显示晶体型聚集体（图7）。然而，聚集类型的差异可能并不重要，因为有时在D组分中观察到晶体型聚集，在A-F化合物中也观察到粘液型聚集。GydF4y2Ba
目前还不清楚为什么会形成不同的聚集物。一般来说，一个原因可能是试剂的质量，特别是腺苷。如果腺苷纯度低，就有可能发生晶体型聚集。这些聚集物可以通过以下步骤形成:首先，将Sph加入到DNA中，Sph的细纤维与DNA纤维结合[8,9]，在d组分或F-A化合物存在下形成许多细纤维(Sph-DNA)。结果就形成了骨料。当f组分加入黏液型或晶体型聚集体时，细胞自发形成，如图2和图8所示。荧光显微镜下观察到典型细胞表面罗素光(图3a和图9)，提示细胞被DNA覆盖。另一方面，观察到的细胞看起来像粒子聚集而不是圆形(图2a)。当一个典型的细胞在37℃下孵育60分钟时，观察到由几个小颗粒组成的聚集样细胞(图3b)。因此，这些细胞可能在短时间内形成。 I plan to identify the phenomena that destroy the original cells or trigger mitosis of the original cells.
众所周知，人造细胞和天然细胞由脂质-聚合物-蛋白质复合物组成。在这里，Sph-DNA生成的细胞表面由DNA组成，表明细胞的成分可能包括脂质聚合物DNA复合物。到目前为止，d馏分中的脂类还没有被测定。但是，我进行了一个与目前研究不同的实验。我制备了一种由腺苷和f组分(a -f)组成的化合物，并测试它是否聚集Sph-DNA。这表明腺苷脂(在f部分)聚集了Sph-DNA。这进一步表明，包括单月桂酸酯在内的几种脂质可以结合腺苷，并允许Sph-DNA的制备。另一方面，尚不清楚细胞是如何使用f分数构造的。一种可能是f组分中的脂类覆盖了聚集物，导致了细胞的构建。另一种可能性是d部分可能能够聚集和形成细胞，而f部分可能只会加速细胞构建。 Based on these findings, artificial cells can be formed using Sph-DNA aggregates with D-fraction (adenosine-lipid compound) in egg white. The cells constructed using the F-fraction (lipids) in egg white are covered with DNA. Now, it remains unclear how artificial cells acquire the ability to self-replicate and generate progeny artificial cells.
最后，为了便于进一步的研究，我将细胞表面含有脂质DNA的细胞命名为“DNA冠状细胞”。GydF4y2Ba
我已经建立了一种制造人造细胞的方法。本实验旨在阐明人工细胞形成的机理。Sph-DNA作为产生人工细胞的种子，在添加d馏分时聚集，d馏分含有从卵子中提取的DNA, 2021 OAT Copyright。所有权利保留在添加f馏分，即蛋清中缺乏蛋白质和DNA的馏分。d馏分可能包含由腺苷和脂类组成的化合物，而f馏分不包含这种化合物，而是自由的腺苷和脂类。由此可见，形成人工细胞的过程表明d部分含有Sph-DNA和f部分的腺苷脂聚集物以及f部分的游离脂质，从而构建了DNA覆盖的细胞。GydF4y2Ba
这些结果表明，DNA冠细胞代表了人造细胞的起源。GydF4y2Ba
我要感谢I. Monna (Rizo Inc.)协助提取用于腺苷分析的样品并进行了有益的讨论，感谢S. Higuchi(日本埼ama工业技术中心北方实验室)协助分析了HPLC和TLC数据并进行了有益的讨论。和东京都市产业技术研究所，以使用实验室空间和荧光显微镜。GydF4y2Ba
作者声明没有相互竞争的经济利益。GydF4y2Ba
伊凡痛风GydF4y2Ba
伦敦大学学院GydF4y2Ba
研究文章GydF4y2Ba
收到日期：2016年11月5日GydF4y2Ba
受理日期:2016年11月21日GydF4y2Ba
发布日期：2016年11月24日GydF4y2Ba
©2016 Inooka S.这是一篇根据知识共享署名许可证条款发行的开放获取文章，允许在任何媒体中不受限制地使用、发行和复制，前提是原始作者和来源均已获得授权。GydF4y2Ba
Inooka S（2016）使用蛋清成分聚合鞘氨醇DNA和细胞构建。Integr Mol Med 3:DOI:10.15761/IMM.1000256。GydF4y2Ba
日本应用食品材料科学研究所，日本科学专家协会，日本仙台县太湖区中田3-8-2号，981-1104GydF4y2Ba
电邮：GydF4y2Ba布瓦内斯瓦里。bibleraaj@uhsm.nhs.ukGydF4y2Ba
图1。GydF4y2Ba鞘氨醇（Sph）-DNA与D-分数的聚集。将Sph添加到DNA中，然后添加D-馏分。聚集体形成。聚集体用溴化乙锭溶液染色。（a） 在荧光显微镜（b）下观察到聚集物表面的Russell光，表明表面由DNA组成。比例尺：20µmGydF4y2Ba
图2。GydF4y2Ba用F-分数构建细胞。将Sph添加到DNA中，混合，然后添加D-馏分，然后添加F-馏分。混合物用溴化乙锭溶液染色并涂抹在玻片上。a）和b）中的图像显示相同的视野。（a） 相差显微镜观察，显示圆形或颗粒状细胞刻度条：使用荧光显微镜在细胞中观察到50µm（b）Russell光，表明细胞中存在DNA。比例尺：50µmGydF4y2Ba
图3。GydF4y2Ba用F-分数构建的典型细胞。将Sph添加到DNA中，然后添加D-馏分，然后添加F-馏分。（a） 加入溴化乙锭溶液后，将一滴放在载玻片上，并使用荧光显微镜进行观察。（b） 将一部分混合物在37°C下培养30分钟，然后将一滴放置在载玻片上，并使用相衬显微镜进行观察。图3a在圆形细胞表面观察到Russell光，表明细胞边缘由DNA组成。标尺：20毫米GydF4y2Ba
图4。GydF4y2Bad组分和f组分的高效液相色谱图。(a) d组分色谱图。垂直标尺为260 nm处的吸光度，垂直标尺上的章节表示保留时间(min)。保留时间为6.54分钟的峰值用箭头突出显示。(b) f组分色谱图。垂直标尺为260 nm处的吸光度，垂直标尺上的章节为保留时间(min)。保留时间为6.53分钟的峰值用箭头突出显示。纯化的腺苷保留时间为6.56 min(数据未显示)GydF4y2Ba
图5。GydF4y2BaF-馏分和D-馏分的薄层色谱图。每个样品在TLC板上斑点，色谱，然后可视化。（a） 车道1中显示了F分数的点。观察到一个斑点（箭头）。车道2显示了D分数中的点。观察到两个斑点（箭头）。在原点观察到一个点。（b） 车道3中显示了A-F分数的点。观察到两个斑点（箭头）。一个微弱的斑点与F分数的位置相同。车道4显示纯化的tribehen in，车道5显示纯化的monolaurin。（a） （b）是独立进行的。GydF4y2Ba
图6。GydF4y2Ba人工细胞由鞘氨醇- dna - d组分混合物在蛋清中37°C孵育7天，在含10%牛血清的Dulbecco高糖改性Eagle培养基中2ml蛋清中孵育。聚集体用溴化乙锭染色并涂片于玻片上。用相差显微镜和荧光显微镜观察。(a)观察到人工细胞呈点状或聚集状。(b)荧光显微镜观察细胞表面罗素光，显示DNA覆盖细胞表面。比例尺为20μm。GydF4y2Ba
图7。GydF4y2Basph - dna聚集物与腺苷-f组分中的化合物形成的结构完整性。将Sph加入DNA中混合，然后加入化合物A-F。滴入溴化乙锭溶液后涂布于载玻片上，用相差显微镜和荧光显微镜观察。(a)观察到晶体型聚集体。(b)用荧光显微镜观察聚集体边缘的罗素光，显示边缘由DNA组成(图7b)。比例尺为50µm。GydF4y2Ba
图8。GydF4y2Ba将F-组分添加到Sph DNA聚集体中形成的细胞的结构完整性。将Sph添加到DNA中，混合，然后添加A-F化合物。混合后，添加F-组分。在玻片上涂抹一滴，并在相差显微镜和荧光显微镜下观察。（A）将细胞观察为点（箭头）（b）使用荧光显微镜在细胞表面观察到Russell光，表明细胞含有DNA（图8b）。标尺为50µmGydF4y2Ba
图9。GydF4y2Ba由F-A化合物形成的典型细胞。将Sph添加到DNA中，混合，然后添加A-F化合物，然后添加F-分数。在玻片上涂抹一滴并在荧光显微镜下观察。在细胞表面观察到罗素光，表明细胞含有DNA。标尺为20µm。GydF4y2Ba
