看看最近的文章

摘要

神经肽Y (NPY)和NPY Y2受体(Y2R)参与应激性小鼠内脏性肥胖。我们以前已经报道了5 ' -侧翼区域之间的关联Y2R基因snp与血浆高密度脂蛋白胆固醇水平的关系不同snp的受试者血浆hdl -胆固醇水平差异显著(rs6857530;GGY2Rrs6857530GG和rs6857715TT基因。本研究的目的是进一步阐明两者之间关联的机制Y2R基因snp和血浆高密度脂蛋白胆固醇水平在确认了的5′侧区序列后Y2R在HepG2细胞中含有杂合子rs6857530 (G/A)和rs6857715 (T/C)基因，我们比较了NPY单独和NPY加用的效果Y2R利用实时反转录PCR (real-time RT-PCR)和微阵列技术研究BIIE0246拮抗剂对HepG2细胞基因表达的影响。BIIE0246加入HepG2细胞后，未能改变具有代表性的HDL代谢调节因子mRNA的表达水平apo-lipoprotein A1实时RT-PCR检测。在54,675个探针集中，BIIE0246上调了743个实体(>1.5倍)，下调了492个实体(<0.67倍)。biie0246显著上调的基因与3个生物过程、7个细胞组分和1个分子功能的基因本体(GO)类别相关(p值<0.001)。三个生物学过程是乳糜微粒重塑、胆固醇负调控和胆固醇运输。biie0246下调了与氧化石墨烯44个生物过程、11个细胞组分和1个分子功能相关的基因。此外，biie0246下调基因参与了44条通路(P<0.01)，其中包括甾醇响应元件结合蛋白信号通路。biie0246上调基因显著参与维生素B12/脂蛋白代谢等22条通路(P=0.0048)。这些结果提示Y2R阻断可能抑制胆固醇合成并提高血浆高密度脂蛋白胆固醇水平，提示一种新的治疗特异性血脂异常的药物Y2R单核苷酸多态性。

关键字

神经肽Y, Y2受体拮抗剂，BIIE0246，微阵列，途径，高密度脂蛋白胆固醇，HepG2细胞

介绍

神经肽Y (NPY)最初从猪脑[1]中分离出来，通常通过下丘脑NPY Y1受体刺激食欲，如我们的综述[2]所示。应激不仅刺激肾上腺皮质的皮质醇分泌，还刺激交感神经末梢的NPY释放，特别是伴随过量的食物摄入。NPY Y2受体(Y2R)参与小鼠[3]高热量饮食应激引起的内脏肥胖。我们以前已经研究了5 ' -侧翼区域之间的关系Y2R基因单核苷酸多态性(SNP) s和代谢性状，并报道了这些SNP与健康受试者血浆高密度脂蛋白胆固醇水平之间的显著关联[bbb]。不同snp的受试者血浆hdl -胆固醇水平差异显著(rs6857530;GG

最近的临床试验表明，胆固醇酯转移蛋白(CETP)抑制剂可以提高血浆高密度脂蛋白胆固醇水平，但不能改善心血管事件。HDL具有多种功能，如胆固醇向肝脏的反向转运、抗氧化、抗炎症和免疫功能[6-10]。因此，高密度脂蛋白的数量和质量都很重要。尽管有这些证据，血浆高密度脂蛋白胆固醇水平低仍然是心血管疾病的一个重要危险因素。

我们以前报道过细胞类型和snp依赖Y2R基因表达[11]。用pGL3-Basic载体在人肝癌细胞株HepG2上插入5′侧区，检测荧光素酶活性Y2R含有rs6857530GG + rs6857715TT而不含rs6857530 AA + rs6857715CC的基因。本研究的目的是进一步阐明两者之间关联的机制Y2R基因snp和血浆高密度脂蛋白胆固醇水平采用实时逆转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)和cDNA芯片技术分别检测强效和选择性Y2R拮抗剂BIIE0246[12]对HepG2细胞单个关键基因和综合基因的调控作用。

材料与方法

细胞培养

HepG2细胞购自健康科学研究资源库(大阪日本)，在含有5%胎牛血清的DMEM中，37℃，5% CO2气氛下培养，如上所述。

SNP打字

采用苯酚-氯仿法提取HepG2细胞DNA。的5 '侧翼区域Y2Rrs6857530和rs6857715基因通过引物组PCR扩增(正向;Ttcgtgtcccatagctttcc和反转;tctagctgggcggtccctgtg)热循环器(Techgene, Techne, St. Louis, Mo)。PCR产物按前面描述的Sanger法直接测序。

实时rt - pcr

培养HepG2细胞，比较4组进行实时RT-PCR研究;不添加，单独使用100nM NPY (ABGENT)，单独使用1µM BIIE0246 (TOCRIS bioscience)， NPY加BIIE0246作用24 h。使用real time ready细胞裂解试剂盒(Loche Applied Science)裂解培养细胞。以RNA裂解物为模板，利用转录子通用cDNA master (Loche Applied Science)进行cDNA合成反应。采用Faststart Essential DNA Green Master (Loche Applied Science)、测试基因引物和Light Cycler Nano (Loche Applied Science)逆转录cDNA的反应混合物进行实时RT-PCR。测试基因是apo-lipoprotein A1（ApoA1)(正向引物;Cacggtggtgaagtacctgag，反向引物;cgctgaactggtattcgttaaa),ApoA1绑定蛋白质(正向引物;Cacggtggtgaagtacctgag，反向引物;cgctgaactggtattcgttaaa),CETP(正向引物;Ccaaccaggaaatcttccaa，反向引物;ggcagtggacggtgactt),清道夫receptor-B1（SR-B1)(正向引物;Tttgtggttctgcgttgaag，反向引物;cttgctgaggggagtcactt),肝脂肪酶(正向引物;Tacaggagtgcggcttcaa，反向引物;tgccagatccagttttctagc)。参考基因β肌动蛋白作为标准化的内部控制。采用比较CT(∆∆CT)法测定每个样品中目标DNA序列相对于未处理样品的数量。4组间差异的统计学显著性采用方差分析(IBM SPSS, v. 22.0)。

微阵列分析

培养HepG2细胞进行微阵列研究;100nM NPY单独和100nM NPY加1µM BIIE0246。采用总RNA纯化试剂盒(Biosynthesis)从每个细胞组的4个重复中分离RNA。生物分析仪(Agilent Technologies)评估的RNA完整性数(RIN)在对照组和biie0246处理的细胞中均为10.0，理想值高于7.0。用NanoDrop ND-1000分光光度计测定分离RNA的A260/A280，对照细胞为2.00,biie0246处理细胞为1.99。

将总RNA逆转录为cDNA，进行体外转录反应，制备生物素标记的cRNA。生物素标记的cRNA 12.5µg在Human Genome U133 Plus 2.0 array上杂交16小时。该微阵列包含54,675个探针组，对应47,400个转录本或38,500个基因。经GeneChip流体工作站450洗涤，植红蛋白染色后，用GeneChip Scanner 3000 7G扫描阵列。采用MAS5统计算法，由affmetrix GeneChip Command Console Software (AGCC)和affmetrix Expression Console Software进行归一化和汇总。每个转录本的探针组由11对25粒完全匹配(PM)和不匹配(MM)探针细胞组成从3 '端起600个碱基。PM和MM的序列相同，只是MM探针序列的中间部分发生了变化。该信号是由组合的，背景调整，PM减去MM值的探头集计算。当PM信号显著强于MM信号时，认为该信号存在(单侧Wilcoxon信号秩次检验;P < 0.04)。为了校正芯片的变化，将信号值归一化为每个芯片75%以上分布的值为1 (log)₂1 = 0)。

使用genesspring GX进行散点图、分层聚类、基因本体(GO)和通路分析。采用聚类算法进行分层聚类。结果显示为带热图的树突图。GO分析采用AmiGO 2数据库(http://amigo.geneontology.org/amigo)。当p值小于0.001时，认为GO项中受调控基因与总基因的比值具有统计学意义。维基路径数据库(http://www)。wikipathways.org/index.php/WikiPathways)进行通路分析(单实验分析)。该数据库是一个开放的公共平台，致力于科学界对生物途径的分析。当p值小于0.01时，认为调控基因与参与该通路的总基因之比具有统计学意义。

结果

SNP打字

直接测序的5 ' -侧翼区域Y2R来自HepG2细胞的基因产生杂合子rs6857530 (G/A)和rs6857715 (T/C)(图1)。

图1所示。的5 '侧区直接测序Y2R基因在HepG2细胞中产生杂合子rs6857530 (G/A)和rs6857715 (T/C)。

实时RT-PCR评估BIIE0246对HDL代谢调节因子mRNA水平的影响

1µM BIIE0246处理对代表性HDL代谢调节因子mRNA水平的影响β肌动蛋白实时RT-PCR法检测HepG2细胞的表达。BIIE0246未能改变mRNA水平APoA1和ApoA1结合蛋白。尽管BIIE0246似乎有所下降CETP，SR-B1和肝脂肪酶mRNA表达水平，不添加、单独添加100nM NPY、单独添加1µM BIIE0246、100nM NPY加1µM BIIE0246的细胞间差异无统计学意义(n=4, 3次重复实验代表性结果)(图2)。

图2。100ng NPY和/或1µg BIIE0246对ApoA1、ApoA1结合蛋白，CETP, SR-B1和肝脂肪酶实时RT-PCR检测HepG2细胞mRNA水平。mRNA水平以相对于家养基因的比例表示β肌动蛋白信使rna水平。

微阵列基础分析

采用芯片技术检测Y2R拮抗剂BIIE0246对HepG2细胞综合基因表达的影响。看家基因的信号比(3′/5′)GAPDH通过affmetrix表达控制台评估，对照细胞的cRNA为0.90,biie0246处理细胞的cRNA为0.87。结果表明，使用3 '探针的微阵列方法是可靠的，因为理想的信号比小于3。

散点图显示了NPY- vs. NPY + biie0246处理的HepG2细胞mRNA表达水平的信号分布(图3-a)。在54,675个探针组中，BIIE0246上调了743个实体(>1.5倍)，下调了492个实体(<0.67倍)。

图3。(a)通过散点图比较Y2R拮抗剂BIIE0246对HepG2细胞基因表达的影响。信号值用log表示₂75%移位归一化后。两次上调、不变和两次下调分别用上、中、下对角线表示。(b)用树状图和热图显示前1000个调控基因的分层聚类。向上和向下调节的等级分别用红色和绿色渐变表示，用颜色范围(信号对数比)表示。

上调最多的10个基因包括:MIOS(基因符号)(fold-change;4.7)、LGLS8-AS1(3.65)、LOC100507477(3.6)、ITGB3(3.5)和RASSF6(3.25)。ITGB3(整合素β3)与脂蛋白代谢过程(GO;0050748)。下调最多的10个基因分别是HMGA2(0.246)、LRRC14(0.293)、ZCCHC12(0.314)、PECAM1(0.325)、TMEM50B(0.346)。

的折叠变化ApoA1和SR-B1mRNA水平分别为0.99和1.21。结果与实时RT-PCR测定的比值相似。

分层聚类

对BIIE0246监管的前1000家实体进行聚类分析。BIIE0246向上和向下调控的实体被分组在一个集群中，这些实体是共同调控的，并且功能相关(图3-b)。

去分析

氧化石墨烯包括生物过程、细胞成分和分子功能三大类。BIIE0246显著上调了与生物过程相关的3个氧化石墨烯术语、与细胞成分相关的7个氧化石墨烯术语和与分子功能相关的1个氧化石墨烯术语相关的基因(Fisher’s exact test;假定值< 0.001)。与生物过程相关的三个氧化石墨烯术语是乳糜微粒重塑、胆固醇负调控和固醇转运负调控。乳糜微粒重塑的氧化石墨烯包括5个实体(氧化石墨烯;0034371)，其中2个实体，ApoC2和ApoA4,是差异。氧化石墨烯对胆固醇或胆固醇转运的负调控包括14个实体(氧化石墨烯;0032375, 0032372)，其中3个实体ApoC2, EGF和SREBF2是差异。BIIE0246显著下调了与生物过程相关的44个氧化石墨烯术语、与细胞成分相关的15个氧化石墨烯术语和与分子功能相关的1个氧化石墨烯术语的基因。

路径分析

单实验分析(SEA)鉴定出44条与biie0246调控基因相关的通路(>1.5倍)(P<0.01)(表1)。其中3条通路与脂质代谢相关。甾醇反应元件结合蛋白(SREBP)信号通路涉及65个基因(WP 1982_7894)，其中4个基因，SAR1B, PI3K, PPARG和LSS，被BIIE0246下调(P=0.0022)(图4)。维生素B12代谢途径(包括脂蛋白代谢)与53个基因相关(WikiPathways在线数据库;WP1533_70117)，其中4个基因，meggalin, NFkB2, PLG和INSR，(P=0.0048)(图5)胆固醇生物合成途径与12个基因(WP1795_72909)相关，其中2个基因，LSS和TM7SF2;BIIE0-246表达下调(P=0.0049)。

表1。HepG中与biie调控(> 1.5倍)基因相关的通路₂细胞

与上调基因相关的途径	假定值	匹配	通路
		实体	实体
Hs_Focal_Adhesion_WP306_71714	7.87 e-06	12	188
Hs_EGF-EGFR_Signaling_Pathway_WP437_72106	3.37 e-04	9	162
Hs_Interleukin-1_signaling_WP1839_44873	7.72 e-04	3.	15
Hs_Integrated_Cancer_pathway_WP1971_71249	0.001319208	4	36
Hs_G_Protein_Signaling_Pathways_WP35_71252	0.001492556	6	92
Hs_Insulin_Signaling_WP481_72080	0.001521681	8	161
Hs_B_Cell_Receptor_Signaling_Pathway_WP23_72101	0.001577781	6	94
Hs_AGE-RAGE_pathway_WP2324_71701	0.001906049	5	66
Hs_Signaling_by_EGFR_WP1910_45218	0.001954745	3.	21
Hs_Glycerophospholipid_Biosynthetic_Pathway_WP2533_71989	0.00263036	3.	34
Hs_Prostate_Cancer_WP2263_73838	0.003835746	6	115
Hs_Vitamin_B12_Metabolism_WP1533_70117	0.004782356	4	53
Hs_MicroRNAs_in_cardiomyocyte_hypertrophy_WP1544_73325	0.005416465	5	105
Hs_Integrated_Pancreatic_Cancer_Pathway_WP2377_71228	0.005547157	8	200
Hs_ErbB_Signaling_Pathway_WP673_69914	0.005865572	4	54
与下调基因相关的途径
Hs_Wnt_Signaling_Pathway_Netpath_WP363_70630	8.87 e-05	5	51
Hs_Processing_of_Capped_Intron-Containing_Pre-mRNA_WP1889_42105	9.74 e-05	5	52
Hs_Insulin_Signaling_WP481_72080	1.01 e-04	8	161
Hs_Histone_Modifications_WP2369_69927	2.62 e-04	5	67
Hs_BDNF_signaling_pathway_WP2380_71549	2.63 e-04	7	141
Hs_Cell_Cycle_WP179_70629	3.20 e-04	6	103
Hs_RIG-I-MDA5_mediated_induction_of_IFN-alpha - beta_pathways_WP1904_45045	8.10 e-04	3.	21
Hs_mRNA_Processing_WP411_71369	8.93 e-04	6	127
Hs_IL-4_Signaling_Pathway_WP395_70016	0.00116604	4	55
Hs_B_Cell_Receptor_Signaling_Pathway_WP23_72101	0.00144947	5	94
Hs_Gastric_cancer_network_1_WP2361_71382	0.00190663	3.	28
Hs_SREBP_signalling_WP1982_71987	0.0022419	4	65
Hs_Asparagine_N-linked_glycosylation_WP1785_44964	0.00281227	3.	32
Hs_p38_MAPK_Signaling_Pathway_WP400_72084	0.0033489	3.	34
Hs_Parkin-Ubiquitin_Proteasomal_System_pathway_WP2359_72121	0.00366955	4	73
Hs_Prolactin_Signaling_Pathway_WP2037_67606	0.00468128	4	76
Hs_Cholesterol_biosynthesis_WP1795_72909	0.00485147	2	12
Hs_IL-5_Signaling_Pathway_WP127_70017	0.00531745	3.	40
Hs_Regulation_of_Microtubule_Cytoskeleton_WP2038_70100	0.00651376	3.	44
Hs_Irinotecan_Pathway_WP229_68389	0.00661149	2	14
Hs_RB_in_Cancer_WP2446_72248	0.00753037	4	87
Hs_Energy_Metabolism_WP1541_68947	0.00833931	3.	47

讨论

如我们之前的报道[5]所述，使用插入5 '侧区的pGL3-Basic载体在HepG2细胞中检测荧光素酶活性Y2R含有rs6857530GG + rs6857715TT而不含rs6857530AA + rs6857715CC的基因。因此，我们直接测序的5 '侧区域Y2RHepG2细胞中的基因。该序列得到杂合子rs6857530 (G/A)和rs6857715 (T/C)。HepG2细胞因此被认为表达Y2RGene，虽然量Y2R在其他具有同源rs6857530 (G/G)和rs6857715 (T/T)的肝细胞中，mRNA预计会更高。

肝脏代表性的HDL调节因子有载脂蛋白A1 (ApoA1)、ApoA1结合蛋白、CETP、SR-B1和肝脂肪酶[13-15]。我们检测了这些调节因子的mRNA表达是否受到Y2R拮抗剂的影响。尽管BIIE0246有降低mRNA表达水平的趋势，但BIIE0246未能改变实时RT-PCR评估的mRNA表达水平CETP SR-B1,肝脂肪酶信使rna表达。

接下来，我们利用芯片分析BIIE0246对综合基因表达的影响。BIIE0246也未能改变代表性HDL调节因子的mRNA水平，这与实时RT-PCR结果一致。另一方面，biie0246上调基因被包含在与生物过程相关的3个GO术语中;乳糜微粒重塑，胆固醇或固醇运输负调控。这些结果表明BIIE0246调节脂质代谢相关基因的表达。然而，乳糜微粒重塑的GO树图显示乳糜微粒重塑的正调控和负调控(AmiGO2)。氧化石墨烯树对胆固醇转运的负调控包括胆固醇外排、进口、转运体活性、肠道吸收、细胞内转运和反向转运(AmiGO2)。从氧化石墨烯树的角度来看，甾醇转运的负调控包括胆固醇转运、肠道植物甾醇吸收、细胞内甾醇转运和甾醇进口(AmiGO2)。因此，Y2R可能参与乳糜微粒重塑和胆固醇/固醇运输，但目前尚不清楚Y2R阻断如何影响血浆hdl -胆固醇水平。

因此，进行SEA以确定与受调节基因相关的途径。在pathway数据库中，设计和整合各种基因的流程图或模块，以实现特定的生物学功能。值得关注的是，biie0246下调的4个基因与SREBP信号通路显著相关。如图4所示，SREBP是一种位于内质网膜上的蛋白[16-18]。在细胞内胆固醇水平高时，SREBP通过与SREBP裂解激活蛋白(SCAP)[19]和胰岛素诱导基因(INSIG)(20)连接而保持复合物的存在，而在低胆固醇水平时，SREBP则去除insg。SREBP-SCAP二聚体随后连接与sec24[21]并转移到高尔基体。当SREBP从高尔基体转移到细胞核时，它被1号位点蛋白酶(S1P)[22]和随后的2号位点蛋白酶(S2P)[23]切割成n端SREBP (nSREBP)。nSREBP是一种结合脂肪生成酶基因的固醇反应元件(SRE)的转录因子。如,INSIG．因此，SREBP在控制胆固醇合成中起着关键作用。SREBP信号通路包括65个基因，由上述关键分子组成。下调该通路的4个基因SAR1B, PI3K, PPARG，和在那(图4)。SAR1B，分泌相关的Ras相关GTPase 1B，是一种从内质网转运到高尔基体的酶。PI3K，磷酸肌醇-3-激酶，是一种磷酸化4,5 -二磷酸磷脂酰肌醇生成3,4,5 -三磷酸磷脂酰肌醇的激酶。PPARG，过氧化物酶体增殖体激活受体γ，是一种核受体和转录因子，靶向酰基辅酶a氧化酶等基因来控制脂肪酸的β氧化。羊毛甾醇合成酶(LSS)是一种催化(S)- 2,3氧化角鲨烯环化成羊毛甾醇的酶，该反应形成了甾醇核。Y2R拮抗剂下调SREBP信号通路相关基因表达，这与NPY通过肝脏Y2R刺激SREBP信号通路从而导致胆固醇合成增加的观点是一致的。

图4。SREBP信号通路(维基路径数据库;WP1982)。BIIE0246衰减SAR1B，PI3K，PPARG,LSS参与这个通路(红圈)。

OAT版权所有。版权所有

维生素B12代谢途径不仅包括维生素B12/钴胺素代谢，还包括蛋白质酪氨酸硝化、脂蛋白代谢、DNA氧化和脂质过氧化。该通路包括53个基因，其中BIIE0246上调了4个基因;meggalin, NFkB2, PLG和INSR如图5所示，该途径的局部视图。巨噬木苷与立方蛋白共同作用，通过胞内运输立方蛋白[24]介导HDL内吞作用。Cubilin不仅是钴胺素的受体，也是高密度脂蛋白中最丰富的载脂蛋白ApoA1的受体。Cubilin在这条通路中与megalin位置相近。NFkB2是一种靶向多种基因的核转录因子，包括HDL的载脂蛋白之一Apo CIII。ApoCIII不包括在这一途径中。PLG是纤溶酶原，在该途径中与组织纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活物抑制剂-1 (PAI-1)密切相关。在之前的报道中，PAI-1与血浆高密度脂蛋白胆固醇水平[25]呈负相关。因此，纤溶酶原上调可导致血浆高密度脂蛋白胆固醇水平升高。INSR是胰岛素受体，在这一途径中与TNFα相关。已知TNFα可引起胰岛素抵抗。 Conversely,胰岛素受体基因上调可引起抑制肿瘤坏死因子α基因的表达。据报道，抗tnf治疗可提高类风湿关节炎患者血浆hdl -胆固醇水平。虽然该通路中的ApoAI基因的表达水平不受BIIE0246的调控，但这些证据表明Y2R参与了HDL代谢。Y2R拮抗剂上调维生素B12/脂蛋白代谢相关基因表达，这与通过肝脏Y2R产生的NPY抑制肝脏生成HDL从而导致血浆HDL-胆固醇水平降低的观点一致。

图5。维生素B12代谢途径(维基路径数据库;WP1533)。BIIE0246上调Megalin，NFkB1，身为和INSR参与这一途径(黄框)。

这些生物信息学数据有助于理解两者之间关联的潜在机制Y2Rsnp和血浆高密度脂蛋白胆固醇水平。如果Y2R阻断抑制肝脏胆固醇强效和选择性的Y2R拮抗剂可能是一种有特异性血脂异常患者的潜在候选药物Y2R单核苷酸多态性。

参考文献

1. Tatemoto K, Carlquist M, Mutt V(1982)神经肽Y:一种与YY肽和胰多肽结构相似的新型脑肽。自然296: 659 - 660。［Crossref］
2. Kaji H(2013)神经肽Y及其受体:分子结构及其在食物摄入和能量稳态中的病理生理作用。《神经肽Y》，帕克主编，新星科学出版社，39-82页。
3. 郭乐，Kitlinska JB, Tilan JU, Li L, Baker SB等。(2007)神经肽Y直接作用于外周脂肪组织并介导应激性肥胖和代谢综合征。Nat地中海13: 803 - 811。［Crossref］
4. Takiguchi E, Fukano C, Kimura Y, Tanaka M, Tanida K等。(2010)神经肽Y2受体基因5'-翼区变异与代谢参数。新陈代谢59: 1591 - 1596。［Crossref］
5. 张晓明，张晓明，张晓明，等。(2012)达西trapib治疗急性冠状动脉综合征的临床疗效。N英语J医学367: 2089 - 2099。［Crossref］
6. Draganov DI, La Du BN(2004)对氧磷酶的药物遗传学研究综述。Naunyn Schmiedebergs拱杂志369: 78 - 88。［Crossref］
7. 卢志强(2000)动脉粥样硬化。自然407: 233 - 241。［Crossref］
8. 石德明，顾玲，夏玉玲，Navab M，李文峰等。(1998)血清对氧磷酶缺乏小鼠对有机磷中毒和动脉粥样硬化的易感。自然394: 284 - 287。［Crossref］
9. 陈晓明，陈晓明，陈晓明，等。(2004)动脉粥样硬化的氧化假说:氧化磷脂和高密度脂蛋白的作用。J脂质Res45: 993 - 1007。［Crossref］
10. Kaji H(2013)高密度脂蛋白与免疫系统。J脂质2013: 684903。［Crossref］
11. 王晓明，王晓明，王晓明，等(2015)神经肽Y2受体单核苷酸多态性和细胞类型依赖性基因表达。Int Mol Med2: 251 - 255。
12. 张建军，张建军，张建军，等。(1999)神经肽Y(2)受体拮抗剂的研究进展。欧J药典384: R3-5。［Crossref］
13. Kathiresan S, Melander O, Guiducci C, Surti A, Burtt NP等。(2008)人类血液中与低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇或甘油三酯相关的六个新基因座。Nat麝猫40: 189 - 197。［Crossref］
14. Wolfs MGM, Rensen SS, Bruin-Van Dijk EJ, Verdam FJ, Greve JW，等。(2010)严重肥胖个体内脏和皮下脂肪组织中共表达的免疫和代谢基因与血浆HDL和葡萄糖水平相关:微阵列研究。BMC医学基因3:1-15。10
15. Willer CJ, Sanna S, Jackson AU, Scuteri A, Bonnycastle LL等。(2008)新发现的影响血脂浓度和冠状动脉疾病风险的基因位点。Nat麝猫40: 161 - 169。［Crossref］
16. Yokoyama C, Wang X, Briggs MR, Admon A, Wu J等。(1993)控制低密度脂蛋白受体基因转录的碱基-螺旋-环-螺旋-亮氨酸拉链蛋白SREBP-1。细胞75:187 - 197。
17. 杨军，王晓明，张文杰，等。(1994)甾醇调控元件结合蛋白-1 (SREBP-1)的膜结合、DNA结合和转录激活域的定位。J临床生物化学269: 17267 - 17273。［Crossref］
18. 华晓华，吴健，吴晓华，等。(1993)SREBP-2。第二种碱性-螺旋-环-螺旋-亮氨酸拉链蛋白，通过与一个固醇调节元件结合刺激转录。美国国家科学研究院90:11603 - 11607。［Crossref］
19. 胡晓华，王晓华，王晓华，王晓华(1996)SREBP裂解激活蛋白点突变对CHO细胞的影响。细胞87: 415 - 426。［Crossref］
20. Goldstein JL, DeBose-Boyd RA, Brown MS(2006)膜固醇的蛋白质传感器。细胞124: 35-46。［Crossref］
21. 孙丽萍，李莉，Goldstein JL, Brown MS(2005)体外抑制Scap/SREBP与COPII蛋白结合的研究进展。生物化学280: 26483 - 26490。［Crossref］
22. 陈晓明，陈晓明，陈晓明，等。(1998)动物细胞脂质组成调控的脂质蛋白酶的分子鉴定。摩尔细胞2:505 - 514。［Crossref］
23. 王晓明，王晓明，王晓明，等。(1997)srebp膜内切割所需金属蛋白酶基因S2P的克隆。摩尔细胞1: 47-57。［Crossref］
24. Hammad SH, Barth JL, Knaak C, Argraves WS。(2000) meggalin与cubilin协同作用介导高密度脂蛋白的内吞作用。生物化学275:12003 - 12008。［Crossref］
25. Ihnken K, Speiser W, Ruf W, Thiel W, Schlepper M等。(1993)冠心病患者高PAI活性与甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇值相关，心肌梗死幸存者无差异。安内科杂志67: 237 - 244。［Crossref］
26. Popa C, Netea MG, Radstake T, Van der Meer JW, Stalenhoef AF等。(2005)抗肿瘤坏死因子治疗对活动性类风湿关节炎患者心血管危险因素的影响。安·大黄64: 303 - 305。［Crossref］