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摘要

背景:木犀草素是一种黄酮类化合物，存在于各种食用植物中，对健康有多种益处，包括抗炎和抗痛风。然而，从预防痛风的角度来看，木犀草素的临床研究还很少。我们进行了一项补充富含木犀草素(LCE)的菊花提取物的临床试验，以评估对日本男性血清尿酸水平的影响。

方法:我们在两项双盲安慰剂对照研究中检查了含有10%木犀草素的LCE的效果。在单剂量研究中，空腹受试者在摄入高嘌呤碱试验餐前服用含有100 mg LCE (10 mg木草素)的胶囊或安慰剂，随着时间的推移测定血清尿酸水平。在重复给药研究中，受试者服用安慰剂或LCE胶囊4周。摄入前后测定空腹血尿酸。

结果:口服LCE对血清尿酸无显著影响。LCE摄入4周后，LCE组血清尿酸有下降趋势。受试者摄入LCE后，血清尿酸水平显著下降，基线尿酸水平为5.5至7.0 mg/dL。在摄入LCE期间或之后没有异常提示不良反应。

结论:摄入LCE 4周可降低血清尿酸水平。木犀草素可能通过控制尿酸来预防痛风。

关键字

木犀草素，菊花，痛风，尿酸，嘌呤碱

缩写

XOD:黄嘌呤氧化酶;LCE:富含木犀草素的菊花提取物;CRP: c反应蛋白;AUC:浓度-时间曲线下的面积;CFO:菊花油

背景

痛风是一种因高尿酸血症[1]而在外周组织积聚针状尿酸晶体的疾病。非甾体抗炎药[2]，类固醇[3]和秋水仙素[4]被用于抑制急性疼痛和炎症，而黄嘌呤氧化酶(XOD)抑制剂如别嘌呤醇被用于降低高血尿酸水平[5]。一些日本食物的嘌呤碱含量很高，如紫菜(海藻)、香菇(蘑菇)、鸡肝和樱花虾。然而，日本人对啤酒和酒精饮料中的嘌呤碱含量更敏感，尽管它比上述食物中的嘌呤碱含量低[7]。大约30%的日本男性患有高尿酸血症，0.8%的门诊患者正在接受痛风[8]的治疗。

在中国，干菊花被用作治疗痛风的传统药物。花中的一些成分具有抗炎活性，包括三萜醇[10,11]，八声酸衍生物[12]和类黄酮[13]。此外，据报道，含有1%菊花提取物多酚的油可以抑制大鼠的膳食高尿酸血症[14]。木犀草素是一种含有4个羟基的类黄酮，广泛存在于各种食用植物中，包括菊花[15]。据报道，它具有多种生物活性。对于痛风，木犀草素竞争性抑制XOD活性，其IC50值为微摩尔[16-18]。其对XOD的抑制作用已在小鼠口服后得到证实。此外，木犀草素抑制了氧酸盐诱导的高尿酸血症引起的肝脏XOD活性的增强[19,20]。此外，木犀草素抑制胰腺β细胞中通过尿酸产生一氧化氮，从而加剧糖尿病并发症[21]。但木犀草素对血尿酸水平[22]影响的临床报道仅一篇。 Therefore, we investigated the effects of luteolin-rich chrysanthemum flower extract (LCE) in Japanese men with slightly high uric acid levels. In the first study, we investigated whether a single oral dose of LCE suppressed the postprandial increase of uric acid in subjects ingesting a diet with a high purine base content. We also investigated whether repeated ingestion of LCE could suppress the serum uric acid level.

材料和方法

主题

在单剂量研究中，招募了39名年龄在22至71岁之间的Oryza Oil & Fat Chemical Co.的男性员工。在得到研究目的和方案的充分解释后，候选受试者同意进行筛选测试，其中包括摄入高嘌呤碱测试餐。5'-鸟苷酸二钠(1.62 g，第一Jedang Indonesia PT)和5'-异硫酸钠(1.63 g，味之素，日本)与市售玉米粉汤(17.6 g，味之素，日本)混合。然后加入180 mL热水溶解混合物，作为高嘌呤碱试验粉。候选受试者从测试前一晚晚上10点开始禁食，并在测试当天早上采集血液样本。然后他们摄入试验餐，并在60分钟、120分钟和240分钟后采集血液样本。如果受试者空腹血清尿酸水平为5.5至8.0 mg/dL，且确认摄入试验餐后血清尿酸升高，则纳入研究对象。共选取20名受试者，年龄22 ~ 70岁。

在LCE的重复给药研究中，从Oryza Oil & Fat Chemical Co. Ltd.的员工中招募了20岁及以上的健康男性，他们自由地同意了该研究。其中年龄22 ~ 71(42.8±13.3)岁，不符合以下“排除标准”的男性39例。经知情同意确认后，采集空腹血测量基线血尿酸值，按尿酸水平由高至低依次选取30名受试者。研究对象被分组，以便每组的平均年龄相似。尿酸水平为4.5 ~ 7.8 mg/dL(6.0±0.9 mg/dL)。排除标准如下。

1. 目前治疗任何慢性症状的药物。
2. 对食物或药物严重过敏。
3. 目前治疗高尿酸血症或痛风。

样品的准备和分配

用乙醇水萃取法从黄花中提取LCE野菊花中国栽培，稻谷油脂化工有限公司粉。LCE(商品名称:菊花提取物- p;很多。T-519)含10%木犀草素，将100 mg LCE放入彩色硬胶囊中服下。他们还制作了外观与LCE胶囊相同的安慰剂胶囊，含有100毫克糊精。胶囊是彩色的，从外面看不出填充物。指示测试样品分配的分配表由一名没有直接参与研究的控制人员严格保护。

在单剂量研究中，20名受试者被分为两组，使平均年龄和尿酸水平相似。在重复给药研究中，30例受试者按尿酸值从高到低分为2组。

协议

研究和统计分析是在稻谷油脂化工有限公司进行的。这些研究是安慰剂对照的双盲交叉试验。两项研究的主要结果是血清尿酸水平。

在单剂量研究中(2016年7月8日进行)，一组(n=10)摄入安慰剂胶囊，另一组(n=10)摄入LCE胶囊。所有受试者在测试前一晚10:00开始禁食，第一次采血在测试当天上午进行。然后受试者摄入高嘌呤碱试验餐，在60、120、180和240分钟后进行第二、第三和第四次采血。在摄入试验餐后2小时收集尿液。在第一次测试后的第7天，重复同样的测试。每组受试者服用另一种类型的胶囊和测试餐，并以类似于上述的方式采集血液。

在重复给药研究中，于2016年9月6日收集两组禁食受试者的血液和尿液。每组15名受试者，每日一颗安慰剂胶囊或一颗LCE胶囊，饭后用水，持续4周。然后采集空腹受试者的血液和尿液样本。经过13天的洗脱期后，再次采集禁食受试者的血液和尿液样本。然后，每组受试者服用另一种类型的胶囊(LCE或安慰剂)4周，之后在禁食条件下采集血液和尿液样本。

血液和尿液分析

在单剂量研究中，收集的血液样本被离心以获得血清。血清和尿液中的尿酸水平由FALCO生物系统有限公司(京都，日本)测定。

在重复给药研究中，取血清测定尿酸和c -反应蛋白(CRP)，全血测定红细胞沉降率和白细胞计数。这些参数由FALCO生物系统有限公司确定。用pH纸测量尿液pH值为3.8 ~ 5.4和5.5 ~ 9.0。

道德与合规

本研究是根据《赫尔辛基WMA宣言》(2013年第64届WMA大会，巴西)开展的，并符合伦理考虑。考虑到每个受试者的人权和安全。“稻谷油脂化学伦理委员会”是由稻谷油脂化学株式会社药学博士出身的科学家、医学博士和律师事务所出身的律师组成的。委员会的成立是为了评估议定书的伦理性质和适当性。这两项研究是根据伦理委员会批准的方案进行的，任何对方案的实质性偏离都需要委员会的授权。两项研究都在大学医院医学信息网络-临床试验注册中心注册(UMIN000023818和UMIN000022823)。

不良事件调查

对不良事件进行评价，并确定与试验物质的因果关系。如果有必要，是否继续研究的决定由负责的医生做出。不良事件被定义为摄入LCE导致受试者不愉快的症状。如果受试者要求停止研究，研究将立即停止，并考虑到防止对受试者造成不利影响。

排除标准

如果在重复给药研究期间发生以下任何事件，则在临床会议上讨论该病例，并在复查后排除该受试者分析。

1. 如果受试者每次参加测试时迟到。
2. 如果没有摄入测试产品的天数(即没有达到指定的每日摄入量)大于计划摄入总天数的15%。
3. 如果由于测试问题或其他原因导致数据的可靠性出现重大问题。
4. 其他理由表明排除该主题是适当的。

统计分析

结果报告为平均值和标准差(尿液参数除外)。小动物——一张长有配对t-test用于胶囊摄入前后的比较。未配对的t-test用于比较安慰剂组与LCE组。概率小于5%被认为是显著的。

结果

单剂研究

将洗脱期前后进行的测试结果进行合并(共20名受试者)。服用安慰剂或LCE胶囊前血清尿酸水平分别为6.8±1.0 mg/dL和6.6±1.0 mg/dL。在试验餐后2小时，血清尿酸上升到9.1±1.3 mg/dL(安慰剂)和9.0±1.3 mg/dL (LCE)。在试验餐后4小时，尿酸保持在8.5 mg/dL以上。两组的浓度-时间曲线下面积(AUC)几乎相同，安慰剂组为457±179 mg/dL·4小时，LCE组为469±201 mg/dL·4小时。图1A显示了所有受试者和尿酸水平低于7.0 mg/dL的受试者血清尿酸水平的升高。在试验餐后4小时内没有显著差异。两组尿尿酸排出量相似(图1B)。

图1所示。给予高嘌呤碱试验餐的受试者单次口服LCE后血清尿酸的变化。

四周repeated-administration研究

在研究期间，两名受试者因个人原因分别退出了安慰剂组和LCE组。表1为服用安慰剂胶囊和LSE胶囊后血清尿酸的变化。摄入LSE可使尿酸显著降低(-0.18 mg/dL)。对尿酸水平大于5.5和小于7.0 mg/dL的受试者也进行统计分析。结果，与安慰剂组相比，LCE组尿酸水平明显降低。血压、脉搏、尿液pH值(安全评价参数)的变化见表2。所有的数值均在正常范围内，摄入前后及两组间无显著差异。此外，在服用安慰剂胶囊或LCE胶囊期间，炎症参数(CRP、红细胞沉降率和白细胞计数)没有改变(表3)。

表1。服用安慰剂或LCE前后4周的血清尿酸水平

		之前	后	净改变(Δ)
第一次月经
A组	安慰剂	5.84±0.94	5.88±0.94	0.05±0.55
B组	如冰	6.12±1.10	5.98±1.07	-0.14±0.37
第二个时期
A组	如冰	6.08±1.27	5.82±1.02	-0.26±0.50
B组	安慰剂	5.88±0.93	5.65±0.88 __	-0.23±0.38
总(所有科目)
安慰剂		5.96±1.10	5.85±0.96	-0.11±0.54
如冰		6.00±1.00	5.82±0.97 __	-0.18±0.37
总尿酸(尿酸5.5 ~ 7.0 mg/dL)
安慰剂		5.91±0.59	6.09±0.52	0.18±0.48
如冰		6.18±0.65	5.98±0.55	-0.20±0.38 *

值表示平均值和标准差(n=13或26)。安慰剂与LCE之间的显著差异*:p< 0.05。摄入前后差异有统计学意义†:P < 0.05。

表2。摄入LCE或安慰剂前后的血压、脉搏和尿液pH值

		之前	4周后	净改变(Δ)
收缩压(mmHg)	安慰剂	136.2±13.1	132.8±15.8	-3.4±14.5
	如冰	134.5±13.7	130.5±15.7	-3.9±10.5
舒张压(mmHg)	安慰剂	81.5±8.6	79.6±8.9	-1.9±8.1
	如冰	80.4±11.7	79.2±10.0	-1.3±9.9
脉冲重复频率 (/分钟)	安慰剂	78.1±17.9	77.8±13.3	-0.3±10.5
	《	73.8±14.2	79.2±10.0	5.4±14.5
尿液pH值	安慰剂	6.63±0.48	6.67±0.49	0.04±0.47
	《	6.52±0.54	6.69±0.49	0.17±0.45

值表示平均值和标准差(n=26)。两组摄入前后及两组间无显著差异。

表3。摄入LCE或安慰剂前后的实验室参数

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值表示平均值和标准差(n=26)。两组摄入前后及两组间无显著差异。

讨论

我们研究了LCE对日本健康人血清尿酸水平的影响。结果发现，单剂量口服LCE不能抑制高嘌呤碱试验餐后尿酸的升高。建筑师等．报道了含有木犀草素的菊花油(CFO)可以抑制日本受试者在摄入高嘌呤基础饮食[22]后血清尿酸的升高。在他们的研究中，在基线血清尿酸水平为7.1 mg/dL或更高的受试者中，观察到CFO对尿酸的显著抑制，而在基线血清尿酸水平为6.5 mg/dL或更高的受试者中，安慰剂组和CFO组之间没有显著差异。在日本，诊断高尿酸血症的标准是血清尿酸水平大于7.0 mg/dL。在这项研究中，我们检查了LCE对血清尿酸水平从正常到高尿酸血症(5.5到8.0 mg/dL)范围内的日本男性的影响。然而，LCE并没有抑制所有受试者或尿酸水平小于或大于7.0 mg/dL的受试者尿酸水平的升高(数据未显示)。因此，CFO似乎可以降低高尿酸血症患者餐后尿酸水平，而LCE对餐后尿酸升高无影响。CFO和LCE成分的差异可能导致了不同的结果。CFO的类黄酮含量在报告中未提及，LCE的木犀草素含量为10%，其他多酚类化合物含量相对较低。因此，木犀草素(LCE的主要成分)似乎对餐后血清尿酸水平的升高没有影响。

在第二项研究中，摄入LCE 1个月后，受试者的血清尿酸水平下降，基线尿酸水平为5.5至7.0 mg/dL。因此，LCE似乎抑制了轻度升高的尿酸水平。在结构相似的类黄酮衍生物中，槲皮素(500 mg/天)摄入4周已被报道可以降低基线血清尿酸水平而不影响尿酸排泄[23]。此外，摄入6个月大豆衍生的大豆苷(40 mg/天)可降低高胆固醇血症受试者的血清尿酸。在含有多酚的加工食品中，绿茶[25]和红茶[26]提取物已被报道可抑制血清尿酸水平。因此，有证据表明多酚类化合物如类黄酮和儿茶素衍生物可以降低基线血清尿酸水平。因此，LCE中的木犀草素也可能通过与报道的多酚相似的机制抑制基线血清尿酸。

结论

摄入LCE 4周可抑制日本轻度高尿酸血症男性的空腹血尿酸水平。

资金

该研究由稻谷油脂化工有限公司资助。

的利益冲突

与本研究相关的所有作者均为日本爱知市稻子油脂化工有限公司的员工。作者声明与此稿件没有任何利益冲突。

参考文献

1. Dalbeth N, Merriman TR, Stamp LK(2016)痛风。《柳叶刀》388: 2039 - 2052。(Crossref)
2. Janssens HJ, Janssen M, van de Lisdonk EH, van Riel PL, van Weel C(2008)口服泼尼松龙或萘普生治疗痛风关节炎:一项双盲、随机等效试验。《柳叶刀》371: 1854 - 1860。(Crossref)
3. Rainer TH, Cheng CH, Janssens HJ, Man CY，等(2016)口服泼尼松龙治疗急性痛风:一项实用的、多中心、双盲、随机试验。安实习生地中海164: 464 - 471。［Crossref］
4. 王燕，王磊，李娥，李燕，王铮等。(2014)川湖抗痛风合剂与秋水仙碱治疗急性痛风性关节炎:一项随机、双盲、双假、非劣效性试验。国际医学科学11: 880 - 885。(Crossref)
5. Takir M, Kostek O, Ozkok A, Elcioglu OC, Bakan A，等。(2015)别嘌醇降低无症状高尿酸血症患者的尿酸抵抗和全身炎症。J Investig地中海63: 924 - 929。
6. Kaneko K, Aoyagi Y, Fukuuchi T, Inazawa K, Yamaoka N(2014)用于促进痛风和高尿酸血症营养治疗的普通食品总嘌呤和嘌呤碱含量。生物制药的公牛37: 709 - 721
7. Inokuchi T, Ka T, Yamamoto A, Takahashi S, Tsutsumi Z，等。(2008)别嘌醇对啤酒诱导的血浆嘌呤碱和尿苷浓度升高的影响。核苷酸核酸27日:601 - 603。［Crossref］
8. Hakoda M(2012)日本高尿酸血症和痛风的近期趋势。日本医学协会55岁:319 - 323。(Crossref)
9. 孔德良，蔡勇，黄伟伟，程长青，谭荣祥(2000)用于治疗痛风的中药对黄嘌呤氧化酶的抑制作用。J Ethnopharmacol73: 199 - 207。(Crossref)
10. Akihisa T, Yasukawa K, inuma H, Kasahara Y, Yamanouchi S等(1996)菊科植物花中的三萜醇及其抗炎作用。植物化学43: 1255 - 1260。(Crossref)
11. 王晓燕，王晓燕，王晓燕，等(2001)菊科植物的化学成分分析。2.三萜二醇，三醇，和它们的3-O-脂肪酸酯及其抗炎作用。农业食品化学49: 3187 - 3197。(Crossref)
12. Luyen BT, Tai BH, Thao NP, Cha JY, Lee HY，等(2015)野菊花花。Bioorg Med Chem Lett25日:266 - 269。(Crossref)
13. 陈晓燕，李娟，程伟明，姜辉，谢晓峰，等。(2008)黄酮类化合物对黄芩芩苷的影响野菊花佐剂性关节炎大鼠关节滑膜细胞凋亡的研究。Am J chinmed36: 695 - 704。［Crossref］
14. Honda S, Kawamoto S, Tanaka H, Kishida H, Kitagawa M，等。(2014)菊花油对高尿酸血症的抑制作用:DNA微阵列分析揭示的作用机制。学生物化学生物科技Biosci》78: 655 - 661。［Crossref］
15. 陈丽，Kotani A, Kusu F，王铮，朱军，等。(2015)中药中咖啡因基奎宁酸和黄酮类化合物的定量比较菊花三通道电化学液相色谱法对花及其硫熏蒸产物的研究。Chem Pharm Bull(东京)63: 25-32。［Crossref］
16. 闫静，张刚，胡燕，马燕(2013)木犀草素对黄嘌呤氧化酶的抑制动力学及相互作用机理与对接模拟。食品化学141: 3766 - 3773。［Crossref］
17. 李燕，Frenz CM，李铮，陈敏，王燕等(2013)在体外黄嘌呤氧化酶和环氧合酶-2治疗痛风的植物化学抑制剂的生物测定筛选。化学生物制药81: 537 - 544。［Crossref］
18. 孔德良，Wolfender JL, Cheng CH, Hostettmann K, Tan RX(1999)黄嘌呤氧化酶抑制剂Brandisia hancei．足底地中海65: 744 - 746。(Crossref)
19. de Souza MR, de Paula CA, Pereira de Resende ML, Grabe-Guimarães A, de Souza Filho JD等(2012)Lychnophora trichocarpha在痛风性关节炎:抗高尿酸血症和抗炎作用的提取物，部分和成分。J Ethnopharmacol142: 845 - 850。［Crossref］
20. 莫芳芳，周芳，吕永忠，胡庆昌，张德明，等。黄酮类化合物对小鼠低尿血症的作用:构效关系。生物制药的公牛30: 1551 - 1556。［Crossref］
21. 丁艳，石霞，帅霞，徐艳，刘艳，等(2014)木犀草素对尿酸诱导的胰腺β细胞功能障碍的抑制作用。J生物医学Res28日:292 - 298。(Crossref)
22. Ueda T, Honda S, Morikawa H, Kitamura S, Iwama Y，等。(2015)菊花油抑制饮食诱导的成年男性血清尿酸升高。一项随机、双盲、安慰剂对照的交叉对照研究。Nutrafoods14: 151 - 158。
23. Shi Y, Williamson G(2016)槲皮素降低高尿酸血症前期男性血浆尿酸:一项随机、双盲、安慰剂对照、交叉试验。Br J减轻115(5): 800 - 6。［Crossref］
24. Kimira M, Arai Y, Shimoi K, Watanabe S(1998)日本人从食物中摄入的类黄酮和异类黄酮。增加8: 168 - 175。(Crossref)
25. Jatuworapruk K, Srichairatanakool S, Ounjaijean S, Kasitanon N, Wangkaew S，等(2014)绿茶提取物对健康人群血清尿酸和尿酸清除率的影响。中国Rheumatol20: 310 - 313。(Crossref)
26. Bahorun T, Luximon-Ramma A, Gunness TK, Sookar D, Bhoyroo S，等(2010)红茶可降低心血管疾病易感人群的尿酸和c反应蛋白水平。毒理学278: 68 - 74。［Crossref］