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摘要

草药茶，如由植物制成的茶Houttuynia cordata几代人以来一直被用来促进健康。草药茶含有许多成分，人们担心草药茶会影响药物的药代动力学。在这项研究中，我们研究了草药茶对药物渗透性的影响。我们以人结肠癌细胞系Caco-2为模型，研究了两种药物在肠细胞膜上的通透性。我们量化了四种不同茶提取物（1 mg/mL或10 mg/mL）与否时，从Caco-2细胞顶膜到基底膜传递的地高辛和维拉帕米的量(悬钩子属植物suavissimus李先生，银杏,Houttuynia cordata，及杜仲)．这些提取物用热水制成并干燥。在我们的实验中，干燥的提取物被重新悬浮在水中。结果表明悬钩子属植物suavissimus李先生，Houttuynia cordata，及杜仲当浓度为1mg/mL或10mg/mL时，地高辛从Caco-2细胞顶膜到基膜的渗透性不受影响银杏当浓度为10 mg/mL时，地高辛和维拉帕米的渗透性显著增加。尽管该浓度高于典型的茶制剂，银杏由于已知地高辛和维拉帕米均由P-糖蛋白转运，因此提取物可能通过抑制药物出口P-糖蛋白（P-gp）发挥这种作用。

关键词

P-糖蛋白、维拉帕米、地高辛、银杏叶、杜仲、鱼腥草、酸橙

介绍

在发达国家，生活方式疾病的发病率有所上升。对健康促进的兴趣越来越大，这反映在功能性食品和补充剂的销售不断增长。据估计，2011年，维生素和矿物质补充剂及功能性食品的全球市场价值约为253亿美元[1]。虽然大部分补充剂销售的是维生素和矿物质，但很大一部分是含有草药的功能性补充剂。传统上，使用草药茶是为了预防疾病。草药茶成分的功效和有效性已被广泛研究，草药茶的有效性茶对高血压[2]、炎症[3,4]、过敏[5]和大脑活动的改善[6]都有记录。

出于维护健康的一般目的使用草药茶似乎不会带来健康风险，但人们已经开始关注草药茶消费的潜在药物相互作用[7]。据报道，超过80%的患者服用某种补充剂，其中一半的患者服用维生素和矿物质以外的补充剂[8]。补充剂和药物之间的潜在相互作用尚未得到充分研究[9]。

草药茶含有可与其他药物相互作用的药物化合物。例如，一些草药含有呋喃香豆素，可抑制P-糖蛋白（P-gp），P-糖蛋白可从细胞中输出药物。呋喃香豆素还可抑制细胞色素P450（CYP）3A4，一种代谢酶。呋喃香豆素影响P-gp底物药物的药代动力学参数[10]。研究表明，甘草根（通常用作甜味剂）也抑制P-gp[11,12]。

本研究考察了黄芪提取物的作用银杏bioba.杜仲,Houttuynia cordata，及悬钩子属植物suavissimus以人结肠癌细胞系Caco-2作为药物肠道吸收的模型研究地高辛和维拉帕米的通透性。

材料和方法

4.1材料

地高辛和维拉帕米分别从SIGMA-ALDRICH(圣路易斯，MO，美国)和Wako(大阪，日本)获得。茶叶中的干制品(3-5克)银杏（日本横滨Kenko食品公司），杜仲(小林制药，日本大阪)Houttuynia cordata（日本名古屋本三）或悬钩子属植物suavissimusS. Lee (Honzo，名古屋，日本)用500 mL沸水在100℃下培养5 min提取，真空浓缩至体积20 mL，各真空浓缩溶液蒸发1 mL至干燥。对蒸发残渣进行称重，计算药茶提取物的浓度。每一种凉茶的提取物在Hanks的含10mm HEPES (pH 7.4)的平衡盐溶液中制备为1mg /mL或10mg /mL(图1,2)。

4.2细胞培养

从ATCC (Manassas, VA, USA)获得人结肠癌细胞系Caco-2的培养物，并在含10%胎牛血清、100单位/mL青霉素和100 μg/mL链霉素的DMEM中维持，条件为37℃、5% CO_2..形成CaCo-2细胞单层，1×10^5.在37°C温度下，在5%CO浓度下，将细胞镀入孔径为3.0µm的12孔Transwell板（美国纽约州康宁市康宁）中21天_2..培养基每2-3天更换一次。

4.3地高辛和维拉帕米的定量

将地高辛（最终浓度2µM）或维拉帕米（最终浓度20µM）添加到没有或存在草药茶提取物的顶腔中。2 h后，从底腔收集1 mL培养基。0.5 mL 200 mM磷酸盐缓冲液（pH 9.3）和1 mL乙酸乙酯/己烷/二氯甲烷（3:1:1，v/v）添加混合物。摇动10分钟后，离心样品（10000×g，4°C，10分钟）。将体积为0.5 mL的上层有机层转移到管中，并在40°C的气流条件下蒸发至干燥。蒸发的残留物溶解在100µL水/CH中_3.CN (7:3, v/v)混合物，用作HPLC定量样品。

使用100 mm×φ4.6 mm、3μm ODS柱（Unison UK-C18，Imtakt），以0.8 mL/min的流速使用水/CH，通过HPLC（Shimazu，SPD-M20A）对地高辛（图1）进行定量_3.CN（7:3）；监测220 nm处的吸光度。使用100 mM AcONH以1.0 mL/min的流速通过HPLC对维拉帕米（图2）进行定量_4./ CH_3.CN（6:4）；监测235 nm处的吸光度。

图1。草药茶提取物对地高辛通透性的影响。每次治疗的平均值为±S.E.n=4。显著差异（*：P<0.05 vs对照，威廉姆斯试验）

4.4统计分析

多重观察结果以平均数±扫描电镜表示。采用单因素方差分析（ANOVA）和威廉姆斯检验进行多重比较。P< 0.05被认为是显著的。

结果

我们使用来自肠道的Caco-2细胞单层评估草药茶提取物对药物渗透性的影响。我们通过测量穿过处理过的单层的地高辛和维拉帕米的量来检查每种茶对P-gp转运的影响。

首先，我们研究了草药茶提取物对Caco-2细胞单层从顶端到基底的地高辛渗透性的影响。每种浓缩提取物的浓度如下：银杏90毫克/毫升;杜仲，30mg/mL；Houttuynia cordata，50mg/mL；悬钩子属植物suavissimusS.Lee，50 mg/mL地高辛（1.0 nmol）单独或与1 mg/mL或10 mg/mL银杏,杜仲,Houttuynia cordata或悬钩子属植物suavissimus将其添加到顶端的缓冲液中。定量地高辛输送到基底侧的量(图1):单独地高辛，0.33 nmol (33.3%);地高辛1毫克/毫升的提取物银杏，0.39 nmol（39.3%）；含10 mg/mL地高辛的银杏，0.47 nmol(46.5%)(图1A)。因此银杏地高辛通透性的增加呈剂量依赖性。然而，其他三种茶对地高辛的转运没有显著影响（图1B、C、D）。

我们还研究了银杏维拉帕米转运提取物。维拉帕米（10 nmol）单独或与1 mg/mL或10 mg/mL银杏将提取物添加到顶端的缓冲溶液中，然后定量输送到基底侧的维拉帕米量（图2）。基底侧的维拉帕米量如下：单独维拉帕米，2.65 nmol（26.5%）；维拉帕米与1 mg/mL银杏提取,2.63nmol（26.3%）；维拉帕米与10mg/mL银杏提取,3.37 nmol(33.7%)。在10 mg/mL的浓度下，维拉帕米的转运明显增加银杏摘录

图2。影响银杏提取对维拉帕米渗透性。值为平均值±S.E. n = 3。显著差异(*:P<0.05 vs对照，威廉姆斯试验）

讨论

关于功能性食品和药物之间相互作用的研究结果将取决于每种药物。例如，大约40种功能性食品调节华法林的作用[13]。但是，关于功能性食品和药物之间相互作用的可用信息有限[14].据我们所知，医学手册很少提及能与药物相互作用的食物，除了有文献记载的葡萄柚汁（GFJ）[15,16]和圣约翰麦汁(贯叶连翘)[17]。在本研究中使用的四种茶中，只有银杏据报道与药物相互作用[18]。

正常饮用的提取物浓度为1.2-3.6 mg/mL，因此本研究中使用的提取物的有效浓度为10 mg/mL（图1），比正常饮用茶中消耗的提取物浓度高2.8-8.3倍。杜仲,Houttuynia cordata，及悬钩子属植物suavissimusS.Lee对地高辛从根尖膜到基膜的转运水平没有显著影响（图1B、C、D）。因此，我们的结果表明，食用正常浓度的草药茶不应影响P-gp的药物转运。

相反，银杏提取物以剂量依赖的方式增加地高辛从根尖到基膜的渗透性（图1A）。银杏提取物也增加了维拉帕米的渗透性（图2），银杏提取物可能通过抑制顶端P-gp的输出而发挥这种作用。这些结果与Wang的结果一致et al。[19] ，他证明了银杏抑制P-gp的功能[19]银杏P-gp提取物可以忽略不计，因为有效浓度（10 mg/mL）大于典型茶制剂的浓度（3.6 mg/mL）。

抑制和诱导2021版权所有。版权所有Reserviso影响这些药物治疗的药代动力学。这应该引起关注，因为CYP3A4与许多药物的代谢有关。众所周知，CYP3A4和P-gp的底物特异性存在重叠[20]因此，P-gp的底物可能显著影响药代动力学。GFJ影响CYP3A4和P-gp的功能[16]。此外，绿茶中的儿茶素(山茶)影响CYP3A4和P-gp的功能在体外[21]。此外，有报道称银杏抑制CYP3A4和P-gp的功能[19,22]。然而，韩国的一项临床研究表明，与西洛他唑联合使用时，西洛他唑的药代动力学没有显著影响银杏[23]。另外，据评价，在德国接受癌症治疗的30 ~ 70%的患者中，草药被用作替代药物银杏可以安全地与药物一起使用[24]。因此，含有抑制代谢酶和/或药物转运蛋白成分的食品在体外可能不会影响药代动力学。

有必要检查长期摄入功能性食品的影响，即使一次性食用不会影响药代动力学参数。例如，大鼠四周的膳食补充成分会影响血液中地高辛水平的最大浓度（C_最大值)、血药浓度-时间曲线下面积(曲线下面积，AUC)[25]。据报道，癌细胞长期暴露在山奈酚中会显著增加谷胱甘肽s-转移酶活性和降低抗癌药物的作用，尽管这是一个在体外研究[26]。

总之，由于茶叶提取物的浓度（10 mg/mL）这项研究中使用的浓度比正常饮用浓度高2.8-8.3倍，这四种茶对药物吸收的影响可以忽略不计。但是，检查长期服用草药茶对药代动力学和药物效应的影响仍然很重要在活的有机体内.

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