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摘要

在石油醚、丙酮和乙醇提取物中，植物化学的一级和二级化合物的存在菲amarus在定性和定量上均有检测。石油醚提取物中含有生物碱、萜类、单宁、多酚类和奎宁类化合物p . amarus．丙酮提取物中含有萜类、类黄酮、单宁、皂苷、心苷和奎宁，而乙醇提取物中不含生物碱和萜类p . amarus．从不同溶剂提取物p . amarus共鉴定出20种次生植物化学物质。其中，六种生物活性化合物的存在{十二羧酸;2-丙酸(三环[3.3.1.13,7]12 -2-亚烯);十四酸;Neophytadiene;通过文献鉴定了十六烷酸、乙酯和9,12,15 -十八烯酸(Z, Z, Z)-}。在三种溶剂中，乙醇提取物p . amarus研究发现，在富营养化的无叶蒿(Artemia nauplii)中，其生存、生长、营养指标(增重和特定生长率)和基本生化成分(总蛋白、氨基酸、碳水化合物和脂类)浓度均为最佳m . rosenbergii早期后幼虫。这表明对虾的总体健康状况得到了改善。本研究表明，黄芩的主要植物化学性质和次生生物活性成分p . amarus是否具有持续增强生存、生长和营养质量的效力m . rosenbergii．因此，推荐这种草本植物作为饲料添加剂。

关键字

对虾，生长物，蒿，海蚕，饲料添加剂

简介

药用植物为制药、化妆品、食品工业提供了取之不尽的原料资源，最近还为农业害虫防治提供了原料。草本提取物可定义为从新鲜或干燥植物或植物部分(如叶、花、种子、根和树皮)中获得的化合物和/或化合物的混合物。带我种子的植物，菲amarus是一种常见的泛热带杂草，在潮湿、阴凉和阳光充足的地方生长良好。它广泛分布在热带和亚热带地区。它已经在阿育吠陀医学中使用了2000多年，有广泛的传统用途。有报道通过阻断乙型肝炎病毒DNA聚合酶治疗黄疸[3-5]。也有报道称，它被用于治疗糖尿病、中耳炎、腹泻、淋病，以及月经频繁、泌乳、白带、月经过多、乳腺脓肿、皮肤溃疡、高血压、疼痛、炎症、咳嗽、哮喘支气管炎、胃肠道紊乱、寄生虫感染、痛觉疼痛、突变和癌症。它具有尿石性质，溶解肾结石[6]。

p . amarus蛋白质含量适中，碳水化合物含量丰富，脂肪、灰分、粗纤维含量低。还含有Mg、Ca、K、PO和抗坏血酸、Fe;锌，硫胺素，烟酸和核黄素[7]。据报道P. amarus含有许多有价值的化合物，如木脂素，类黄酮，水解单宁(鞣花丹宁)，多酚，三萜，甾醇和生物碱[8]。从中分离得到的提取物和化合物p . amarus据报道具有广泛的药理特性，包括抗病毒抗真菌、抗菌、抗疟原虫抗炎、抗肿瘤、抗癌、抗糖尿病、抗氧化、抗高血糖、降血脂、免疫刺激、保肝、保肾和利尿[7,9 -18]。

随着生态友好和可持续水产养殖的需求，植物提取物用于水生动物的研究越来越多。药用植物含有植物化学物质，这些生物活性物质负责它们所表现出的生物活性。因此，药典[20]中引入了草药提取物。水产养殖中草药生物医学活性成分由于含有生物碱、类黄酮、色素、酚类、萜类、淀粉、类固醇和精油等，具有促进生长和生存、滋补提高免疫系统、抗微生物、抗应激、刺激食欲等特点。最近的研究表明，在鱼/虾饲料中加入药用植物(原料、提取物和植物化合物)作为添加剂可以促进生长和免疫应答[21-34]。

淡水对虾，Macrobrachium rosenbergii是许多国家最受欢迎的商业化农业。在由于疾病爆发和其他因素导致养虾业受挫后，该项目势头强劲。新孵化的m . rosenbergii幼虫身长约2至2.2毫米。它们通常在孵化后1天开始进食，最初需要活的浮游动物。它们的猎物应该有适合食用的大小;最佳尺寸估计为300 ~ 500 μ m。

活生物体是营养元素的活胶囊，如必需蛋白质、氨基酸、脂类、脂肪酸、碳水化合物、维生素和矿物质。卤虫无节幼虫是海洋、淡水鱼和甲壳类动物种子生产中最广泛使用的活食用生物。刚孵出的无背Artemia nauplii被认为是第一周最成功的开始饮食，但在那之后，通常与准备好的饮食相结合，因为这是一种杂食性[36]。正常情况下，每克优质卤水虾包囊[37]孵化出20万至30万只无尾虾，虾幼虫和早期幼虫更喜欢活的生物体，而不是配方饲料。

青蒿营养价值高，转化效率高。生命的所有阶段卤虫即包囊(脱囊后)、无尾虫、幼虫、亚成虫用作饲料。今天，在大多数商业水产孵化场，无叶蒿几乎被用作唯一的饮食。冷冻成虫，被水族养殖者，养鱼者和水产养殖者广泛使用。Artemia生物质还被用作家畜的食品添加剂或制药产品的提取，以及制作富含蛋白质的食品。在一些国家，它甚至被用于人类消费。由于其巨大的效用，Artemia贸易是一个不断增长的业务在世界几个地区[38]。

因此，在本研究中，我们试图检查石油醚、丙酮和乙醇提取物中存在的一级和二级植物化学化合物p . amarus整株植物。这些提取物在无叶Artemia nauplii上进行浓缩并喂给m . rosenbergii评价其营养指标[存活率(SR)、增长(LG)、增重(WG)和特定生长率(SGR)]，并定量基本生化成分(总蛋白、氨基酸、碳水化合物和脂类)的浓度。

材料与方法

传统的草药带着种子植物，菲amarus采集于印度泰米尔纳德邦哥印拜陀巴拉提尔大学校园[图1]，并经哥印拜陀印度植物学研究所鉴定。用淡水彻底洗净，吸干后摊开，室温晾干2周。阴凉干燥的草药被磨成细粉。通电后的样品保存在无菌容器中，以备以后使用。

图1所示。这是一种带种子的植物。(Schumach & Thonn)， Infra王国:链藻;超科:胚胎植物;师:导管植物;细分:Spermatophytina;类:Magnoliopsida;总目:Rosanae;秩序:Malpighiales;叶蕨科;综合分类信息系统;a).整株植物; b). Branches of P. amarus with leaves and seeds; c). Root ofp . amarus。

p . amarus是一种小型直立的一年生草本植物(高10-60厘米)，有许多小的长圆形椭圆形或方形的叶子，无毛(长6-12毫米)。主茎简单或分枝，圆柱状光滑或粗糙在较年轻的部分[39]。花很小，颜色是黄色的，隐藏在叶子下面，排成美丽的阵列。花结出很小(2毫米)的果实，果实会裂开，种子会被甩出去。当植物被采摘时，羽毛状的叶子会折叠起来，完全闭合。amarus是一种常见的泛热带杂草，在潮湿、阴凉和阳光充足的地方生长良好。它广泛分布在热带和亚热带地区。

提取物的制备

粉末状的整株植物样品p . amarus取50克，用Whatmann 1号滤纸包装，放入索氏仪。萃取物依次用300ml (1:6 w/v)石油醚(纯度为99.98%，SRL Pvt. Ltd.)浸泡。分别提取印度)、丙酮(纯度99.5%，SD Fine Chemicals，印度)和乙醇(纯度99.9%，常熟Yangyuan Chemicals，中国)，并根据极性(非极性到极性)依次提取6-9小时(30 - 36个周期)。反复提取，直到得到透明无色的溶液。提取液用双层细棉布过滤，用旋转真空蒸发器(ROTAVAP)在40-50℃下浓缩。得到的提取物在40°C下真空干燥，用于进一步研究。得到的提取物呈深绿色，粘稠固体。

主要植物化学物质的定性分析

使用Trease & Evans[40]的标准定性程序检测提取物中主要植物化学生物分子的存在，如生物碱、萜类、黄酮类、单宁、多酚、皂苷和心苷。

植物次生化合物的气相色谱-质谱分析

不同溶剂提取物p . amarus进行GC-MS分析(Thermo GC-trace ultra -5.0;热MS-DSQ-II;ZB 5-MS毛细管标准非极性色谱柱(30 mts, 0.25 mm id, 0.25µm薄膜)，用于鉴定不同的植物化合物(南印度纺织研究协会(SITRA)， Coimbatore, Tamil Nadu，印度)。GC-MS的工作条件为:载气He;流,1.0毫升/分钟;温度方案，烤箱温度从70°C提高到260°C以6°C/min;注射体积，1µl;检测器，质量选择检测器MS-DSQ-II与XCALIBUR软件;注入器温度250°C;离子源温度200℃; Interface temperature, 250 °C; Total running time, 40 min; Relative percentage constituents was expressed as percentage with peak area normalization. Different solvent extracts ofp . amarus进行GC-MS分析(Thermo GC-trace ultra -5.0;热MS-DSQ-II;ZB 5-MS毛细管标准非极性色谱柱(30 mts, 0.25 mm id, 0.25µm薄膜)，用于鉴定不同的植物化合物(南印度纺织研究协会(SITRA)， Coimbatore, Tamil Nadu，印度)。GC-MS的工作条件为:载气He;流,1.0毫升/分钟;温度方案，烤箱温度从70°C提高到260°C以6°C/min;注射体积，1µl;检测器，质量选择检测器MS-DSQ-II与XCALIBUR软件;注入器温度250°C;离子源温度200℃; Interface temperature, 250 °C; Total running time, 40 min; Relative percentage constituents was expressed as percentage with peak area normalization.

相对丰度为0-100的峰被认为是主要化合物。为了显示小峰，放大了色谱图。根据峰面积、保留时间和分子式，确定了各提取物中存在的各种成分。通过将这些提取物的保留指数和质谱碎片模式与计算机库中存储的数据以及已发表的文献进行比较，确定了这些提取物中存在的各种成分。国家标准技术研究所(NIST4)和WILEY9[41]，在线库源也用于匹配识别的组件。

的近似组成p . amarus

的近似组成p . amarus采用AOAC方法[42]估算水分、粗蛋白质、粗纤维、粗脂肪和灰分含量，采用Castell & Tiews方法[43]减去上述含量计算总无氮浸出物(碳水化合物)含量。

卤虫囊肿的孵化及其富集

卤虾，卤虫franciscana包囊购自水世界，巴黎角，金奈，印度。取包囊(饲养试验虾体生物量2 g/ 20 L, 15 g kg-1)，用1 L-1纯化人工盐水(由35.0 g L-1人工海盐粉配制，pH为6.5)水化。12-15 h后，包囊破裂，可见胚被孵化膜包裹。几个小时后，棕黄色的无尾鼠出来了。将48h陈龄无叶蒿收集于筛上，分别用1%的石油醚、丙酮和乙醇提取物进行富集p . amarus分别以每100毫升1克的速度冲洗1小时。

实验动物的采购和驯化

淡水对虾的早期后期幼虫(PL-10)m . rosenbergii是从印度泰米尔纳德邦恰尔帕图的Sri Durgai孵化场采购的。它们被装在装满含氧水的塑料袋里运到实验室。对虾在6 × 3 × 3英尺的水泥罐中适应实验室环境条件(温度26.5±1.3℃;pH值,7.01±0.12;TDS, 0.80±0.05 g/l;DO, 7.30±0.49 mg/l;BOD, 29.0±1.24 mg/l;COD: 124.0±3.2 mg/l;氨，0.026±0.007 mg/l)。在驯化过程中，以未富集的无叶蒿为饵料。 About half of the tank water was renewed each day and adequately aerated to maintain a healthy environment. This ensures an environment devoid of accumulated metabolic wastes and sufficient oxygen supply to the prawns. The unfed feeds, faeces, moult and dead prawns were removed by siphoning.

用提取物饲喂试验p . amarus丰富卤虫无节幼虫

m . rosenbergii长度为0.8±0.06 cm，重量为0.06±0.02 g的早期PL被用于三个重复的实验设置。虾被分成四组。一组为对照组，饲喂未富集的无叶蒿，另外三组分别饲喂1%的石油醚、丙酮和乙醇提取物p . amarus以每天8点、2点和10点3次(上午8点、下午2点和晚上10点)富集无叶蒿30 d。在饲养试验结束时，测量最终长度和体重，以计算营养指标和估计基本生化成分。在饲养试验期间，每天用虹吸法更新水介质，对对虾没有严重的干扰，并充分通气。

营养指标的测定

Tekinay & Davis[44]分别计算成活率(SR)、增长(LG)、增重(WG)和特定生长率(SGR)。

1. 存活率(%)=总数活体动物/总数初始动物的100倍

2长度增益(cm) =最终长度(cm) -初始长度(cm)

3增重(g) =最终重量(g) -初始重量(g)

iv.比增长率，(%)= log W2 - log W1/ t ×100

式中，W1和W2分别=初始权重和最终权重(g)， t =实验总天数。

基本生化成分的估计

试验对虾中总蛋白、氨基酸、碳水化合物等基本生化成分的初始浓度和最终浓度分别采用Lowry et al.[45]、Moore & Stein[46]和Roe[47]的方法估算，总脂的提取方法采用Folch et al.[48]的方法，重量法采用Barnes & Blackstock[49]的方法估算。

统计分析

采用单因素方差分析(one-way ANOVA)对对照组与实验间、实验间的数据进行统计分析，随后采用SPSS (v20)与DMRT进行事后多重比较。统计分析的所有细节都列在各自的表格中。P值小于0.05被认为有统计学意义(95%)。

结果

植物的主要化学成分p . amarus

石油醚提取物p . amarus显示了5个主要化合物的存在，如生物碱，萜类，单宁，多酚和奎宁。其中单宁含量丰富，生物碱和萜类化合物含量适中。另一种化合物，如多酚类和醌类则很少出现[表1]。在丙酮提取物中p . amarus，检出萜类化合物、类黄酮、单宁、皂苷、心苷和奎宁等6种化合物。其中单宁和心苷类含量丰富，黄酮类和皂苷含量中等。其他化合物，如萜类化合物和醌类化合物存在性较差[表1]。同样，乙醇提取物p . amarus含黄酮、单宁、多酚、皂苷、心苷、奎宁等6种主要化合物。其中黄酮类和单宁含量丰富，多酚类和醌类含量中等，皂苷类和心苷类含量较低[表1]。因此,总的来说,p . amarus含有8种主要植物化合物。在本研究中，乙醇是提取黄酮的最佳溶剂。对于单宁的提取，这三种溶剂都可以使用。乙醇可用于皂苷的提取，丙酮可用于心脏苷的提取。对于生物碱和萜类化合物的提取，可以使用石油醚。乙醇也可用于提取多酚和奎宁。

表1:主要的植物化学物质p . amarus用不同溶剂提取。

植物化学物质	溶剂
	石油醚 (非极性)	丙酮 (middle-polar)	乙醇 (极)
生物碱	++	--	--
萜类化合物	++	+	--
类黄酮	--	++	+++
丹宁酸	+++	+++	+++
多酚类物质	+	--	++
皂苷	--	++	+++
心脏gylcosides	--	+++	+
醌类	+	+	++

+、表现差;++，适度呈现;+++，华丽的呈现;———缺席

次生植物化学物质p . amarus

总的来说，不同溶剂的提取物p . amarus揭示了20种二级化合物的存在，其中7种来自石油醚，6种来自丙酮，7种来自乙醇萃取样品[表2]。给出了各提取物中化合物的详细成分、活性原理及其保留时间、分子式、分子量、峰面积、相似指数和反向相似指数占百分比[表3-5]。约30%的活性主化合物具有已知来源的生物学特性。

表2:在不同溶剂提取物中存在的次生植物化学成分p . amarus。

Sl。不。	峰 RT	溶剂	化合物名称	分子 公式	化学结构
1．	3.98	丙酮	2 -丁醇,3-methoxy -	C5H12O2
2	4.71	乙醇	Cholest-5-ene-1a 3 16 a, 26-tetrol	C27H46O4
3.	5.18	石油醚	(R) 2 - (1-Methylethylidene) -cyclohexane-drt	C9H15D
4	8.13	乙醇	Cholestane-3á，5à，6á，26-tetrol - 26-Acetate	C29H50O5
5	9.78	丙酮	2-Nitrocyclohexanone (CAS) Neophytadiene	C6H9没有3.
6	12.35	乙醇	3, 10-Dioxa-2 11-disiladodecane 2 2 11日11-tetramethyl -	C12H30.O2如果2
7.	14.25	石油醚	d-Xylose	C5H10O5
8.	18.52	石油醚	月桂酸* (月桂酸)	C12H24O2
9.	20.00	丙酮	2-丙酸(三环[3.3.1.13,7]12 -2-亚烯)-*	C13H18O2
10.	20.68	乙醇	3 - (4-Acetyl-3 -羟苯基)2-propenoicacid	C11H10O4
11.	22.86	石油醚	十四酸* (肉豆蔻酸)	C14H28O2
12.	24.40	丙酮	Neophytadiene *	C20.H38
13.	27.19	石油醚	(E) 5, 10-secocholest-1 (10) -en-3 5-dione	C27H44O2
14.	28.16	乙醇	十六烷酸乙酯* (棕榈酸)	C18H36O2
15.	29.99	丙酮	9,12,15-十八四烯酸，(Z,Z,Z)-* (亚麻酸)	C18H30.O2
16.	30.26	石油醚	2, 4-Dihydroxy-2 -(2羟乙基)cyclohex-5-en-1-one	C8H12O4
17.	32.61	乙醇	(Sax) -(-) 2、2’bis (di-2-furylphosphino) 1, 1 ' -binaphthalene	C36H24O6P2
18.	35.71	丙酮	甲基 (3 r) 3 - (tert-butyldimethylsilyloxy) 3 - [3 - (1 - (tert-but (1) yldimethylsilyloxy 3-butynyl)苯基]propanoate	C26H44O4如果2
19.	36.28	乙醇	5-Methoxy-8 8-dimethyl-6——4-phenyl-2 (2-methylbutanoyl) 8 H, h-benzo[1、2 b: 3、4 b '] dipyran-2-one	C26H26O5
20.	38.42	石油醚	3、3二硫化-diquinolinyl -Dibromo-2 2	C18H10Br2N2年代2

RT-保留时间;*具有生物活性的化合物

石油醚提取物p . amarus揭示了7种不同的二级化合物的存在。它们是(R)-2-(1-甲基亚甲基)-环己烷-drt;d-Xylose;月桂酸;十四酸;(E)- 5,10 -二酮-1(10)-en- 3,5 -二酮;2,4 -二羟基-2-(2'-羟乙基)环己基-5-en-1- 1;3,3 ' -二溴- 2,2 ' -二喹啉基二硫化。其中十二羧酸和十四羧酸两种化合物具有生物学性质[图2和2a;表3)。

图2。石油醚提取物的GC- MS色谱图(相对丰度，0-100)。

图2 a。石油醚的GC-MS色谱提取p . amarus(相对丰度0 ~ 40.52)。

表3:次生植物化学成分的GC-MS谱图p . amarus在石油醚提取物中。

RT	活动原理的名称 复合	P	曼氏金融	兆瓦	区域 （％）	如果	肢体重复性劳损症	具有生物特性的化合物 (仅限文学作品)
5.18	(R) 2 - (1-Methylethylidene) -cyclohexane-drt	32.33	C9H15D	124	18.71	851	902	--
8.11	NV	--	--	--	--	--	--	--
14.25	d-Xylose	11.87	C5H10O5	150	0.01	421	486	--
18.52	月桂酸*	69.79	C12H24O2	200	0.04	820	863	抗菌活性[50]
22.86	十四酸*	75.87	C14H28O2	228	0.07	858	888	抗氧化，抗癌，高胆固醇，杀幼虫， 驱避活性[51]
27.19	(E) 5, 10-secocholest-1 (10) -en-3 5-dione	59.40	C27H44O2	400	1．25	438	594	---
30.26	2, 4-Dihydroxy-2 -(2羟乙基)cyclohex-5-en-1-one	35.10	C8H12O4	172	6.76	648	990	--
38.42	3、3二硫化-diquinolinyl -Dibromo-2 2	53.83	C18H10Br2N2年代2	476	0.33	674	898	--

RT，保留时间;NV，未验证;P概率;MF，分子式;MW，分子量;SI，相似指数;RSI，反向相似指数;*具有生物活性的化合物。

丙酮提取物p . amarus显示了6种不同的二级化合物的存在。它们是，2-丁醇，3-甲氧基;2-Nitrocyclohexanone (CAS);2-丙酸(三环[3.3.1.13,7]12 -2-亚烯);Neophytadiene;9,12,15-十八四烯酸(Z,Z,Z)-;和甲基(3R)-3-(叔丁基二甲基硅基氧基)-3-[3-((1S)-1-(叔丁基二甲基硅基氧基)-3-丁基)苯基]丙酸酯。其中3个化合物，丙酸，2-(三环[3.3.1.13,7]12 -2-ylidene)-;Neophytadiene;9,12,15-十八四烯酸，(Z,Z,Z)-}具有生物学特性[图3 & 3a; Table 4].

图3。丙酮提取的GC- MS色谱图p . amarus(相对丰度，0-100)。

图3。丙酮提取的GC- MS色谱图p . amarus(相对丰度，0-40.52)。

表4:次生植物化学成分的GC-MS谱图p . amarus丙酮提取物。

RT	活动原理的名称 复合	P	曼氏金融	兆瓦	区域 （％）	如果	肢体重复性劳损症	具有生物学特性的化合物(仅根据文献)
3.98	2 -丁醇,3-methoxy -	4.18	C5H12O2	104	84.04	993	999	--
9.78	2-Nitrocyclohexanone (CAS)	6.82	C6H9没有3.	143	0．00	369	868	--
16.07	NV	--	--	--	--	--	--	--
20.00	2-丙酸(三环[3.3.1.13,7]12 -2-亚烯)-*	29.76	C13H18O2	206	0.02	641	678	抗氧化剂[52]
24.40	Neophytadiene *	24.32	C20.H38	278	0.01	702	809	解热、镇痛、抗炎、 抗菌素，抗氧化剂[53]
29.99	9,12,15-十八四烯酸，(Z,Z,Z)-*	9.57	C18H30.O2	278	0.71	740	783	抗菌剂[53]
35.71	甲基(3 r) 3 - (tert-butyldimethylsilyloxy) 3 - [3 - (1 - (tert-but (1) 酰基二甲基硅基氧基-3-丁基苯基丙酸酯	51.59	C26H44O4如果2	476	7.74	955	996	--

RT，保留时间;NV，未验证;P概率;MF，分子式;MW，分子量;SI，相似指数;RSI，反向相似指数;*具有生物活性的化合物。

在乙醇提取物中p . amarus，检测到7种不同的二级化合物。它们是，Cholest-5-ene-1á，3á，16á，26-tetrol;Cholestane-3á，5à，6á，26-tetrol - 26-Acetate;3 10-Dioxa-2 11-disiladodecane, 2, 2, 11日11-tetramethyl -;3-(4-乙酰-3-羟基苯基)-2-丙烯酸;十六烷酸乙酯;(Sax) -(-) 2、2’bis (di-2-furylphosphino) 1, 1 ' -binaphthalene;以及5-甲氧基-8,8-二甲基-6-(2-甲基丁基)-4-苯基- 2h, 8h -苯并[1,2 -b: 3,4 -b']二吡喃-2-酮。其中，只有一种化合物十六烷酸乙酯具有生物活性[图4和4a;表5)。

图4。乙醇提取物的GC- MS色谱图p . amarus(相对丰度，0-100)。

图4。乙醇提取物的GC- MS色谱图p . amarus(相对丰度，0-40.49)。

表5:次生植物化学成分的GC-MS谱图p . amarus在乙醇提取物中。

RT	活性主化合物的名称	P	曼氏金融	兆瓦	面积(%)	如果	肢体重复性劳损症	具有生物特性的化合物 (仅限文学作品)
4.71	Cholest-5-ene-1a 3 16 a, 26-tetrol	10.63	C27H46O4	434	2.43	338	524	--
8.13	Cholestane-3á，5à，6á，26-tetrol - 26-Acetate	88.65	C29H50O5	478	0.12	521	541	--
12.35	3, 10-Dioxa-2 11-disiladodecane 2 2 11日11-tetramethyl -	13.28	C12H30.O2如果2	262	0.06	439	554	--
15.75	NV	--	--	--	--	--	--	--
20.68	3-(4-乙酰-3-羟基苯基)-2-丙烯酸	37.27	C11H10O4	206	0.37	646	663	--
28.16	十六烷酸乙酯*	83.88	C18H36O2	284	0.46	824	857	抗氧化剂，低胆固醇，杀线虫剂， 农药，润滑剂，抗雄激素，香料，溶血， 5- α还原酶抑制剂[54]
32.61	(Sax) -(-) 2、2’bis (di-2-furylphosphino) 1, 1 ' -binaphthalene	45.31	C36H24O6P2	614	71.70	897	990	--
36.28	5-Methoxy-8 8-dimethyl-6——4-phenyl-2 (2-methylbutanoyl) 8 H, h-benzo[1、2 b: 3、4 b '] dipyran-2-one	57.04	C26H26O5	418	12.64	670	750	--

的近似组成p . amarus

的近似组成p . amarus结果表明:粗蛋白质(6.13%)、粗脂肪(6.3%)、粗纤维(24.66%)、总灰分(6.78%)和总无氮浸出物(43.38%)。它的总能量为2567千卡/千克。

营养指标和基本生化成分m . rosenbergiiPL用p . amarus提取浓缩卤虫无节幼虫

结果表明，石油醚、丙酮和乙醇提取物显著提高了虾虾的形态、长、重和SR、WG、SGR等营养指标(P<0.05)p . amarus同样，石油醚、丙酮和乙醇提取物的总蛋白质、总氨基酸、总碳水化合物和总脂肪等生化成分含量也显著高于对照组(P<0.05)卤虫无节幼虫其中，富集无叶蒿的乙醇提取物效果最好，其次为丙酮提取物和石油醚提取物。

表6所示。营养指标和生化成分浓度m . rosenbergiiPL用不同的溶剂提取物p . amarus丰富卤虫无节幼虫．

参数		卤虫无节幼虫	卤虫的提取物丰富的无尾藻p . amarus(1.0%)
			石油醚	丙酮	乙醇
营养 指数	SR (%)	82.22±5.09c	93.33±3.33ab	94.44±3.09ab	96.66±3.33一个
	长度(厘米)	1.62±0.11d	1.95±0.14c	2.17±0.12b	2.34±0.15一个
	重量(克)	0.68±0.03cd	0.86±0.04c	1.02±0.04b	1.07±0.05一个
	LG (cm)	1.55±0.03d	1.88±0.04c	2.01±0.03b	2.27±0.05一个
	工作组(g)	0.62±0.02cd	0.80±0.02c	0.96±0.01b	1.01±0.02一个
	岩石(%)	3.90±0.02cd	4.01±0.03c	4.08±0.03ab	4.10±0.04一个
生化成分 (mg/g湿wt.)	血清总蛋白	62.63±1.60d	97.96±3.21c	106.52±3.34b	112.41±2.78一个
	氨基酸总量	22.03±1.41d	41.94±3.55c	48.54±2.15b	55.61±2.15一个
	总碳水化合物	11.66±1.13d	25.56±1.13b	27.04±1.13b	31.76±1.54一个
	总脂质	7.18±0.75d	13.36±0.21c	16.14±0.78b	18.03±0.57一个

每个值为三个独立观测值的平均值±标准差。

初始长度为0.80±0.06 cm，初始重量为0.06±0.02 g

同行内具有不同字母上标的平均值P < 0.05有统计学意义(单因素方差分析及随后与DMRT的事后多重比较)。

SR，生存率;LG，长度增益;WG，增重，SGR，特定增长率

讨论

植物的主要化学成分p . amarus

与本研究相似，已报道在正己烷提取物中存在生物碱、单宁、萜类、皂苷、酚类、类黄酮和类固醇p . amarus[55]。叶和根的乙酸乙酯提取物中的生物碱，茎的水提取物和甲醇提取物中的皂苷，以及各部位石油醚提取物中的类黄酮p . amarus已报道[56]。从根、茎和叶中提取的酚类和类黄酮p . amarus也有报道使用不同的溶剂，乙酸乙酯，二甲基甲酰胺，氯仿，二氯甲烷和正己烷[57]。结果表明，二甲基甲酰胺是提取黄酮类和酚类物质的最佳溶剂p . amarus[58]。定性植物化学研究也报道了Phyllanthus的不同物种[59,60]。

据报道，吗啡、阿托品和奎宁等生物碱具有生物活性和治疗活性[61]。在本研究中，生物碱是适度存在于石油醚提取物p . amarus。

萜类化合物具有抗菌、抗真菌、抗寄生虫、抗病毒、抗过敏、抗痉挛、抗高血糖、抗炎、免疫调节和抗癌等特性，并具有抑制胆固醇合成的特性[62,63]。在本研究中，萜类化合物中度存在于石油醚提取物p . amarus．

黄酮类化合物和其他多酚可能对人体健康有益。已知它们含有广泛的化学和生物活性，包括抗氧化、自由基清除、抗衰老、抗过敏、抗炎、抗微生物、抗白血病、血管扩张、抗癌和抗菌特性，并被报道有助于改善阿尔茨海默病患者的大脑血液循环[64 - 68]。类黄酮、炭疽奎宁和萜烯刺激细胞摄取葡萄糖[69]。某些黄酮类化合物表现出降糖活性[70]和胰腺β细胞再生[69]。据报道，与根和茎相比，叶片具有最高的酚类和类黄酮活性。黄酮类化合物的抗氧化活性可有效捕获超氧阴离子(O2)、羟基(OH)、过氧基(ROO-)和醇基(RO)自由基[71]。在本研究中，海楸醇提物中含有丰富的黄酮类化合物。

丹宁酸被用作治疗烧伤的收敛剂。它们沉淀暴露组织的蛋白质，形成一层保护性覆盖物。它们被用作治疗腹泻和检查小出血的温和防腐剂[72]。它们也被用作炎症、白带、淋病和痔疮的愈合剂。单宁被发现具有抗病毒、抗菌、抗寄生虫、抗炎、抗溃疡和抗氧化特性[73]。在本研究中，所有三种溶剂提取物p . amarus含有丰富的单宁。

酚类是结构和化感作用成分，具有多种功能，如营养吸收、蛋白质合成、酶活性和光合作用[74]。酚类化合物具有生物学和药理特性，如抗微生物、抗病毒、抗炎、细胞毒、抗突变和抗癌活性[67,75]。在本研究中，在乙醇提取物中检测到适量的多酚p . amarus。

皂苷具有降胆固醇、抗癌、抗炎、抗菌、抗氧化、抗溶血和抗菌活性[76,77]。在本研究中，乙醇提取物p . amarus含有丰富的皂苷。

心脏糖苷是最天然存在的植物成分之一，基本上是类固醇药物，具有固有的能力，主要通过注射给药时对心肌起非常具体和强大的作用。心脏糖苷和儿茶酚胺是治疗充血性心力衰竭的首选药物[78]。在本研究中，在丙酮提取物中检测到丰富的心脏苷p . amarus。

喹诺宁具有抗炎、抗菌和免疫调节潜能，广泛用于治疗疟疾和最近的肿瘤[79,80]。在本研究中，在乙醇提取物中检测到中度存在醌类p . amarus。主要植物化学物质在水产养殖营养中具有保健滋补品作用[31,81,82]。

次生植物化学物质p . amarus

在本研究中，十二羧酸(C₁₂H₂₄O₂)， 2-(三环[3.3.1.13,7]12 -2-亚烯)-(C₁₃H₁₈O₂)，十四酸(C₁₄H₂₈O₂)、新植二烯(C ._20.H₃₈)，十六烷酸，乙酯(C₁₈H₃₆O₂)和9,12,15-十八四烯酸，(Z,Z,Z)-是鉴定出的次生植物化学物质/生物活性物质的活性主化合物p . amarus．十二烷酸(月桂酸:n -十二烷酸)是一种常见的含有12个碳原子链的饱和脂肪酸。月桂酸存在于椰子油和棕榈仁油中。它也存在于母乳、牛奶和羊奶中[83,84]。它被用于治疗病毒感染，包括流感(流感)、猪流感、禽流感、普通感冒、发热水泡、唇疱疹、由单纯疱疹病毒(HSV)引起的生殖器疱疹、由人类乳头瘤病毒(HPV)引起的生殖器疣和艾滋病毒/艾滋病。它还被用于防止艾滋病毒从母亲传播给儿童。此外，它还用于治疗支气管炎、淋病、酵母菌感染、衣原体感染、由一种叫做蓝氏贾第鞭毛虫的寄生虫引起的肠道感染和癣。一些研究表明，在食品制剂中，月桂酸可能是一种比反式脂肪更安全的脂肪。它是安全的孕妇和哺乳妇女的食物量(月桂酸维基百科)。

丙酸是一种天然的短链羧基脂肪酸。它的阴离子CH_3.CH₂有限公司₂以及盐和酯被称为丙酸盐/丙酸盐。丙酸能抑制霉菌和某些细菌的生长，因此用作食品防腐剂。它还被用来制造农药和药品。丙酸酯用作溶剂或人工调味料[85]。在沼气厂中，丙酸是一种常见的中间产物，由丙酸菌发酵形成。它在厌氧环境中的降解需要复杂微生物群落的活性[86]。丙酸血症是一种罕见的遗传性遗传病，丙酸在肝细胞中作为一种代谢毒素，以丙酰辅酶a(丙酸的初始代谢产物)及其衍生物甲基柠檬酸和两种三羧酸循环抑制剂的形式积聚在线粒体中[87,88]。al - lahham等人[89]在一项研究中证明丙酸可降低肝脏和血浆中的脂肪酸含量，减少食物摄入量，发挥免疫抑制作用，并可能改善组织胰岛素敏感性。因此，体内丙酸的增加可能被认为对预防肥胖和糖尿病有益。

十四酸(肉豆蔻酸:1-十四酸)也是一种常见的饱和脂肪酸。它的盐和酯通常被称为肉豆蔻酸盐。它最初是从肉豆蔻中分离出来的(肉豆蔻,桂花)作者:Playfair Lyon[90]。月桂酸和肉豆蔻酸都对HDL(好胆固醇)水平有积极影响[91-93]。它们具有高疏水性，在真核细胞的生物膜中起脂质锚定作用。

萜烯和萜类化合物是许多药用植物和花卉精油的主要成分。新植二烯是一种天然存在的二萜支链烃，属于称为植烷的化合物组。它是一种被称为倍半萜类化合物的成员，它是具有三个连续异戊二烯单位的萜烯，使新植二烯成为植物食品消费的潜在生物标志物。它的存在可以在动物的皮下脂肪中估计[94]。这些碳氢化合物主要来源于植物，是植物蜡的重要组成部分[95]。它们通常具有强烈的气味，可以通过阻止食草动物和吸引食草动物的捕食者和寄生虫来保护产生它们的植物[96,97]。萜烯具有在食品、化妆品和药品中使用的理想特性[98,99]。它们通常是天然农药的有效成分[100]。

十六酸(棕榈酸)是动物、植物和微生物中最常见的饱和脂肪酸[101]。棕榈酸盐是棕榈酸的盐和酯。棕榈酸阴离子是在生理pH值(7.4)下观察到的棕榈酸的形式。人和动物体内多余的碳水化合物转化为棕榈酸。它是脂肪酸合成过程中产生的第一个脂肪酸，是长脂肪酸的前体。棕榈酸盐负反馈于乙酰辅酶a羧化酶，该酶负责将乙酰辅酶a转化为丙二酰辅酶a，丙二酰辅酶a反过来用于添加到不断增长的酰基链上，从而防止进一步生成棕榈酸盐。据世界卫生组织称，由于血液中低密度脂蛋白水平的增加，过量食用棕榈酸会增加患心血管疾病的风险[102]。在所有脂肪酸中，棕榈酸在小鼠模型中增强CD36+转移起始细胞转移潜能的作用最强[103]。

9,12,15-十八四烯酸，(Z,Z,Z)- (C₁₈H_30.O₂)，亚麻酸;α-亚麻酸;(Z,Z,Z)-9,12,15-十八四烯酸甲酯(C₁₉H₃₂O₂）;亚亚麻酸甲酯)是一种n-3 (ω-3)多不饱和脂肪酸，具有18个碳链和三个顺式双键，主要存在于植物性食品中，如大麻籽、亚麻籽、核桃、豆腐和植物油，包括亚麻籽(亚麻油)、菜籽油(菜籽油)、大豆油和紫苏籽油(薄荷科，Lamiaceae)、南瓜籽油。它是其他长链n-3脂肪酸的前体，20:5,all-cis-5,8,11,14,17-二十碳五烯酸(EPA)和22:6,all-cis-4,7,10,13,16,19二十二碳六烯酸(DHA)[104]。它与心血管疾病(通过帮助维持正常心律、心脏泵血和减少血凝块)、神经病理疾病和2型糖尿病有关[105]。它是一种潜在的保护脑卒中的营养药物，其特点是在神经保护、脑动脉血管舒张和神经可塑性方面具有多效性[106]。它还用于降低高胆固醇、高血压、哮喘(减少炎症和改善肺功能)。ALA被用于治疗类风湿性关节炎、多发性硬化症、狼疮、糖尿病、肾脏疾病、溃疡性结肠炎和克罗恩病。它还用于预防肺炎、慢性阻塞性肺病、偏头痛、皮肤癌、抑郁症以及过敏性和炎症性疾病，如牛皮癣和湿疹。具有讽刺意味的是，ALA可能会增加一些男性患前列腺癌的风险。它的异构体是γ-亚麻酸(GLA, 18:3, n-6)。

根据Arun等人，[107]，丙酮和乙醇提取物p . amarus叶含有以下次生植物化学物质:存在于丙酮提取物的主要化合物p . amarus3,4 -二甲氧基-二苯胺;2-甲氧基- α -甲基- 4,5 -苯乙胺(甲二氧基);5、8、11、14- Eicosa tetraynoic acid。最低水平存在的化合物为苯肼，4-甲氧基- n2 -(2-溴-5-(2-预防性氧基)苄基;2(3H)-环戊(e)-1,3-恶辛-2 -1，六氢，2h - pyan -2,6(3H)-二酮，二氢-4,4-二甲基，六-5-环庚胺;和Cyclooctanamine。在乙醇提取物的情况下，报道的主要化合物为苯，1,2 -二甲氧基- 4-[[(4-甲基苯基)磺酰]甲基];苯乙胺2-methoxy-alpha-methyl-4 5 - (methylenedioxy);还有菲胺，2-甲氧基。次要化合物有，环戊烷，苯基; 3-(3-(1-Axirdinyl) propoxy)-2, 5-dimethylpyrazine; 3-(Cycloprophylamino) propioitrile; and3, 5-di-t-butyl phenol. According to Mamza et al., [108], the ethanol extract of P. amarus contains, methyl 14–methyl pentadecanoate; palmitic acid (hexadecanoic acids; 10–octadecanoate; 9–hexadecenal; glycerol 1, 3-dipalmitate; 2, 13- octadecadiene-1-ol; Dioctyl ester; and Heptanoic acid (9-dece-1-yl ester). The reported hexadecanoic acid was matched with the detected bioactive compound in the present study. Therefore, detection of phytochemical compounds are based on various factors like the quantity of their presence, soil type, soil nutrients and climatic conditions under which the plant was grown, and age of the plant.

的生存、生长和生化成分m . rosenbergiiPL用p . amarus提取物富集无叶Artemia nauplii

在本研究中，乙醇提取物p . amarus富集无叶蒿的SR、WG和SGR最佳(分别为96.6%、1.01g和4.1%，对照组分别为82%、0.6g和3.9%)m . rosenbergii这是由于十二酸(月桂酸)、十四酸(肉豆松酸)、十六酸(棕榈酸)和9,12,15-十八四烯酸(Z,Z,Z)-(亚麻酸)等生物活性原理化合物存在于p . amarus可能被阿特米娅·诺普里带走并转移到m . rosenbergii除了多不饱和脂肪酸(PUFA)，饱和脂肪酸(SFA)也是对虾更好的生存和生长所必需的。这反过来反映了总蛋白、氨基酸碳水化合物和脂肪水平(分别为112、55、31和18 mg/g湿组织，而对照组分别为62、22、11和7 mg/g湿组织)的显著升高(P<0.05)m . rosenbergiiPL用乙醇提取物喂养p . amarus与其他两种溶剂提取物相比(表6)。丙酸和新植二烯等其他生物活性化合物的抑菌、免疫调节和保护作用p . amarus可能有助于维持整体健康m . rosenbergiiPL。卤虫无节幼虫它本身是一种很好的活饲料，为鱼和虾的幼虫生长提供消化酶和多不饱和脂肪酸。草本丰富的阿尔特米草还有一个额外的优势，那就是它携带有生物活性物质。

本产品环保，具有促进水产动物生长、免疫、开胃等特点。它们在虾类和鳍类鱼类养殖中增加消耗量、诱导成熟，并具有抗菌和抗应激能力[109]。据报道，在P. monodon PL喂食答:franciscana丰裕的饮食，用Hygrophila spinosa，Withania somnifera，姜，三叶龙葵，穿心莲，补骨脂鱼肝油显著提高了鱼肝油的生存、生长和对盐度环境胁迫的抗性[110]。在鱼英雄西弗勒斯幼虫，富含菜籽油答:无节幼虫对温度和缺氧具有更好的生长和抗应激能力，并将n-3脂肪酸转化为EPA和DHA[111]。在虹鳟鱼中，Oncorhynchus mykiss卤虫urmiana富含鱼油和植物油(葵花籽油和菜籽油)可显著提高存活率，特定生长率和较低的食物转化率。此外，他们还提高了无叶蒿(Artemia nauplii)的二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)水平，以富含菜籽油的Artemia喂养的鱼对热、盐和缺氧的抗应激能力显著提高[112]。在中国对虾学名:，油麻藤甲醇提取物富集卤虫可提高幼虫存活率，而Withania somnifera显示总蛋白和脂质水平改善[113]。据报道，虾的生存、生长和抗病能力都有所增加，p . indicus喂食个别草药提取物(蓖麻，野叶下叶，白花，野叶)和海藻(乌桕和马尾藻)浓缩卤虫[114]。丰富的卤虫无节幼虫用葵花籽油、螺旋藻和鱼肝油生产的生化成分均有较好的生存、生长和浓度m . rosenbergiiPL也是[25,115,116]。目前还没有报告p . amarus在Macrobrachium。

结论

在本研究中，石油醚提取物，丙酮提取物，特别是乙醇提取物p . amarus丰富卤虫无节幼虫在生存、生长和总蛋白、氨基酸、碳水化合物和脂肪水平的浓度方面产生了显著的提高m . rosenbergiiPL与未富集相比卤虫无节幼虫这清楚地表明，主要的植物化学成分和生物活性物质存在于p . amarus应该被带去对虾吗卤虫．因此，该草本植物可持续地发挥了促进生长的作用m . rosenbergii．因此,p . amarus可作为低成本农场饲料配方的饲料添加剂。本研究可进一步扩展到不同生物活性物质的分离、纯化和表征p . amarus用于各种生物应用。

确认

印度植物调查(BSI)，哥印拜陀，印度，是公认的认证菲amarus。南印度纺织研究协会(SITRA)，哥印拜陀，印度，是公认的提供GC-MS外包服务。

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