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摘要

目前的研究强调常规、粘蛋白和脂质组织化学方法来评估和比较患病的人结石充盈和细菌感染引起的肥大胆囊的组织学危害。选择100个正常胆囊和50(25+25)个患有胆结石和胆囊炎的患病胆囊进行本研究。每个样品经适当处理后，分别用H&E染色、PAS-AB联合染色和苏丹黑B染色对3张载玻片进行常规、粘蛋白和脂质组织化学研究。在常规组织化学中，估计主要的组织学改变，发现胆石症的最大上皮不连续性为62.5%，胆囊炎的最大上皮不连续性为59.09%。粘蛋白组织化学联合PAS-AB染色显示，核上和核下上皮呈强烈的棕蓝色，提示主要的磺胺和磺胺酸作用(91.91%见于胆石症，87.5%见于胆囊炎)。脂质组织化学结果表明，胆石症的上皮细胞中磷脂的积累主要集中在核上区。(99.09%)胆囊炎的其他细胞和组织中可见散在性脂质。(76.76%)胆石形成的基本原理是脂质积聚和酸性粘蛋白的大量分泌。硫脲酶在胆结石的产生中起主要作用。前期是胆囊炎发生的阶段，表现出胆碱效应。 Blockage of mucin release can prevent gall stone formation in high risk patients or during high risk period. The compounds which can regulate sailylation and sulfation might help to inhibit gall stone formation & metastasis. This needs further study and entirely new therapeutic approach.

关键字

罗基塔斯基-阿肖夫窦，淋巴细胞增生，磺胺穆辛

介绍

胆囊炎和胆石症等胆囊疾病的胆囊切除术标本中发现胆囊癌的比例高达1.5%。胆囊标本送作常规组织病理学检查，以排除偶发胆囊癌。胆囊切除术标本的丢失在寄送组织病理学报告时证明了罕见的病变，如癌前良性病变、髓质癌和早期癌期。为避免此类重大错误，每个胆囊切除术标本都应进行常规组织学检查。胆囊炎和胆石症是一种常见病，发生于灵长类动物和人类胆囊，年龄在45 ~ 55岁之间的肥胖、多产女性是主要的患者。这些疾病对酗酒的男性和儿童同样有害[1]。在过去的25年里，由于高脂、高热量和高能量饮料和快餐的消费增加，以及俱乐部和聚会中酒精摄入量的增加，印度和其他西方和东方全球国家的胆囊炎和胆石症发病率很高[2,3]。在这些疾病中最常见的体征和症状是:腹部右上象腹的墨菲氏点(+ve墨菲氏征)刺痛和搏动型疼痛，胆汁性呕吐，轻度至中度体温升高(102-103℉)，晚期角膜和甲床变黄，严重的食欲不振和体重减轻。餐后每隔30-60分钟发生一次上腹部和右上腹疼痛，常与胆结石疾病有关。慢性胆囊炎的诊断是由胆道绞痛的存在和胆结石的证据影像学研究。 Cholecystitis (gall bladder inflammation) is not so disastrous and life threatening but in late stage it produces hazardous complications but Cholelithiasis (stone fill gall bladder) is an acute condition and it deserves urgent cholecystectomy intervention. Anatomy of normal gall bladder shows the fosse for the gallbladder in inferior surface of liver extends from the right end of the portahepatis to the inferior border of the liver [4]. It is 8 to 12 cm (3.5 to 4.5 inches) long and approximately 3.5 cm broad at its widest part and about 35 to 55 ml in capacity this morphology differs from case to case [5]. The whole body of gall bladder anatomically divides into fundus, body and neck [6]. While the neck is continues as cystic duct & is marked by a constriction. From histological point of view the human gall bladder shows 4 layers and absence of muscularis mucosa in slide view through light microscopically observation [7]. It also shows mucosal layer, loose sub mucosa, muscle layer and adventitial (serosal) layer from medulla to cortex sequence. The wall of human gallbladder represents certain abnormal histological features in diseased cholecystitis and cholelithiasis condition. Most common disease which leads to surgical manueveration is cholelithiasis and cholecystitis. On an average 850,000 cholecystectomies are performed in India every year. Approximately 25% of the adult population is affected of cholecystitis in India. Percentages of bile calculus rose with age. 35% of adults over 45 years of age and 55% of those above age of 70 have biliary calculi and are calculated by medical survey in India. In the fertility period, the female male ratio is about 5:1, with the sex discrimination zips in the aged peoples. The causative agents which evoke preaccumulating factors to biliary calculus formation includes obesity, unusual fast food intake, alcohol consumption, diabetes mellitus, estrogen and progesterone level disruption in pregnancy, hemolytic diseases like hemophilia, and cirrhosis of liver. Past history of cholelithiasis disease elaborates that approximately 35% of sufferers initially diagnosed with having, but untreated for, bile gall calculus in late stage developed complications or recurrence of signs leading to surgical removal of gall bladder. The present study also emphasizes to compare occurrences of signs and symptoms between diseased and control [8-10].

文献综述

Virchow R.(1857)对人胆囊上皮中的脂肪进行了研究，发现脂肪可在胆囊上皮中异常沉积[11]。Storey, Sheean研究了一种简易的苏丹黑B染色白细胞颗粒的方法，并将其染色病变胆囊粘膜。最后，他们观察到该区域积聚的脂质呈灰灰色[12]。墙拉夫等.等对人胆囊黏膜进行了研究，在人胆囊反复炎症患者中观察到人胆囊粘膜上皮表面的脂肪[13]。霍普伍德等对患病的胆囊炎和炎症的人胆囊进行了研究，观察到在严重的胆囊炎中，人胆囊壁中存在多种脂肪，粘膜下层的中性脂肪显著增加。这些脂肪中有一小部分含有炎症细胞和巨噬细胞[14]。史蒂文斯等.等对70例胆囊炎胆囊的上皮脂质进行了研究，组织学上发现脂肪有分散的也有分散的[15]。史密斯等在人类和其他灵长类脊椎哺乳动物中发现黏液蛋白在路径生理学和胆结石形成中的作用，研究发现，实验粘膜上皮能够分泌改变的黏液，这些分泌产物与胆汁相互作用，增强胆固醇成核过程，并从污泥发展到胆结石的产生[16]。霍普伍德等,研究和研究了人类胆囊上皮细胞中的脂肪，发现了人类胆囊炎的超结构变化，他们发现一些炎症变化以及大量脂肪沉积可见，进一步发现脂质沉积与含有囊泡的粘液结合并融合，形成由膜描绘的膜结合复杂结构，他们指出这些脂质体以及胆囊壁的其他组织也增加了脂肪存款[17]。皮尔森等等，在人胆固醇胆结石中观察到黏液糖蛋白[18]。Afdhal研究胆固醇结晶成核发现胆囊黏膜在胆石症中起调节作用，促进结石成核[19]。杰弗瑞的全科医生等于1991年对原发性硬化性胆管炎胆囊病变进行了组织学和免疫组化研究，发现粘膜下有充足的淋巴滤泡和浆细胞，并伴有中重度慢性炎症[20]。Badke等.等对胆囊结石伴炎性胆囊的组织学改变进行了研究，发现部分胆囊发生炎性改变，部分胆囊发生纤维化改变[21]。Gilloteaux等.等研究了患病和发炎的人胆囊在胆石症中的形态学方面，并观察了胆泥产生石糖蛋白的原因[22]。Csendes等等研究了95名对照和无症状胆囊结石患者的胆囊黏膜组织学表现，他们的观察结果表明，在宏观结石出现之前，胆囊黏膜可发生慢性炎症改变[23]。李等研究了棕色色素结石和组合结石胆囊中硫和粘蛋白的含量。胆囊粘蛋白本身在胆结石的形成中起着重要的作用。尽管结石的诱导机制多种多样，结石成分也存在差异，但在结石形成前，上皮硫粘蛋白和粘液的分泌量均有定量增加[24]。霍普伍德等通过光镜和电镜下的免疫组化研究，对人胆囊黏膜脂肪进行了研究，观察了70例胆囊炎及病变人胆囊上皮脂肪的分布。中性脂质在上皮细胞的基部占90%，在上皮细胞的顶端占10%，在下面的结缔组织中占10%[17]。Ganesh等对胆囊上皮结石的黏液组织化学进行了研究。他们观察到粘蛋白在胆结石形成中起重要作用[25]。史密斯等研究了人胆囊粘蛋白在胆结石成核过程中的路径生理作用。粘蛋白是人类和哺乳动物胆囊和胆管上皮分泌的一种高分子量糖蛋白，是一种原核因子[16]。Badke等．对人胆结石炎症及病变胆囊的组织学改变进行研究，发现部分胆囊炎性改变，部分胆囊纤维化改变[21]。Csendes等对95例无症状胆石症对照者的胆囊黏膜组织学表现进行了研究。他们的观察结果表明，在肉眼可见的结石出现之前，胆囊粘膜可能发生慢性炎症变化[23]。Baylis高等对70例胆囊炎胆囊上皮脂肪的研究发现，胆囊炎上皮可发生脂肪的异常堆积[26]。杰弗瑞等等对原发性硬化性胆管炎胆囊病变进行了组织学和免疫组化研究，发现胆囊炎胆囊粘膜下有充足的淋巴样卵泡和浆细胞[20]。

宗旨和目标

目的

本研究的目的是比较和估计人类胆囊壁在异常情况下的组织学变化，如胆石症和胆囊炎与对照组。

目标

通过常规组织化学、粘蛋白组织化学和脂质组织化学等具体方法，比较和估计正常人群和患病人群胆囊胆囊炎和胆石症的组织学危害百分比。

材料与方法

选择100个正常胆囊和50(25+25)个患有胆结石和胆囊炎的患病胆囊进行本研究。使用男性和女性正常和患病的人胆囊。这些菌株是同智人。雄性和雌性的体重都在65至75公斤之间，年龄范围在45至55岁之间。组织被标记并进行组织学处理。每个样品取9张载玻片，其中- 3张载玻片用苏木精&伊红染色。3张载玻片采用PAS-AB联合染色法。3张载玻片用苏丹黑B染色。在常规情况下，黏液蛋白和脂质组织化学主要组织学改变进行估计和比较。

结果

在常规组织化学中，从内到外关注所有组织学层，主要的组织学改变被估计和比较，如最大和最小的上皮不连续、上皮发育不良、蜂窝状上皮变形、上皮亚出血、杯状细胞的存在和缺失、完整的上皮、侵蚀的粘膜、最大和最小的淋巴细胞浸润、Rokytansky Aschoff窦、计算并比较各层间不规则、间隙、各层多血管变形、各层巨噬细胞和浆细胞浸润情况及各组织学危害的总体平均值即．胆结石62.5%，胆囊炎59.09%，对照组29.75%(组织处理误差)。在粘蛋白组织化学中，从内到外结合PAS-AB染色，关注所有组织层;计算并比较其余各层上皮的核上和核下部分呈强烈的棕蓝色和洋红色，提示胆石症患者有显著的磺胺穆辛作用，而胆石症患者无显著的磺胺穆辛作用，胆囊炎患者无显著的磺胺穆辛作用，对照组和总体平均值均不显著即．胆结石91.91%，胆囊炎87.5%，对照组42.75%。用苏丹黑B染色进行脂质组织化学，从内到外观察所有组织学层，结果显示磷脂的积聚和分散主要在上皮细胞的核上区和其余层，胆石症的平均计算值为99.09%，胆囊炎为76.76%，对照组为38.75%(图1)。

讨论

在目前的病例对照研究中，我们试图通过应用常规组织化学、粘蛋白组织化学和脂质组织化学，评估所有组织学危害的总体和平均百分比，以及与所有组织学层有关的其他发现，来估计和比较胆石症、胆囊炎和对照组的总体组织学改变。我们发现，这些组织学危害的强度和等级以及其他发现逐渐减少，并从胆石症到控制减少。(如下图1)。当前研究的主要目的和目的是估计和比较组织学危害的总体百分比以及与所有患病人类胆囊相关的其他发现，如胆石症、胆囊炎和对照组，对照组样本观察到的微小变化，因为组织处理错误可能是一个偶然因素。

结论

胆囊炎是胆囊壁结石形成的开始阶段，在进一步阶段胆结石或胆汁结石形成阶段之前，由于细菌结合(墓室效应)过饱和胆汁与胆固醇一水晶体结合，并伴有去核胆固醇一水晶体和粘液糖蛋白的浓度，最终与粘蛋白，钙和胆红素相互作用，这绝对是一个链式过程。从胆囊炎到胆结石的控制是一个逐渐发展到终末期胆囊癌的过程。人胆囊结石上皮分泌非天然硫粘蛋白是黑色素结石产生的主要原因。胆石形成的基本原理是脂质积累和酸性粘蛋白的过度分泌。硫脲酶在胆结石的产生中起主要作用。前期是胆囊炎发生的阶段，表现出胆碱效应。阻断粘蛋白的释放可防止高危患者或高危期胆石的形成。调节胆酰化和硫酸化的化合物是阿司匹林，可能有助于抑制胆结石的形成和转移。这需要进一步的研究和全新的治疗方法。如果结石形成过程不被阻止，最终会导致胆囊癌。

确认

作者衷心感谢Sankarsan Pani博士在经济和道义上的支持。

参考文献

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