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摘要

目的:通过免疫组织化学在腓肠神经活检中区分SVN和NSVN的免疫反应，并进一步描述副肿瘤综合征血管炎中的免疫反应。

患者和方法:我们对75例血管炎患者的周围神经进行免疫组化研究，使用一组针对tnf - α、INF-gamma、il -1 β、IL-4、CD68、CD11、CD3、CD21、ICAM-1和C5b9的抗体。SVN 60例(男33例，女27例，平均年龄63岁)，NSVN 15例(男7例，女8例，平均年龄52岁)。

结果:结果表明Th1免疫反应在两种SVN e NSVN中都很普遍。大量TNF -和il -1 -进入血管系统的存在决定了神经血管血栓形成和神经束缺氧的促凝作用。TNF-alpha也定位于轴突，这表明它可能对轴突变性本身负责。SNV e NSVN的周围神经对inf - γ抗体有免疫反应。这一发现间接证实了IL-28A，一种强大的促炎细胞因子存在于血管系统中。在SVN和NSVN的周围神经中检测到与白细胞和细胞间粘附分子-1 (ICAM-1)反应的抗体CD11。对CD68(巨噬细胞抗原)和C5b9(激活补体片段)的免疫反应也很容易检测到。

结论：结果表明，SVN和NSVN的免疫应答均为Th-1型(细胞)。tnf - α和细胞因子在血管血栓形成中的作用是至关重要的。轴突变性可能是缺氧和tnf - α对轴突直接毒性作用的结果。此外，SVN和NSVN的免疫应答模式并不特异性，包括副肿瘤综合征的血管神经病变。

关键词

系统性血管神经病变，非系统性血管神经病变，细胞因子，免疫反应，副肿瘤综合征

缩写:

SVN系统性血管炎性神经病、NSVN非系统性血管炎性神经病、PNS周围神经系统、EC内皮细胞、LC白细胞

介绍

PNS血管炎发生多种病理条件，如自身免疫障碍、副肿瘤综合征和副感染性疾病。这种情况分为系统性血管炎(系统性血管神经病变，SVN)和非系统性血管神经病变(非系统性血管神经病变，NSVN)，在孤立的PNS定位[1]。两者的组织学特征表现为血管系统血栓形成和周围神经轴突缺失。一般情况下，内皮组织参与免疫反应而无损伤。PNS内皮细胞的一些特性，例子穷人数量的紧密连接和频繁的胞饮fenomena连同免疫特征等的表达主要组织相容性复合体II和pn的升高淋巴细胞粘附能力存在ICAM-1(细胞间粘附分子1)或许可以解释这一现象[2,3]。此外，内皮细胞在维持促凝和抗凝失衡中发挥积极作用，而白细胞介素和tnf - α已知具有明显的促凝作用[4]。内皮细胞本身产生细胞因子，诱导粘附分子表达改变，从而促进白细胞粘附和糖尿病。然而，血管炎中内皮细胞损伤的免疫机制尚不清楚，因为一般情况下内皮细胞在免疫过程中发挥积极作用而不受损害。我们检查了75例血管炎患者的临床和组织学报告，以区分SVN和NSVN两种形式的神经病变。 We also performed an immunohistochemical study on sural nerve of the same patients using antibodies directed to TNF-alpha, to interferon gamma (INF-gamma), to IL-1beta, to IL-4 (TH2 immune response), to activated complement fraction C5b9, to cluster of differentiation 3 (CD3, all lymphocytes), to CD4 (T-Helper lymphocytes), to CD8 (cytotoxic lymphocytes), to CD21 (B-lymphocytes), to CD11 (leucocytes and ICAM-1), to CD68 (macrophages), and finally to Major Histocompatibility Complex II (MHC II).

60名患者（33名男性和27名女性，年龄范围24-89岁，平均年龄63岁）被归类为系统性血管炎性神经病。7名患者受类风湿性关节炎影响，4名患者受原发性冷球蛋白血症II型影响，5名患者受意义未定的单克隆丙种球蛋白病（MGUS）影响，结节性多动脉炎7例，Churg-Strauss 4例，Sjögren病3例，HIV和其他副感染性疾病5例，副肿瘤综合征3例，未分类系统性血管炎22例。

患者和方法

SVN和NSVN患者的腓肠神经碎片2.5%戊二醛固定，1%四氧化锇后固定，Araldite包埋，苏木精-弗乐新-藏红花(HPS)和对苯二胺(PPD)染色。免疫组化处理5例SVN和NSVN患者的腓肠神经冷冻切片(5mm厚)，使用一组抗干扰素-g (IFN-g, Genzyme, Cambridge, USA)、IL-1b和Il-4 (Genzyme, Cambridge, USA)、肿瘤坏死因子-a (TNF-a, Genzyme, Cambridge, USA)、攻击膜复合物C5b-9 (Dako, Paris, Cambridge)的抗体。法国)、巨噬细胞分化抗原CD68、CD3和CD11 (Dako, Paris, France)和细胞间粘附分子ICAM-1 (Immunotech, Marseille, France)。采用亲和素-生物素-过氧化物酶复合物技术进行染色。5条腓肠神经取自非炎症性神经病患者作为对照。

结果

临床和神经生理学结果

SVN的主要临床表现为多发性单神经炎(26例)和混合运动感觉对称性多神经病变(25例)。相比之下，NSVN没有明显的优势临床模式(表1和2)。SVN和NSVN的肌电图结果见表3。SVN免疫组化结果如表4所示。SVN和NSVN中的免疫定位见表5。主要发现与包括副肿瘤综合征在内的所有类型SVN相似，其特征是对IL-4和CD21抗体缺乏免疫反应性，这是针对Th-2免疫应答(抗体介导免疫)的特异性抗体。只有结节性多动脉炎患者对IL-4表现出较弱的免疫反应性(数据未显示)。在NSVN中观察到相同的Th-1免疫模式。CD68(巨噬细胞)和激活补一部分C5b9 immunolocalized在轴突和髓鞘而tnf主要是局部髓鞘轴突虽然少量个体上(图1和2)。所有抗体的面板中,除了il - 4和CD 21 endoneurial空间中分离的血管。特别是，在神经周围和神经内膜的血管上发现了对INF-gamma和CD11/ICAM1的重要免疫反应性(图3和4)。轴突上也存在对CD8(细胞毒性淋巴细胞)抗体的免疫反应性。细胞毒性淋巴细胞的免疫反应性比CD4 (T-Helper淋巴细胞)更显著，MHC II在所有患者的血管和轴突均被强烈分离出来(图5)。在我们系列使用的完整组中，对照组均为阴性。

表1。SVN和NSVN神经病变的临床表现

SVN
单纯感觉神经病	1例
Mononeuritis	1例
Mononeuritis多路复用	26例
混合敏感和运动不对称多发性神经病	6例
混合敏感和电动机对称性多变病疗法	25例
纯电机多神经病
NSVN
单纯感觉神经病	1例
Mononeuritis	1例
Mononeuritis多路复用	2例
混合敏感和运动不对称多发性神经病	3例
混合敏感和电动机对称性多变病疗法	4例
纯电机多神经病	0例

表2。SVN和NSVN的肌电图表现

SVN
MNAP和SNAP、MCV和SCV振幅降低的轴突损伤研究正常或轻微降低	58例
轴突和髓鞘混合(继发性脱髓鞘)	2例
NSVN
MNAP和SNAP、MCV和SCV振幅降低的轴突损伤研究正常或轻微降低	12例
纯髓鞘(传导阻滞)	1例
轴突和髓鞘混合(继发性脱髓鞘)	2例

表3。SVN和NSVN的免疫反应性

PZ	Sj奥格伦	NC1	类风湿性关节炎	Paraneo	MGUS	N.C2	锅	NC3
Infiamm	+	+/-	++	++	+	+	++	+/-
CD3. T-L	+	+/-	++	++	+	+	++	+/-
CD4. T - H	+	+/-	++	+	+	+	++	+/-
CD8. 温度系数	+/-	+/-	+	+	+/-	+	+	+/-
CD21 是	-	-	-	-	-	-	+	+
CD 11.	+	+	+	+	+	+	+	+
CD68	++	+	++	++	+	+	++	+
C5b-9	++	+	++	++	+	+	++	+
il - 4	-	-	-	-	-	-	+/-	-
正,γ	-	+/-	++	+	+	+	+	-
肿瘤坏死因子-α	+	+	+	+	+	+	+	+
MHC II	+	+	+	+	+	+	+	+/-

表4。腓肠神经内抗体的免疫定位

免疫定位	Perineurial空间	血管	轴突	髓鞘
CD3 T-L	+/-	++	-	-
CD4的张茵	+	++	-	-
CD8温度系数	+/-	+/-	+/-	-
CD21是表征	-	-	-	-
CD11L+ICAM-1	+	+	-	-
CD68	++	++	++	++
C5b-9	++	++	++	++
il - 4	-	-	-	-
正,γ	+	++	-	-
肿瘤坏死因子-α	+	+	+	+/-
MHC II	+	+	+	+

表5所示。主要粘附分子及其配体

粘附分子	细胞	配体
Selectins
Selectin E	电子商务	sialoGP
Selectin P	电子商务(CD62)	Selectin L
Selectin L	信用证	Selectin P
搞笑总科	LC, EC (CD54)
ICAM-1	LC,电子商务	LFA-1，MAC-1
ICAM-2	信用证	LFA-1
ICAM-3	电子商务	LFA-3
VCAM-1	EC，LC，血小板（CD44）	vla-4.
HCAM	立法会（CD29）	MIP-1b
整合蛋白
b - 1 VLA-4		VCAM-1
B-2 LFA-1	LC（CD11a、CD18）	ICAM-1
B-2 MAC-1	LC（CD11B，CD18	ICAM-1

图1所示。免疫组化与抗体cd68(巨噬细胞)。SVN神经束及腓肠神经小血管周围有较强的免疫反应性，原始放大倍数为X100。

图2。带有抗TNF-α抗体的免疫组织化学。轴突、髓鞘和小神经内血管的免疫反应性，原始放大倍数X400。

图3。免疫组化与抗inf - γ抗体。血栓形成血管中的免疫反应性，原始放大X400。

图4。抗ICAM-1/CD11抗体免疫组织化学。SVN腓肠神经血管中的强免疫反应性，原始放大倍数X400。

图5。免疫组化与抗mhc II抗体。SVN神经束的弥漫性免疫反应，原始放大倍数为X400。

讨论

迄今未发表迄今为止，我们的知识，对细胞因子和血管炎血管炎的免疫机制的免疫组织化学发现尚未公布。相比之下，在科学文献中提供全身血管神经病的免疫组织化学数据，尽管我们的系列包括更多患者在SVN和NSVN的比较免疫研究中的患者[4-10]。SVN和NSVN之间没有差异模式。此发现也从未报道过。我们通过双免疫组织化学技术证明，TNF-α负责髓鞘综合征的髓鞘击穿和轴突损伤[11]。巨噬细胞以及CD 4阳性细胞刺激TNF-α的主要释放。这种细胞因子的二次释放，比初级释放更大的毒性，由INF-Gamma和IL-2诱导。根据先前公布的数据，这些物质是TNF-α和INF-GAMMA的这些物质在我们的系列中容易检测到我们的系列中，并在理解免疫机制的理解中的最新进展情况下。还众所周知，IL-28a刺激IL-28a，一种强大的促炎细胞因子，其负责扩增炎症过程[12]。ICAM-1在脉管系统中大量揭示，以及CD11。 This data is not surprising since CD11 is directed to integrins that act as a ligand to ICAM-1. The crucial role of ICAM in the acute phase of immune response is already known [13]. Nevertheless, in our series ICAM-1 was detected in most of the patients for months after the clinical onset of vaculitis. This finding clearly demonstrates that adhesion molecules have a long duration of expression in inflammatory processes. The same phenomenon was observed in Guillain-Barré syndrome [11].

TNF-α的毒性作用本身导致SVN和NSVN的轴突变性，尽管缺血和血栓形成在血管炎中是一个显著的发现。此外，TNF-α的促凝血作用是血管炎血栓形成的主要原因。根据其他免疫过程的最新进展，我们发现在我们的研究中，患者腓肠神经中的细胞毒性T淋巴细胞（CD8）与辅助性T淋巴细胞（CD4）的相关性。该数据表明细胞毒性对轴突和血管的影响更为相关。

临床上，SVN预后不良，死亡率显著为[1]。在我们的系列研究中，三分之一的SVN患者未分类，尽管伴随的肌肉活检改善了诊断的准确性。SVN的治疗是基于高剂量的皮质类固醇和免疫抑制剂药物，主要是环磷酰胺。在SVN伴癌的情况下，糖皮质激素和免疫抑制药物可促进肿瘤[14]的进展，使病情预后恶化。

在治疗副肿瘤综合征血管炎方面，SVN单克隆抗体治疗[15]可能会带来新的进展。我们的研究进一步强调了Th-1免疫应答在副肿瘤性神经病变中的重要性，根据以往科学文献的数据[16,17]

确认年代

我们感谢J.F Pellissier和D. Figarella-Branger(马赛，法国)。我们也感谢N.比安科(马赛，法国)给予的宝贵技术支持。

参考

1. Dyck PJ，Benstead TJ，Conn DL，Stevens JC，Windebank AJ等（1987）非系统性血管炎性神经病。大脑110: 843-853.(Crossref)
2. Mitchell GW, Williams GS, Bosch EP, Hart MN(1991)外周血管神经病变II类抗原表达。神经科学杂志102: 170-176.(Crossref)
3. Larsson P, Ulfhammer E, Karlsson L, Bokarewa M, Wåhlander K, et al. (2008) IL-1ß和IL-6对血管内皮细胞组织型纤溶酶原激活物表达的影响。血栓Res 123: 342-351。［Crossref］
4. Fenzi F, Rossi F, Rava M, Cavallaro T, Ferrari S, et al.(2006)艾滋病和远端感觉神经病变患者周围神经内皮粘附分子表达未发生改变。J Neuroimmunol178: 111 - 116。［Crossref］
5. Üçeyler(2015)非全身性血管神经病变:60例患者单中心随访。J神经262: 2092-2100.(Crossref)
6. Engelhardt A, Lörler H, Neundörfer B(1993)血管神经病的免疫组化结果。《神经Scand87: 318-321.(Crossref)
7. Kurz M, Pischel H, Hartung HP, Kieseier BC(2005)肿瘤坏死因子转化酶在炎症周围神经系统中表达。周边神经系统10: 311-318. [Crossref］
8. Lindenlaub T，Sommer C（2003）炎症性和非炎症性神经病变腓肠神经活检中的细胞因子。Acta Neuropathol105: 593 - 602。(Crossref)
9. Emplm，Renaud S，Erne B，Fuhr P，Straube A等（2001）疼痛性和非疼痛性神经病变中TNF-α的表达。神经学56: 1371 - 1377。(Crossref)
10. Deprez M，Lübke U，Verlaet M，Debrus S，Delvenne P，et al.（2001）人类腓肠神经活检中细胞因子的检测：一项免疫组织化学和分子研究。Acta Neuropathol101：393-404。(Crossref)
11. Putzu GA, Figarella-Branger D, B2021版权所有所有权利保留等(2000)细胞因子C5b9和ICAM-1在Guillain-Barré周围神经的免疫组化定位。神经科学杂志174: 16。［Crossref］
12. (1)白介素- 28a促进白塞病患者外周血单个核细胞产生IFN-γ。细胞免疫290: 116 - 119。(Crossref)
13. Schäfers M, Schmidt C, Vogel C, Toyka KV, Sommer C(2002)肿瘤坏死因子α (TNF)通过TNF受体1调控小鼠坐骨神经慢性收缩损伤后ICAM-1的表达神经病理学学报104: 197-205. [Crossref］
14. Naddaf E，Dyck PJ（2015）血管炎性神经病。当前治疗选择神经17: 374.(Crossref)
15. Bramson C, Herrmann DN, Carey W, Keller D, Brown MT，等(2015)探索tanezumab作为一种缓解疼痛的新疗法的作用。止痛药16: 1163-1176. [Crossref].
16. Tani T，Tanaka K，Idezuka J，Nishizawa M（2008）副肿瘤神经综合征中的调节性T细胞。J Neuroimmunol196: 166 - 169。(Crossref)
17. Antoine JC（2000）副肿瘤性周围神经病变的免疫学机制。临床过敏免疫反应19: 61-72.(Crossref)