DOI: 10.15761 / JTS.1000157
外泌体是微小的微泡，在局部和远处的身体部位参与细胞与细胞的交流。有证据表明，外泌体可以调节正常的细胞功能，并能够引起疾病的改变。例如，来自阿尔茨海默大脑的外泌体已被证明携带tau蛋白缠结，而帕金森患者的外泌体含有α-突触核蛋白。这些假定的“病理信号”来自于腔内囊泡，作为核内体产物形成，要么在溶酶体-核内体界面降解，要么挤压到细胞外空间被受体细胞捕获。外泌体货物，由选择性细胞质实体包装，可以是蛋白质，rna或其他生物分子，如脂质。来自疾病细胞系的外泌体已经揭示了可翻译mRNA和非编码rna (lncRNA和microrna)，它们可能具有基因/细胞调节作用。外泌体对建立肿瘤转移的微生态位很重要，并且作为神经退行性疾病的参与者正在被研究。许多外泌体蛋白和rna可能是疾病的生物标志物。最后，由于外泌体是各种货物的天然细胞穿梭体，可以通过血脑屏障，研究人员正在评估合成货物是否可以装载到外泌体中，并用于缓解疾病的治疗方法。
近年来，人们对细胞外泡(EVs)的兴趣急剧增长，导致了对外泌体内容和功能的探索。然而，分析电动汽车的作用及其功能范围仍然是一项复杂的任务。细胞在质膜表面释放各种细胞外囊泡(胞外小体(100-1000 nm)、凋亡小体(50-5000 nm)和外泌体(30-140 nm)。外泌体是细胞外囊泡类型中最小的，由非凋亡细胞[1]释放。Pan和Johnstone[2]首次在网织细胞中观察到外泌体，并假设它们是细胞挤压额外细胞膜和/或作为细胞排出废物的载体的一种方式。尽管对外泌体在所有生物体中所起作用的研究呈爆炸性增长，但我们仍在了解它们的生物起源、进入细胞外空间的运输以及它们在健康和疾病中的生理作用。本文综述了目前外泌体的研究热点。
外泌体是细胞外囊泡中最小的一种。它们是由核内体膜内陷进入核内体空间捕获细胞质内容物而形成腔内囊泡(ILVs)。装载ILVs的核内体成为多泡体(MVB)(图1)。外泌体[3]是大小约30-140纳米的膜结合囊泡，囊泡内包含各种载物。外泌体被挤出细胞外空间，通过(1)受体细胞的质膜表面的内吞作用，(2)受体细胞受体介导的内吞作用和/或(3)与受体细胞的质膜[4]直接融合，或(5)它们可以从细胞外空间进入生物体的循环系统。含有MVB的ILV的另一种命运是与溶酶体融合，其中MVB内容物被降解。外泌体的组装至少有三种方式(1)通过特定泛素化蛋白的蛋白质分选和转运所需的内质体分选复合物(ESCRT)机制[5]，(2)通过与外泌体脂双分子层膜[6]中所含的脂质泡的结合，(3)通过捕获生物分子[7]的神经酰胺依赖途径。需要特定的蛋白质来装载外泌体(ESCRT复合体)，需要ATP裂解(Rab GTPases)的能量来在质膜上释放，需要包埋在外泌体脂膜中的蛋白质来识别和捕获受体细胞表面(转spanins, flotilins和其他)。ESCRT复合体和相关蛋白被用于分类和聚类泛素化蛋白，如受体[8]。四菊素与CD9和CD63一起聚集在核内体膜的微域区域，启动外泌体的形成。微畴中的蛋白质发生分离，ESCRT复合体蛋白的额外募集开始内陷内小体膜捕获ilv中的细胞质货物(Kalra[8]评论)。 Also, It is shown that there is an ESCRT complex independent pathway for formation of ILVs; this glycoprotein pathway involves the formation of lipid rafts [9] where ceramide may be a key component. Oligodendrocytes seem to form exosomes via sphingomyleinase cleavage of sphingomyelin to ceramide [7]. Ceramide induces invagination and then formation of ILVs. Subsequent steps in biogenesis involve moving the MVB to the plasma membrane surface, fusion with the plasma membrane and release of the exosomes. YKY6 SNARE protein and Rab GTPases direct exosomes to the plasma membrane surface [4,10]. Interestingly, the exosome membrane composition is not the same as that of the cell membrane [8]. There are two fates for ILVs contained in a MVB (1) they can fuse with a lysosome directing their cargo for degradation or (2) they can be released at the cell’s plasma membrane into the extracellular space [8]. It is these ILVs that are termed exosomes. The cellular process that designates ILV containing MVBs to either the degradation or extracellular pathways remains elusive.
图1所示。外泌体的产生和运输：外泌体在早期外泌体中形成，作为腔内囊泡(ILV)，由选择性筛选的细胞质内容物形成。然后这些变成多泡体(MVB)。MVB有两种命运;它们可以与溶酶体融合，在那里它们的内容物被降解，或者它们可以与细胞质膜融合，并释放它们的ilv(现在是外泌体)到细胞外空间。附近的受体细胞可以局部捕获外溢物，从而调节其功能。来自细胞外空间的外泌体也可以进入循环，并在远处的细胞位点被捕获，在那里，它们可能调节细胞功能。来自任何细胞来源(肝脏、大脑)的外泌体被任何其他细胞(心脏、胰腺)捕获，从而提供了一个独特的细胞-细胞通信途径
外泌体是核内体中衍生的脂双分子层膜结合的胞质货物包。据报道，外泌体中包含的分子物质包括蛋白质、rna、脂质、代谢物和DNA(尽管仍有争议)。这些被捕获的胞质分子装载到外泌体中并释放到细胞外空间[11]。然而，对外泌体货物和其来源的细胞质含量的比较往往不同，这表明一种选择性分选机制被用于装载注定成为外泌体的ILV。由于其形成方法，外泌体包含来自细胞质成分的常见蛋白质。由于它们的内体起源，外泌体的组成包括细胞生物标志物(ExoCarta)。通常与外泌体一起被报道和鉴定的生物标记蛋白有:GTPases, flotillin-1, annexin，热休克蛋白(CD9, CD63, CD81)和其他与多泡体生物发生相关的蛋白质(如Alix和TSG101)以及许多其他蛋白[3,12](图2)。外泌体还被发现富集于脂质中，包括神经酰胺，胆固醇和鞘脂，并具有聚糖和多糖的表面特征[8,13]。外泌体被释放到细胞外空间，可以在血液和脑脊液中循环，在受体细胞的界面被接受，并被内化，可以影响受体细胞的功能[14]或随尿液排出。DNA货物:外泌体样囊泡的DNA从小鼠脑肿瘤细胞中自发释放，含有染色质包被的H-Ras DNA[15]。作者发现H-Ras DNA能够诱导非转化细胞增殖。虽然其他研究小组已经确定了外泌体囊泡中的DNA转录为功能性rna的问题存在争议。这是随着外泌体研究进展需要解决的另一个谜。
图2。Western blot检测神经2型戈谢系和细胞裂解物分离的外泌体。用ExoQuick (SBI)从条件培养基中分离外泌体。Lane 1:来自患者1260早期神经元的外泌体，Lane 2:来自VCOM 107控制神经元的外泌体，Lane 3:来自患者1260晚期神经元的外泌体，Lane 4: BJ控制神经元细胞溶液，Lane 5:来自BJ控制神经元的外泌体。Western用10% SDS-PAGE凝胶(25ug蛋白/lane)运行，印迹到PVDF，用外泌体中发现的flotillin-1的指示一级抗体和管家酶GPADH检测。尽管GAPDH已经在一些外泌体中被报道过(见Exocarta.org)，但在从这些戈谢尔神经元中分离出来的外泌体中没有发现，这些戈谢尔神经元是从患者成纤维细胞的iPSC系中分化出来的。" M "是荧光标记车道
来自许多细胞类型的外泌体携带RNA(信使RNA (mRNA)， microRNA (miRNA)和长链非编码RNA (lncRNA)，这些RNA似乎可以改变受体细胞[16]的细胞活性。Valadiet al。[17]报告了外泌体中RNA物种的存在，也显示了这种RNA的功能，因为它可以翻译成蛋白质。从细胞质内核体界面捕获的rna似乎有两种命运(1)mRNA翻译成蛋白质或(2)miRNA翻译抑制[16,18,19]。因此，外泌体RNA (extrsome RNA, exoRNA)可以成为协调有机体内细胞功能的强大工具。由于exoRNA的结构与供体细胞的细胞质不同，因此似乎有选择性地包装了这些物质，但其过程仍不清楚。微阵列屏幕显示部分exoRNA内容是miRNA。Eckstomet al。[16]报道，与细胞质RNA含量相比，一些miRNAs富集，一些减少，这再次证明了外泌体通路的选择性包装。
前往不同细胞隔室的蛋白质通常包含一个5 '信号序列，以引导它们进入适当的细胞隔室(例如，核定位信号(NLS))，但尚不确定外泌体中发现的蛋白质是如何被选择用于囊泡封装的。值得注意的是，蛋白的泛素化[20]可能将它们导向ILVs, ESCRT复合体蛋白确实识别泛素化蛋白。富含Tetraspanin (CD9, CD63, CD81和CD82)的脂筏结构域也可以向ilv[20]招募蛋白质。外泌体蛋白质是源细胞中蛋白质组合的代表，因此许多蛋白质可能被用作病理的细胞生物标志物。据报道，来自内质网、线粒体和细胞核的胞内蛋白在外泌体中表达不足[4,21,22]。外泌体富含ALIX、TSG101和多种热休克蛋白(CD9、CD63和CD81)。翁等．[23]报道，从HeLa细胞组织培养上清中获得的外泌体蛋白分析包含5120个基因中的6299个蛋白组，其中97%在ExoCarta中报道。其中一些蛋白质被鉴定为蛋白质降解中间体。
有两个有用的数据库(ExoCarta:http://www.exocarta.org而且Vesiclepedi: microvesicles.org[24])，包含了从不同细胞类型分离出来的外泌体货物的跨生物体和细胞的信息，与迄今为止在细胞中发现的外泌体和微泡的其他信息有关。exoRNA门户网站(exrna.org)提供了细胞外RNA数据的总结信息，并提供了其他信息的链接。
来自核内体通路[25]的外泌体囊泡(30-140纳米)是由蛋白质和各种类型的rna组成的膜结合包，似乎对每种细胞类型或细胞系[3]都是独特的。外泌体的含量反映了分泌它们的细胞的生理状态，例如，来自阿尔茨海默氏症大脑的外泌体通常包含tau蛋白[26]的聚集物。它们可从包括尿液和血液在内的许多生物液体以及组织培养基中分离出来。据估计，血液通常具有5-50 μg/ml的外泌体负荷。循环捕获了来自不同细胞类型的所有外泌体，因此选择亚群，例如来自血液的肾脏外泌体就成了问题。最初，外泌体通过选择性离心步骤分离细胞碎片，然后进行最后的超离心步骤(有或没有蔗糖梯度)捕获外泌体(110,000 x g, 90分钟)[25,27]。超离心分离出小于100 nm的囊泡，这种大小分布也可能包含小凋亡小体[3]。用超离心分离外泌体的一个缺点是离心时间过长对囊泡施加的剪切力可能会限制外泌体的恢复。因此，使用该方法捕获的外泌体货物较少[1]。然而，该领域的许多人仍然认为超离心是获得外泌体的“金标准”。 Isolating exosomes from cell culture medium requires that any FBS in the medium be exosome-free (commercially available) as this medium supplement contains bovine exosomes that may interfere with downstream analyses [21] and reviewed in [3]. Other methods of isolating and collecting exosomes are immune-affinity capture using an antibody to protein(s) on the surface of the exosome linked to beads [29]. The exosomes are bound by isolation medium and they may not be able to be released and utilized in downstream applications. Size exclusion chromatography coupled with centrifugation steps to remove cellular debris can also isolate selectively sized exosomes [28,30]. Finally, a method based on addition of a polyethylene glycol (PEG) substrate uses low speed centrifugation to precipitate exosomes after an overnight incubation at 4ºC [31,32]. This method is reported to yield high quality exosomes and is available as a commercial reagent (ExoQuick). However, it is not clear if PEG remaining in the exosome preparation after centrifugation interferes with downstream applications. Post-isolation methods, such as capturing PEG on a G-25 column could address this issue [28]. At present most groups investigating exosome activity select one isolation method and work within the confines of that procedure. Thus, comparison of results between methods should be carefully evaluated. Whatever isolation method is employed, it requires validation to confirm that non-exosomal material is not contaminating the preparation leading to errors in analyses. Second, the exosome isolation method should maintain the integrity of the vesicle and its content. This is frequently analyzed by EM or by using Nanosight instrumentation.
包括外泌体在内的细胞外囊泡起运输载体的作用。囊泡是细胞用来交流短距离和远距离信号信息[8]的另一种方法。携带效应信号的外泌体货物既代表了外泌体细胞起源，也代表了起源细胞(健康或患病)[33]的生理状态。在筛选了HMC-1细胞系的外泌体RNA内容后，Eckstrom等．[16]报告了rna定位路径的身份。得分最高的网络是细胞和血液发育、蛋白质合成、修饰和折叠、RNA转录后修饰和细胞组装。列举的前五种先前建立的途径是:(1)氧化磷酸化，(2)线粒体功能障碍，(3)EIF2信号转导，(4)Rho调控肌动蛋白基迁移，(5)蛋白质泛素化途径。这表明这些研究中的外泌体具有多样性的功能[16]。
外泌体在任何受体细胞表面获得;例如，神经细胞可以获得肝细胞外泌体。这种从周围细胞渗出液或血液循环中捕获外泌体的普遍能力增加了体内通信途径[34]的复杂性。外泌体的其他作用包括发育中的形态发生信号传导[20]和免疫介质[20]。最后，外泌体mirna和lncrna可能发挥尚未确定的调控作用。
外泌体被CNS中检测到的所有类型的细胞释放到细胞内空间或进入脑脊液(CSF)或血液循环[4,35]。外泌体可能对受体细胞有积极和消极作用。如前所述，外泌体可以清除细胞废物，在局部和远处的位置之间传递信号信息，并可能是转移病原体的载体，如感染性病毒颗粒[36]或朊病毒[37]。因此，外泌体是疾病的细胞传播者，它们可以从CSF和培养的神经细胞的培养基中捕获。它们已被用于多种神经退行性疾病，包括阿尔茨海默病[38,39]、克雅氏综合征[40,41]、帕金森病[42,43]和肌萎缩性侧索硬化症(ALS)[44]。来自一种神经细胞类型的胞外囊泡可能与其他神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞和少突胶质细胞相互作用，运输健康和患病的蛋白质、脂质或RNA物种[4]。在阿尔茨海默病中，淀粉样斑块的积累，不溶性蛋白复合物，已被分离为外泌体[45]的内容。淀粉样蛋白复合物通过外泌体转移到其他神经细胞可能会“播下”受体细胞中的蛋白质错误聚集，从而传播疾病[46]。这种聚集蛋白的外泌体转移模式也被报道用于帕金森病(α-synculein在外泌体中被发现)和ALS(突变SOD1位于胶质衍生的外泌体[4]中)。尚待研究的是，外泌体是否只是疾病传播的运输载体，还是它们的组成也会导致疾病。 Recent investigative reports do suggest a role for mutant proteins encased by exosomes playing a role in transmitting neurological disease. For example, a paper investigating the progressive nature of ALS, found mutations in the FUS (Fused in Sarcoma) gene in both sporadic and familial ALS [47]. Protein pull-down analyses identified the proteins associated with the normal and mutant FUS gene product. The authors showed these proteins are active in many cellular pathways including nuclear organization, transcription, RNA transport and stress response, thus, demonstrating a broad role for FUS in cellular activity. FUS protein and many of it’s interacting proteins were found localized to exosomes suggesting that release of these exosomes to adjacent recipient cells is one route of disease spread in these ALS patients.
额颞叶退行性变(FTLD)主要影响65岁以下的患者，额颞叶和前颞叶功能丧失[48]。超过50%的患者有家族史，遗传因素被认为是FTLD的主要原因。在这些患者中，颗粒蛋白突变(GRN)与FTLD相关，导致单倍不足或程蛋白缺失。Benussi和同事[48]从16名具有GRN突变和适当细胞对照的FTLD患者中培养成纤维细胞。他们发现，从n -糖基化形式的培养基中提取的外泌体与程序蛋白相关，而从FTLD成纤维细胞培养的外泌体中GRN的数量减少。他们还表明，来自GRN缺乏的FTLD患者的外泌体数量减少，并包含LAMP1，一种溶酶体蛋白。这些结果与细胞凋亡或细胞活力受损不一致。前程蛋白作为一种可溶的神经营养因子分泌，促进神经突生长和神经元活力，但也在外泌体中发现。因此，FTLD中减程蛋白的缺失可能通过减少外泌体细胞外交流来影响神经退行性变的发展。
一些神经元的外泌体释放与谷氨酸受体的激活相耦合+ 2通过n -甲基- d -天冬氨酸受体[49]进入神经元。培养的N2a细胞释放的外泌体被神经元和胶质细胞捕获。相反，GFP-TTC(绿色荧光蛋白与无毒的破伤风毒素c片段偶联)标记的外泌体被突触激活释放，只选择性地转移到突触[35]上的其他神经元。这项工作证明了神经元释放外泌体的一个特定信号，这些外泌体是由其他神经细胞选择性积累的。这种现象明显是通过受体在受体细胞界面的识别或受体细胞通过质膜[39]的内吞作用发生的。外泌体可能通过介导氧化应激[49]和改变受体神经元[50]的基因表达模式正向影响神经细胞功能。
外泌体穿梭rna (esRNA)存在于外泌体中，包含小rna和miRNA，可进入细胞外空间，影响受体细胞[46]的细胞功能。许多观察[45]支持这样的结论:来自病变细胞的外泌体转移编码RNA和非编码miRNA，可能改变细胞功能，产生神经毒性。神经元与支持细胞(星形胶质细胞和神经胶质细胞)进行通信，以响应周围刺激。不难想象，外泌体的细胞外运输是一种信号传递方法，无论是健康的还是疾病的结果。无论在外泌体中发现的rna或蛋白质的来源是什么，以及从尿液、脑脊液和血液中捕获相对容易与否，人们对使用外泌体制剂作为疾病[4]的潜在生物标志物越来越感兴趣。
外泌体可能作为神经系统癌症的介质。胶质母细胞瘤的特征是释放多种细胞外囊泡(外泌体和较大的癌囊体)，其组成与细胞质内容不同[51-53]。据报道，这些“肿瘤囊泡”可以增加多种促进肿瘤生长和发育的致癌过程，如免疫抑制、肿瘤微生态位的建立和血管生成[52,54]。李et al。[55]表明胶质母细胞瘤细胞外囊泡同时携带非编码rna和rna到受体细胞，从而改变转录谱。需要对神经肿瘤细胞的外泌体进行广泛的分析，以确定通过这种胞外通信途径传递的是什么，以及它是如何异常地改变接收细胞的功能的。来自身体各个部位肿瘤细胞的外泌体的作用见文献[3,56-58]。
外泌体被认为是很有前途的生物标志物载体，其中蛋白质成分分析可能特别有用[59]，外泌体可以很容易地从患者的血液中捕获。外泌体可以从血液、尿液、脑脊液和其他身体分泌物中获得，这使得收集方法风险低、侵入性低。它们可能在获取不同肿瘤类型的信息、肿瘤进展的预后分期以及潜在的确定患者特定的药物方案[60]方面特别有用。外泌体作为生物标志物在癌症及其转移中的作用见文献[61]。Gillet报道了另一个使用新生儿血液外泌体评估神经毒性的应用et al。[62]。Kumar和Reddy[63]讨论了通过分析外泌体miRNA来识别早期阿尔茨海默病的生物标志物候选。Cheowet al。[64]显示了外泌体作为心肌缺血损伤治疗的生物标志物的效用。在一个神经退行性疾病的例子中，LRRK2(富含亮氨酸重复激酶2)的突变是家族性帕金森病最常见的原因之一，在特发性帕金森病中也被怀疑。LRRK2中的G2019S突变允许现在突变的蛋白质中的丝氨酸磷酸化，这可能作为帕金森病的潜在生物标志物。弗雷泽et al。[65,66]从帕金森患者的尿液外泌体中捕获了含有LRRK2的外泌体，结果表明突变体LRRK2丝氨酸确实被磷酸化了。与对照组患者相比，外泌体中磷酸化丝氨酸水平显著。磷酸化丝氨酸水平也被发现与特发性帕金森患者的认知功能障碍程度相关[66]。外泌体作为生物标志物的潜力似乎是无限的，但要获得有效的生物标志物需要大量的验证[67]。随着这些分析的扩大和变得更加复杂和可靠，外泌体生物标志物将进入生物医学主流，并可能作为液体活组织检查接近[68]。
外泌体有四个特征，使其成为治疗代谢性疾病和各种形式癌症的公认治疗方法。首先，它们是一个自然封装的包，能够避免细胞降解[4]。外泌体可在所有细胞膜上被接收，在血液或脑脊液中携带，并能穿过血脑屏障，使它们成为治疗药物的良好细胞外载体。外泌体也可能更好地被免疫系统耐受，因为它们是细胞货物的天然纳米载体[69,70]。最后，外泌体货物可以取代合成蛋白质或药物，可以诱导治疗反应。作为一个例子，骨再生专注于刺激修复，但没有研究假定的细胞间通信需要刺激和修复的连续性。外泌体既能刺激成骨细胞的修复，也能在细胞之间携带“信息”[71]。因此，外泌体似乎可以通过刺激成骨细胞功能直接调节骨修复。关于外泌体在缓解病理生理中的作用的研究还需要更多的研究。有人提出，外泌体装载了专门的货物，也可以通过添加受体配体到目标特定的细胞群来进行工程。 This approach offers exciting opportunities for treatment of cancer, neurodegenerative or metabolic disease. Reproducible exosome therapies await assessment of delivery to selected tissues and validation of reaching a therapeutic threshold of efficacy. These developments were recently reviewed in [67,72-75].
更好地理解调控ILV形成MVBs、ILV货物的选择和MVBs运输到溶酶体降解或质膜释放的分子机制，将促进我们对外泌体中存在致病性蛋白质、脂质或感染因子的疾病的理解[76]。了解外泌体在健康和疾病中所起的作用的关键是定义外泌体的内容，并了解来自病变细胞的外泌体与健康细胞的不同之处。来自病变细胞的外泌体应该是特定病理的可识别生物标志物的丰富来源。由于外泌体是一种双层脂质结合囊泡，可以保护其内容物不被蛋白质水解，因此，未来外泌体本身可能会装载合成和治疗货物，以改善癌症、神经退行性和代谢性疾病。在过去的10年里，许多外泌体的研究都取得了进展，人们期待着对外泌体在改变细胞功能方面的作用的新见解和更广泛的知识，以及外泌体作为病理和疾病治疗的生物标志物的潜在用途。
肯尼斯·Maiese
研究文章
收稿日期:2016年8月10日
录用日期:2016年8月19日
发布日期:2016年8月23日
©2016麦金尼CE。这是一篇开放获取的文章，根据创作共用署名许可协议(Creative Commons Attribution License)发布，该协议允许在任何媒体上不受限制地使用、分发和复制，前提是注明原作者和来源。
McKinney CE(2016)外泌体:健康和疾病的细胞外传播者。科学通报2:DOI: 10.15761/JTS.1000157。
图1所示。外泌体的产生和运输：外泌体在早期外泌体中形成，作为腔内囊泡(ILV)，由选择性筛选的细胞质内容物形成。然后这些变成多泡体(MVB)。MVB有两种命运;它们可以与溶酶体融合，在那里它们的内容物被降解，或者它们可以与细胞质膜融合，并释放它们的ilv(现在是外泌体)到细胞外空间。附近的受体细胞可以局部捕获外溢物，从而调节其功能。来自细胞外空间的外泌体也可以进入循环，并在远处的细胞位点被捕获，在那里，它们可能调节细胞功能。来自任何细胞来源(肝脏、大脑)的外泌体被任何其他细胞(心脏、胰腺)捕获，从而提供了一个独特的细胞-细胞通信途径
图2。Western blot检测神经2型戈谢系和细胞裂解物分离的外泌体。用ExoQuick (SBI)从条件培养基中分离外泌体。Lane 1:来自患者1260早期神经元的外泌体，Lane 2:来自VCOM 107控制神经元的外泌体，Lane 3:来自患者1260晚期神经元的外泌体，Lane 4: BJ控制神经元细胞溶液，Lane 5:来自BJ控制神经元的外泌体。Western用10% SDS-PAGE凝胶(25ug蛋白/lane)运行，印迹到PVDF，用外泌体中发现的flotillin-1的指示一级抗体和管家酶GPADH检测。尽管GAPDH已经在一些外泌体中被报道过(见Exocarta.org)，但在从这些戈谢尔神经元中分离出来的外泌体中没有发现，这些戈谢尔神经元是从患者成纤维细胞的iPSC系中分化出来的。" M "是荧光标记车道
