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摘要

糖尿病是一种危及生命的世界性代谢疾病。1型糖尿病是由身体无法产生胰岛素引起的，需要注射胰岛素。最近，人们对药用植物治疗越来越感兴趣。因此，本研究的目的是评估生长foenum-graecumC的种子和树皮innamomum zeylanicum实验性糖尿病患者血糖、胰岛素、糖原及碳水化合物代谢酶水平的研究。54只动物被分为9组。采用四氧嘧啶静脉注射诱导糖尿病大鼠，并给予三种不同剂量的水混悬液治疗生长foenum-graecum种子(体重440毫克/公斤、870毫克/公斤和1740毫克/公斤)和树皮肉桂(100毫克/公斤，200毫克/公斤和400毫克/公斤体重)，14天。对照组和糖尿病大鼠在14日分别测量了血糖和胰岛素水平^th的一天。此外，还检测了糖尿病大鼠碳水化合物代谢的组织学改变和关键酶的变化。所有参数均与标准药物格列本脲进行比较。实验结果表明，口服复方黄芪多糖水悬液生长foenum-graecum种子和肉桂树皮粉对糖尿病大鼠的影响呈剂量依赖性，使其各项参数恢复正常。我们目前的研究清楚地揭示了这一点生长foenum-graecum种子和肉桂树皮对实验性糖尿病大鼠具有较强的降糖作用。

关键字

四氧嘧啶诱发糖尿病;吐槽角Trigonella;肉桂;碳水化合物代谢;组织病理学

简介

糖尿病是一种慢性代谢疾病，在发达国家和发展中国家如印度都很普遍。它也是一种主要的内分泌疾病，影响着全世界约10%的人口。糖尿病是由于胰岛素分泌不足或缺乏，或组织对胰岛素的敏感性降低所致[2,3]。糖尿病患者的胰岛素不敏感或胰岛素缺乏，是由于肝脏、肌肉和脂肪组织对血糖的利用减少，肝脏产生葡萄糖增加，导致血糖水平升高。有几个发病过程在糖尿病的发展中起着重要的作用，因为其中一些涉及到胰腺β细胞的死亡，从而导致胰岛素缺乏，而另一些则是对胰岛素作用的抵抗。由于胰岛素在靶组织的分泌或作用存在缺陷，碳水化合物、脂肪和蛋白质代谢确实会出现异常[4]。糖尿病的确切病因尚不清楚，但遗传和环境因素，如肥胖、高脂肪饮食和缺乏锻炼，似乎也会影响1型和2型糖尿病的发病率。糖尿病可导致严重的并发症，如神经病变、肾病、视网膜病变甚至死亡。糖尿病患者可以通过药物、胰岛素控制血糖水平，以及饮食和体育活动等生活方式的管理，过上积极的生活，以预防疾病并发症。

肝脏和肌肉这两个在葡萄糖稳态中起关键作用的重要组织，在糖尿病期间受到严重影响，并已被证明可以改变糖酵解、磷酸戊糖、糖异生和糖原分解途径[5]中的酶的活性。葡萄糖稳态包括分解代谢和合成代谢途径的协调调节以及糖原代谢的调节，糖原代谢是胰岛素分泌反应受损或缺陷[4]。由于胰岛素的不敏感或不足，糖尿病对碳水化合物代谢有高度的影响，因为碳水化合物代谢的一些关键酶是由胰岛素[6]直接或间接调节的。糖尿病还会改变葡萄糖转运蛋白的表达水平，这些转运蛋白调节组织中葡萄糖的利用，并影响细胞过程。在实验性糖尿病中，葡萄糖代谢酶显著改变。其中一种酶是己糖激酶，它催化葡萄糖转化为葡萄糖- 6 -磷酸，并在肝脏和其他组织中维持葡萄糖稳态中发挥重要的调节作用。己糖激酶作为胰岛素调节酶，在糖尿病患者中由于胰岛素缺乏，其活性受到抑制。葡萄糖- 6 -磷酸酶也在葡萄糖稳态中发挥关键作用，因为它催化糖原分解和糖异生的生化反应。糖异生酶的激活在胰岛素缺乏的糖尿病中被观察到，因为在正常情况下，胰岛素是糖异生酶的抑制因子。胰岛素通过降低葡萄糖- 6 -磷酸酶、果糖- 1,6 -双磷酸酶、磷酸烯醇丙酮酸羧酸激酶和丙酮酸羧酸激酶[8]等关键酶的活性来降低糖异生。

糖尿病的管理包括非药物和药物方法。非药理学方法包括运动、饮食控制和手术，而药理学方法包括使用胰岛素和口服降糖药等药物。合成的降糖药不仅价格昂贵，而且有严重的副作用。因此，研究的重点已经转移到草药上，因为草药不仅容易获得，而且对其他身体功能没有毒性作用。许多具有降糖潜力的草药已被推荐用于治疗糖尿病。药用植物中存在的多种成分已被测试，并被发现具有抗高血糖的潜力，从而显示出治疗糖尿病及其并发症的效果。

超过12000种植物被描述为实验或民族药理学上用于治疗糖尿病，许多科学家在糖尿病研究领域研究了各种具有药用价值的植物提取物。在目前的研究中，两种广泛用于治疗糖尿病的药用植物，小耳Trigonella foenum graecum和Cinnamomum zeylanicum分别是胡芦巴和肉桂;研究其对糖尿病大鼠碳水化合物代谢的影响。这两种植物都以其刺鼻的香气而闻名，被用作香料，在印度美食中经常食用。对不同动物模型的研究证明胡芦巴具有较强的抗糖尿病特性。一些研究表明胡芦巴种子提取物、种子粘液和叶子可以降低人类和实验性糖尿病动物的血糖水平[10,11]。肉桂是一种安全历史悠久的天然产品，富含多酚类成分，已被证明可以提高抗氧化活性。桂皮是家族的樟科，其主要成分为肉桂醛、肉桂酸、单宁和甲基羟查尔酮聚合物(MHCP)。肉桂皮具有显著的抗糖尿病、抗过敏、抗溃疡、解热和抗氧化特性[12,13]。这两种药不仅被用于治疗糖尿病，还被用于治疗其他一些疾病。

葫芦巴籽和肉桂皮的抗高血糖和抗氧化作用已经有文献报道[10-13]。本研究计划评估两者的保护作用生长foenum-graecum种子,樟属zelanicum树皮对四氧嘧啶诱导的糖尿病大鼠碳水化合物代谢改变的恢复作用。采用标准降糖药格列本脲作为阳性对照。

材料与方法

化学物质

本研究中使用的化学品纯度最高/分析等级最高。葡萄糖、5’-三磷酸腺苷、TRIS缓冲液、三乙醇胺、乙二胺四乙酸、糖原、d -葡萄糖-6-磷酸、磷酸烯醇丙酮酸、二磷酸腺苷、三氯乙酸、尿苷二磷酸葡萄糖、丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶、格列苯脲、福林- ciocalteu’s试剂、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、葡萄糖-6-磷酸、果糖1,6双磷酸、1-氨基，2-萘酚，4-磺酸(ANSA)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(还原和氧化)和氯化镁购自印度HIMEDIA Chemicals。四氧嘧啶一水合物，β巯基乙醇购自Sigma Aldrich Chemicals Private Limited, MO, USA。大鼠胰岛素酶联免疫吸附测定试剂盒购自Crystal Chem Inc.。

实验动物

Wistar株系成年雄性白化大鼠(鼠形)，重约140±10 g。大鼠从印度Gwalior国防研究与发展机构的动物设施中获得，并在我们部门的光(光-暗循环12小时)和温度(25⁰C±2 C)控制的动物室中饲养，以标准颗粒饲料(从印度新德里Amrut大鼠和小鼠饲料中获得)和自来水饲养随意．大鼠在实验开始前驯化一周。

实验设计

大鼠随机分为9组，每组6只。将动物分为四组，分别给予以下处理:

第1组:对照组大鼠(血糖正常的健康大鼠)

第二组:糖尿病对照大鼠(静脉注射四氧嘧啶55 mg/kg体重)

第三组:糖尿病+葫芦巴籽粉(440 mg/kg)

第四组:糖尿病+葫芦巴籽粉(870 mg/kg)

第五组:糖尿病+葫芦巴籽粉(1740 mg/kg)

第六组:糖尿病+桂皮粉(100 mg/kg)

第七组:糖尿病+桂皮粉(200 mg/kg)

第八组:糖尿病+肉桂皮粉(400 mg/kg)

第9组:糖尿病+格列本脲(0.6 mg/kg)

实验性糖尿病的诱导生长而且樟属治疗

采用单次静脉注射55 mg/kg体重溶解于生理盐水(0.85% NaCl)[14]的一水四氧嘧啶诱导过夜禁食成年大鼠糖尿病。48 h后用电子血糖仪估计血糖，确诊糖尿病。空腹血糖水平高于300 mg/dl的大鼠被认为是糖尿病，并被选为研究对象。

生长foenum-graecum（过渡政府)种子及肉桂（Cz)树皮是从当地草药市场购买的，经过清洗、干燥和细粉。两种粉末的水悬浮液过渡政府种子和Cz制备树皮，经导管口服糖尿病大鼠440 mg/kg、870 mg/kg、1740 mg/kg体重[15]和100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg体重[16]3种剂量，同时口服格列本脲0.6 mg/kg体重[17]，连续2周。

采集血液和组织

最后一次治疗后24小时，通过眼出血在不含EDTA的试管中采集血液进行血清分离。采血后采用脱位法处死大鼠;切除肝脏和脑组织，用0.9% NaCl洗涤，用于不同的估计。根据印度国家动物保护和使用法，按照印度瓜廖尔市吉瓦吉大学动物保护伦理委员会的规则和指示，对动物进行处理、道德对待和人道杀害。

胰岛素水平的估计

采用大鼠胰岛素酶联免疫吸附试验试剂盒，按厂家规定的方法定量估计血清胰岛素。灵敏度为0.025 μg/l。它是一种基于直接夹心技术的固相双位点酶免疫分析方法。通过与3,3 '，5,5 ' -四甲基联苯胺反应，测定了结合共轭。通过添加酸来停止反应，并在450nm的微板阅读器中读取。

酶活性估计

己糖激酶活性由Brandstrup[18]测定。在2.57 ml的反应混合物中，最终浓度为39 mM三乙醇胺，216 mM d -葡萄糖，0.74 mM ATP, 7.8 mM氯化镁，1.1 mM NADP和2.5单位葡萄糖-6-磷酸脱氢酶。在340 nm处记录每分钟吸光度变化5分钟。比活性以单位/ mg蛋白表示。一个单位在25°C下每分钟磷酸化1.0 μmol d -葡萄糖。

丙酮酸激酶按Buchner和Pfleiderer[19]法测定。反应混合物含有0.2 mM Tris-HCl缓冲液(pH 7.4)， 0.1 mM KCl, 10 mM MgCl₂， 5 mM ADP, 5 mM磷酸烯醇丙酮酸，4单位LDH, 0.24 mM NADH和适当稀释的酶蛋白。在340 nm下测定5 min的吸光度变化。比活性以μmol NADH氧化/ min/ mg蛋白表示。

采用Gancedo和Gancedo[20]法测定果糖1,6双磷酸酶活性。最终体积为2 ml的试验混合物包含1.2 ml Tris-HCl缓冲液(0.1 M, pH 7.0)， 0.1 ml果糖1,6双磷酸盐(0.05 M)， 0.25 ml氯化镁(0.1 M)， 0.1 ml氯化钾(0.1 M)， 0.25 ml EDTA (0.001 M)和0.1 ml肝脏匀浆。37°C孵育15分钟。加入1ml 10% TCA终止反应。将悬浮液离心，上清液用于Pi测定。比活性以μmol Pi形成/ min/ mg蛋白表示。

采用Koide和Oda[21]法测定葡萄糖-6-磷酸酶活性。孵育混合物含有0.7 ml柠檬酸缓冲液(0.1 M, pH 6.2)， 0.3 ml底物葡萄糖-6-磷酸(0.1 M)和0.3 ml组织匀浆。将反应混合物在37⁰C中孵育1小时。向反应管中添加1ml 10%的TCA终止反应。将悬浮液离心，测定Pi值。比活性以μmol Pi形成/ min/ mg蛋白表示。

Pi采用Fiske和Subbarow[22]法测定，无机磷酸盐浓度以μmol /ml表示。糖原合酶活性采用Leloir和Goldemberg[23]法测定。在3.10 ml反应混合物中，最终浓度为48 mM Tris, 12.4mM MgCl2, 1 mM EDTA, 2.4mM 2-巯基乙醇，3.63 mM UDPG和9.7 mM葡萄糖6-磷酸。在340 nm处记录每分钟吸光度变化5分钟。比活性以单位/ mg蛋白表示。在pH值8.2、30°C的条件下，一个单位每分钟可催化1.0 μmol的UDP-葡萄糖与糖原结合，生成1.0 μmol的UDP(以PK/LDH/NADH体系测量)。以牛血清白蛋白为标准[24]，采用Lowry等的方法测定组织样品中的蛋白质含量。

糖原含量估计

采用Plummer et al.[25]方法测定大鼠组织中的糖原。糖原水平以mg/ g组织表达。

组织病理学研究

取对照组、未治疗糖尿病大鼠和治疗糖尿病大鼠的肝脏、肌肉和胰腺，在处死时用生理盐水冲洗，立即转入10%甲醛盐水包蜡，切片后用苏木精和伊红染色，在光镜[26]下100X倍放大观察。

统计分析

结果以不同日子六组观测值的平均值±标准差表示。使用Sigma Stat统计软件2.0版本进行统计分析。所有统计分析均采用单向方差分析，并在治疗组间应用Bonferroni 's多重比较检验。重要性是基于P值< 0.05。

结果

莪术皮粉口服对对照组和糖尿病大鼠血糖水平的影响

所有大鼠均采用尾静脉采血，电子血糖仪检测血糖水平。三种不同剂量的效果过渡政府种子(440毫克/公斤，870毫克/公斤，1740毫克/公斤体重)和Cz研究了树皮(100 mg/kg、200 mg/kg和400 mg/kg体重)对四氧嘧啶诱导的糖尿病大鼠血糖水平的影响。观察到，口服给药的水悬液过渡政府种子和Cz树皮粉可显著降低糖尿病大鼠的血糖水平。本研究结果表明，口服440 mg/kg, 870 mg/kg, 1740 mg/kg体重，过渡政府种子粉每日给药14天，对糖尿病大鼠造成3.0%、6.3%和16.6%的下降^th第14天血糖下降5.6%、14.8%、34.2%^th治疗的开始。100 mg/kg、200 mg/kg和400 mg/kg体重，Cz对糖尿病大鼠的影响分别为2.4%、8.3%和7.6%^th第14天血糖水平分别下降9.1%、18.1%和20.6%^th与第0天比较(表1)。作为阳性对照的标准药物格列本脲(0.6 mg/kg体重)在第7天降低23.2%^th第14天下降47.7%^th与0天相比。结果清楚地显示了两者的降糖潜力过渡政府种子和Cz树皮。

表1。不同剂量水悬液口服的效果小耳Trigonella foenum graecum而且肉桂对对照组和糖尿病大鼠血糖水平进行为期两周的观察。

组	0天	7th一天	14th一天
控制	80.8±4.5	87.8±7.3＃	91.3±3.7＃
糖尿病	305.2±5.4	380.2±7.6**	437.8±4.2**
糖尿病+过渡政府(440毫克/公斤)	428.6±8.2	415.6±9.5＃	404.6±9.2*
糖尿病+过渡政府(870毫克/公斤)	439.5±5.8	411.7±2.2*	374.3±4.1***
糖尿病+过渡政府(1740毫克/公斤)	450.6±6.1	375.8±3.2**	296.5±2.8***
糖尿病+Cz(100毫克/公斤)	372.8±7.2	363.8±7.4＃	338.8±10.4*
糖尿病+Cz(200毫克/公斤)	376.6±1.8	345.3±1.7**	308.3±2.7***
糖尿病+Cz(400毫克/公斤)	387.0±1.8	357.5±2.4**	307.2±3.1***
糖尿病+ Gli (0.6 mg/kg)	400.6±2.7	307.2±2.6***	209.3±3.8***

用电子血糖仪测量血糖水平，以mg/ dl表示。

结果为6组观测的均数±标准差。* P < 0.05， ** P < 0.001， *** P < 0.0001，^＃与对照组比较，P > 0.05。

给予糖尿病大鼠粉末水悬液小耳Trigonella foenum graecum种子和肉桂树皮口服剂量分别为440 mg/kg、870 mg/kg、1740 mg/kg (过渡政府)和100毫克/公斤、200毫克/公斤、400毫克/公斤体重(Cz)，在插管的帮助下，每天，持续两周。

以格列本脲(Gli)为阳性对照，给予0.6 mg/kg体重。

莪术子、莪术皮粉口服对糖尿病大鼠肝脏和肌肉组织糖酵解酶活性的影响

本研究的结果清楚地表明，在大鼠给药四氧嘧啶引起糖酵解酶，即己糖激酶和丙酮酸激酶在肝脏和肌肉的活性的改变。与对照组相比，肝脏中己糖激酶和丙酮酸激酶活性分别降低58.8%和42.2%，肌肉中己糖激酶活性分别降低45.0%和47.7%(表2)。给予糖尿病大鼠体重440 mg/kg、870 mg/kg、1740 mg/kg时，肝脏中己糖激酶和丙酮酸激酶活性分别降低45.0%和47.7%过渡政府与未治疗的糖尿病组相比，治疗两周后，肝脏中己糖激酶活性分别增加3.9%、42.2%、77.1%，肌肉组织中丙酮酸激酶活性分别增加13.1%、23.1%、48.4%，己糖激酶活性分别增加3.7%、16.2%、54.7%，丙酮酸激酶活性增加25.8%、34.4%、34.5%(表2)。与未治疗的糖尿病组相比，100 mg/kg、200 mg/kg和400 mg/kg体重组亦如此Cz与未治疗组比较，糖尿病治疗组大鼠肝脏己糖激酶、丙酮酸激酶活性分别增加11.0%、51.7%、65.3%和7.6%、44.6%、52.3%，肌肉中己糖激酶、丙酮酸激酶活性分别增加22.6%、40.7%、43.3%和9.6%、48.3%、61.2%。与未治疗组相比，格列苯脲治疗组肝脏己糖激酶和丙酮酸激酶活性分别提高114%、61.5%，肌肉己糖激酶和丙酮酸激酶活性分别提高63.0%、79.5%。结果清楚地表明，糖酵解关键酶活性的恢复表明，这些植物治疗糖尿病的糖酵解恢复。

表2。口服给药效果小耳Trigonella foenum graecum而且肉桂对对照组和糖尿病大鼠肝脏和肌肉中糖酵解酶的活性进行了为期两周的研究。

	组	己糖激酶	丙酮酸激酶
肝
	控制	9.3±0.7	2.3±0.1
	糖尿病	3.8±0.7**	1.3±0.2**
	糖尿病+过渡政府(440毫克/公斤)	3.9±0.7＃	1.5±0.2＃
	糖尿病+过渡政府(870毫克/公斤)	5.4±0.6＃	1.6±0.1＃
	糖尿病+过渡政府(1740毫克/公斤)	6.8±0.5**	1.9±0.1*
	糖尿病+Cz(100毫克/公斤)	4.2±0.6＃	1.4±0.2＃
	糖尿病+Cz(200毫克/公斤)	5.8±0.6*	1.9±0.1*
	糖尿病+Cz(400毫克/公斤)	6.3±0.5*	1.9±0.1*
	糖尿病+ Gli (0.6 mg/kg)	8.2±0.6**	2.1±0.1**
肌肉
	控制	4.8±0.2	1.8±0.1
	糖尿病	2.6±0.2***	0.9±0.1***
	糖尿病+过渡政府(440毫克/公斤)	2.7±0.2＃	1.2±0.1*
	糖尿病+过渡政府(870毫克/公斤)	3.1±0.2＃	1.2±0.1**
	糖尿病+过渡政府(1740毫克/公斤)	4.1±0.1**	1.5±0.1***
	糖尿病+Cz(100毫克/公斤)	3.2±0.1*	1.1±0.1＃
	糖尿病+Cz(200毫克/公斤)	3.7±0.1**	1.4±0.1***
	糖尿病+Cz(400毫克/公斤)	3.8±0.1**	1.5±0.1***
	糖尿病+ Gli (0.6 mg/kg)	4.3±0.2**	1.7±0.1***

己糖激酶比活性以单位/毫克蛋白表示。在pH 7.6和25°C条件下，一个单位每分钟磷酸化1.0 μmol d -葡萄糖。

丙酮酸激酶的比活性以μmol NADH氧化/ min/ mg蛋白表达。

结果为6组观测的均数±标准差。* P < 0.05， ** P < 0.001， *** P < 0.0001，^＃与对照组比较，P > 0.05

给予糖尿病大鼠粉末水悬液小耳Trigonella foenum graecum种子和肉桂树皮口服剂量分别为440 mg/kg、870 mg/kg、1740 mg/kg (过渡政府)和100毫克/公斤、200毫克/公斤、400毫克/公斤体重(Cz)，在插管的帮助下，每天，持续两周。

以格列本脲(Gli)为阳性对照，给予0.6 mg/kg体重。

莪术子、莪术皮粉口服对糖尿病大鼠肝脏和肌肉组织糖异生酶活性的影响

糖异生关键酶果糖1,6双磷酸酶和葡萄糖-6-磷酸酶的测定也证实了糖尿病引起的糖代谢紊乱。结果表明，糖尿病大鼠肝脏和肌肉中酶的活性均显著增加。与对照组相比，糖尿病大鼠肌肉酶中果糖-1,6-双磷酸酶和葡萄糖-6-磷酸酶的肝脏活性分别提高了85.1%、47.3%和66.6%、40%。过渡政府而且Cz与未治疗组比较，治疗15 d后，糖尿病大鼠组织中两种酶活性均下降。过渡政府与糖尿病组比较，3种不同剂量440 mg/kg、870 mg/kg、1740 mg/kg体重组大鼠肝脏下降1.14%、8.0%、32.1%，肌肉中果糖-1,6-双磷酸酶活性下降6.0%、14.0%、32.0%，肝脏下降3.5%、10.7%、25.0%，肌肉中葡萄糖-6-磷酸活性下降4.7%、9.5%、19.1%。相似Cz与糖尿病大鼠相比，三种不同剂量(100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg体重)的治疗使糖尿病大鼠肝脏下降2.2%、14.9%、24.1%，肌肉果糖-1,6-双磷酸酶活性下降6%、16%、24%，肝脏下降1.1%、7.1%、10.7%，肌肉葡萄糖- 6磷酸酶活性下降4.7%、14.2%、19.0%(表3)。与糖尿病大鼠相比，肝脏和肌肉中果糖-1,6-双磷酸酶活性降低36.0%，肝脏和肌肉中葡萄糖-6-磷酸酶活性降低28.5%，23.8%。

表3。口服给药效果小耳Trigonella foenum graecum而且肉桂对对照组和糖尿病大鼠肝脏和肌肉中糖异生酶的活性进行了为期两周的研究

	组	的特性,6-bis磷酸酶	Glucose-6-phosphatase
肝
	控制	0.47±0.01	0.19±0.01
	糖尿病	0.87±0.02***	0.28±0.01***
	糖尿病+过渡政府(440毫克/公斤)	0.86±0.02＃	0.27±0.01*
	糖尿病+过渡政府(870毫克/公斤)	0.80±0.02*	0.25±0.01**
	糖尿病+过渡政府(1740毫克/公斤)	0.59±0.01***	0.21±0.01***
	糖尿病+Cz(100毫克/公斤)	0.85±0.02＃	0.28±0.01＃
	糖尿病+Cz(200毫克/公斤)	0.74±0.01**	0.26±0.01***
	糖尿病+Cz(400毫克/公斤)	0.66±0.01***	0.25±0.01***
	糖尿病+ Gli (0.6 mg/kg)	0.50±0.01**	***
肌肉
	控制	0.30±0.01	0.15±0.01
	糖尿病	0.50±0.01**	0.21±0.01***
	糖尿病+过渡政府(440毫克/公斤)	0.47±0.01＃	0.20±0.01*
	糖尿病+过渡政府(870毫克/公斤)	0.43±0.01**	0.19±0.01***
	糖尿病+过渡政府(1740毫克/公斤)	0.34±0.01***	0.17±0.01***
	糖尿病+Cz(100毫克/公斤)	0.47±0.01＃	0.20±0.01＃
	糖尿病+Cz(200毫克/公斤)	0.42±0.01**	0.18±0.01**
	糖尿病+Cz(400毫克/公斤)	0.38±0.01***	0.17±0.01**
	糖尿病+ Gli (0.6 mg/kg)	0.32±0.01***	0.16±0.01***

果糖-1,6-二磷酸酶和葡萄糖6磷酸酶的比活性均以μmol Pi形成/min/mg蛋白表示。

结果为6组观测的均数±标准差。* P < 0.05， ** P < 0.001， *** P < 0.0001，^＃与对照组比较，P > 0.05。

给予糖尿病大鼠粉末水悬液小耳Trigonella foenum graecum种子和肉桂树皮口服剂量分别为440 mg/kg、870 mg/kg、1740 mg/kg (过渡政府)和100毫克/公斤、200毫克/公斤、400毫克/公斤体重(Cz)，在插管的帮助下，每天，持续两周。

以格列本脲(Gli)为阳性对照，给予0.6 mg/kg体重。

莪术子、莪术皮粉口服对糖尿病大鼠肝脏和肌肉组织糖原含量及糖原合酶活性的影响

开展了监测糖尿病对糖原合成酶和糖原磷酸化酶在糖原代谢中起关键作用的研究。在本研究中，我们评估了糖原合酶活性和糖原水平在糖尿病大鼠的影响，并评估了保护作用过渡政府而且Cz治疗。与对照组相比，糖尿病大鼠肝脏中糖原合成酶活性下降56.9%，肌肉中糖原活性下降49.0%，肝脏中糖原水平下降40.1%，肌肉组织中糖原水平下降34.6%。

给药剂量分别为440 mg/kg、870 mg/kg、1740 mg/kg体重过渡政府种子粉处理15 d后，肝脏糖原合酶活性分别提高12.1%、20.2%、46.4%，肌肉糖原活性分别提高3.5%、7.1%、28.5%;肝脏糖原水平分别提高2.9%、12.7%、47.3%，肌肉糖原水平分别提高3.2%、10.9%。与未治疗的糖尿病组相比，糖尿病大鼠的肌肉中分别有39.4%(表4)。

表4。口服给药效果生长foenumgraecum而且肉桂对对照组和糖尿病大鼠肝脏和肌肉中糖原含量及糖原合酶活性进行了为期两周的观察。

	组	糖原合酶	糖原
肝
	控制	2.30±0.14	32.7±0.87
	糖尿病	0.99±0.10***	19.6±0.32***
	糖尿病+过渡政府(440毫克/公斤)	1.11±0.10*	20.2±0.30＃
	糖尿病+过渡政府(870毫克/公斤)	1.19±0.10*	22.1±0.13**
	糖尿病+过渡政府(1740毫克/公斤)	1.45±0.08**	28.8±0.14***
	糖尿病+Cz(100毫克/公斤)	1.18±0.10＃	20.4±0.25＃
	糖尿病+Cz(200毫克/公斤)	1.78±0.12**	26.1±0.26***
	糖尿病+Cz(400毫克/公斤)	1.88±0.10**	28.4±0.14***
	糖尿病+ Gli (0.6 mg/kg)	1.97±0.10***	31.8±0.22***
肌肉
	控制	0.55±0.02	9.08±0.10
	糖尿病	0.28±0.01***	5.93±0.14***
	糖尿病+过渡政府(440毫克/公斤)	0.29±0.01＃	6.12±0.13＃
	糖尿病+过渡政府(870毫克/公斤)	0.30±0.01*	6.58±0.19*
	糖尿病+过渡政府(1740毫克/公斤)	0.36±0.01**	8.27±0.17***
	糖尿病+Cz(100毫克/公斤)	0.29±0.01＃	6.15±0.13＃
	糖尿病+Cz(200毫克/公斤)	0.32±0.01**	7.60±0.13***
	糖尿病+Cz(400毫克/公斤)	0.34±0.01**	8.15±0.07***
	糖尿病+ Gli (0.6 mg/kg)	0.48±0.02***	8.93±0.09***

糖原合酶比活性以单位/ mg蛋白表示。在pH值8.2、30°C的条件下，每分钟可催化1.0 μmol葡萄糖从udp -葡萄糖合成糖原。

糖原在mg/g组织中的表达水平。

结果为6组观测的均数±标准差。* P < 0.05， ** P < 0.001， *** P < 0.0001，^＃与对照组比较，P > 0.05。

给予糖尿病大鼠粉末水悬液小耳Trigonella foenum graecum种子和肉桂树皮口服，体重440 mg/kg、870 mg/kg、1740 mg/kg (过渡政府)和100毫克/公斤、200毫克/公斤、400毫克/公斤体重(Cz)，在插管的帮助下，每天，持续两周。

以格列本脲(Gli)为阳性对照，给予0.6 mg/kg体重。

糖原合酶活性在肝脏中分别提高了19.1%、79.7%、89.8%，在肌肉中分别提高了3.5%、14.2%、21.4%。同样，糖原水平在肝脏中分别提高了3.9%、33.1%、45.3%，在糖尿病大鼠肌肉中分别提高了3.7%、28.1%、37.4%Cz给药2周后，与对照组比较(表4)。给药2周后，糖尿病大鼠肝脏和肌肉中糖原合酶活性分别下降98.9%和71.4%，与未治疗的糖尿病大鼠相比，肝脏和肌肉中糖原含量分别下降62.3%和50.5%。

莪术子、莪术皮粉口服对糖尿病大鼠血清胰岛素水平的影响

结果表明，糖尿病血清样品的胰岛素水平明显降低。观察到，糖尿病大鼠胰岛素水平较对照组下降74.2%。过渡政府而且Cz治疗两周后，与未治疗组相比，糖尿病大鼠血清胰岛素水平升高。治疗后的糖尿病大鼠恢复率为161.9%过渡政府(1740 mg/kg体重)，回收率为141.7%Cz(200 mg/kg体重)，而格列本脲与未治疗的糖尿病组相比，恢复率为220.2%(图1)。

图1所示。对照组和给药大鼠血清胰岛素水平(µg/l)过渡政府种子和Cz树皮粉两周。C、控制;D、糖尿病;D +过渡政府，给予1740 mg/ Kg体重治疗的糖尿病大鼠小耳Trigonella foenum graecum种子粉;D +Cz，给予200 mg/kg体重治疗的糖尿病大鼠肉桂树皮粉;D+Gli，接受0.6 mg/kg体重格列本脲治疗的糖尿病大鼠

莪术子、莪术皮粉口服对糖尿病大鼠胰腺、肝脏及骨骼肌组织的影响

对照组胰腺组织外分泌部分朗格汉斯胰岛呈正态分布，胰岛规整，边界清楚。糖尿病胰腺组织表现为胰岛大小缩小，β细胞破坏坏死。糖尿病大鼠胰腺组织中胰岛数量随直径减少而减少。当糖尿病动物用水混悬液治疗时过渡政府种子粉(1740毫克/公斤体重)和Cz树皮粉(200 mg/kg)给药2周后，胰岛细胞形态与正常组织相同，朗格汉斯岛的大小和直径均有所增加(图2)成品而且Cz．

图2。对照组和治疗组大鼠各组织组织学(H & E × 400)。图P1、图L1、图M1分别为对照组胰腺、肝脏、骨骼肌正常组织学，图P2、图L2、图M2为糖尿病大鼠各种组织学改变。P3, L3和M3接收过渡政府种子粉(1740 mg/kg体重);P4, L4, M4，正在接收Cz树皮粉(200 mg/kg体重);P5, L5和M5，接受格列本脲(0.6 mg/kg体重)治疗2周。

P:胰腺，L:肝脏，M:肌肉，1:对照组，2:糖尿病患者，3:糖尿病+过渡政府,4:糖尿病+Cz,5:糖尿病+格列本脲

对照组骨骼肌肌纤维结构正常，糖尿病大鼠骨骼肌肌纤维排列紊乱，细胞坏死，肌原纤维中断，肌原纤维之间失去连接(图2)过渡政府种子粉(1740毫克/公斤体重)和Cz树皮粉(200 mg/kg)给予糖尿病大鼠2周，显示出保护作用，并与骨骼肌结构特征正常化相关，与对照组相似(图2)。

对照组肝脏细胞结构正常，有门脉三联征、中央静脉、大量肝细胞及肝窦衬里。与对照组比较，糖尿病大鼠肝脏出现细胞异常，血管变性、坏死、血管充血、细胞变性、核固缩(图2)过渡政府种子粉(1740毫克/公斤体重)和Cz与未治疗的糖尿病组相比，200 mg/kg体重的树皮粉对糖尿病动物肝脏的细胞成分有恢复和恢复作用(图2)。

讨论

糖尿病(DM)以碳水化合物、脂肪和蛋白质代谢紊乱导致高血糖为特征，其中在糖尿病初期碳水化合物代谢受到高度影响。慢性胰岛素缺乏和胰岛素不敏感是肝脏葡萄糖利用减少和葡萄糖生成增加的主要原因，因为胰岛素通过激活糖原合成和糖酵解，抑制糖异生，降低肝脏葡萄糖输出。四氧嘧啶被广泛用于诱导动物实验性糖尿病，其细胞毒作用由活性氧(ROS)介导。四氧嘧啶和它的还原产物，双尿酸，建立一个氧化还原循环，形成超氧自由基。ROS的作用与胞浆钙浓度的同时大量增加导致β细胞[27]的快速破坏。

在本研究中，2021版权OAT。所有权利保留为动物模型，因为它与人类1型糖尿病的许多特征相似。目前的研究是为了评估抗糖尿病的潜力过渡政府种子和Cz树皮和保护，如果有，对改变糖尿病大鼠的碳水化合物代谢。结果显示，糖尿病大鼠血糖水平明显升高，而每天给药两种植物的籽粉和皮粉水悬液，以三种不同剂量连续给药两周后，糖尿病大鼠血糖水平呈剂量依赖性和时间依赖性下降。在第7天和第14天，当给予不同剂量的维生素d时，血糖水平的下降分别为3%至17%和6%至34%过渡政府种子而Cz治疗组第7天血糖水平下降2% ~ 8%，9% ~ 21%^th和14^th,分别。在给予格列本脲的组中，血糖水平在第7天下降了23%和48%^th和14^th,分别。

葡萄糖水平升高可能是由于四氧嘧啶破坏胰腺β细胞导致胰岛素释放显著减少。其降糖作用的可能机制过渡政府种子和Cz树皮可能是通过调节胰腺细胞和增强胰腺分泌胰岛素的β细胞和/或由于加强运输血糖到外周组织。四氧嘧啶诱导的糖尿病大鼠胰岛素水平明显下降，这是由于胰腺β细胞的破坏，在组织学研究中可以清楚地看到。口服过渡政府而且Cz与未治疗组比较，能显著恢复糖尿病大鼠血清胰岛素水平。

胰岛素水平升高过渡政府而且Cz经治疗的糖尿病大鼠可能是由于胰岛素分泌刺激活动引起胰腺剩余β细胞的激活，这与所观察到的组织学观察结果一致。

本研究显示注射四氧嘧啶后胰腺组织病理学改变，以细胞破坏为代表。四氧嘧啶可引起糖尿病大鼠肝脏和骨骼肌形态学改变，肝细胞和肌纤维损伤严重。这些结果证实了其他研究者的发现[28-30]。当糖尿病大鼠用过渡政府种子和Cz树皮粉，恢复已观察到胰腺，肝脏和肌肉。两种植物的活性化合物4-羟基异亮氨酸和肉桂醛过渡政府而且Cz，分别对糖尿病并发症有保护作用，可能涉及到组织病理学层面。

肝脏是糖酵解和糖异生的主要场所，这两个重要的互补途径平衡体内的葡萄糖水平。由于胰岛素缺乏/不敏感导致低血糖[32]，糖尿病患者葡萄糖稳态受到高度影响。注射四氧嘧啶可破坏胰腺β细胞，并通过减少胰岛素分泌而增加血糖水平。胰岛素通过多种方式影响细胞内葡萄糖的利用，包括通过增加几种关键酶的活性和数量来增加肝脏糖酵解。本研究观察到糖尿病大鼠己糖激酶和丙酮酸激酶活性显著降低，表明糖尿病条件下胰岛素依赖组织(骨骼肌)和胰岛素不依赖组织(肝脏)的糖酵解率降低。己糖激酶活性降低也表明在糖尿病情况下，葡萄糖-6-磷酸对HMP分流的正常运作的可用性降低。糖酵解酶活性下降的类似模式在糖尿病动物中也有报道。水悬浮液的管理过渡政府而且Cz糖尿病大鼠肝脏和骨骼肌中己糖激酶和丙酮酸激酶活性显著升高。葡萄糖在细胞内的转运可能是由过渡政府种子和Cz树皮粉，反过来刺激这些酶的活性。过渡政府而且Cz有助于恢复糖酵解酶的活性，从而恢复糖尿病大鼠的能量供应。

葡萄糖-6-磷酸酶是糖原分解和糖异生的最后一步，果糖- 1,6 -二磷酸酶是糖异生的重要调节酶之一，其受糖尿病的影响。糖尿病导致这些酶水平升高[34,35]。糖尿病大鼠肝脏和肌肉中葡萄糖6-磷酸酶和果糖- 1,6双磷酸酶活性升高可能与胰岛素功能不全有关。在本研究中，在口服葡萄糖-6-磷酸酶和果糖1,6双磷酸酶的悬液后，观察到这两种酶的活性显著降低过渡政府种子和Cz树皮粉给药两周表明，糖异生被抑制，有助于糖尿病大鼠的抗高血糖作用。

众所周知，糖尿病损害了肌肉和肝脏合成糖原的正常能力。糖尿病大鼠肝脏和肌肉糖原含量显著降低。糖原是葡萄糖在细胞内的主要储存形式，胰岛素通过刺激糖原合成酶和抑制糖原磷酸化酶促进细胞内糖原沉积，糖原在各组织中的水平直接反映了胰岛素的活性。由于四氧嘧啶对胰腺β细胞造成损害，同时胰岛素水平下降，很明显，组织中的糖原水平，特别是肝脏和肌肉，下降，因为它们依赖胰岛素进行细胞内葡萄糖运输。一般来说，肝脏葡萄糖生成增加，加上肝糖原合成和糖酵解减少，是导致高血糖的主要部位。糖原合酶是骨骼肌和肝脏中糖原由葡萄糖合成的关键酶[35,36]。有报道称，糖尿病期间糖原合成酶降低，糖原磷酸化酶活性随之升高[37-39]。我们的结果与早期的发现相吻合。组织中糖原水平的恢复过渡政府而且Cz治疗动物，可能由于胰岛素水平的增加导致糖原合酶活性的恢复。在本研究中，我们观察到糖尿病大鼠的胰岛素水平和糖原合成酶活性的变化，并在一定程度上恢复了两者的治疗过渡政府而且Cz．

碳水化合物代谢机制的缺陷和生理系统不断努力恢复碳水化合物代谢失衡，使内分泌系统过度紧张，导致内分泌控制恶化。内分泌控制的持续恶化导致代谢紊乱。治疗过渡政府而且Cz糖尿病大鼠表现出对糖尿病诱导的碳水化合物代谢改变的保护作用。

结论

从目前的研究可以得出结论过渡政府而且Cz对四氧嘧啶诱导的糖尿病大鼠恢复血糖水平、碳水化合物代谢酶及组织学改变有保护作用。这确立了两种植物在维持葡萄糖稳态方面的功效，可作为治疗糖尿病的药物。其降糖作用的确切机制有待进一步研究小耳Trigonella foenum graecum种子和肉桂树皮粉。

确认

感谢印度新德里科技部以FIST赠款的形式向学校提供的财政支持，以及印度博帕尔中央邦科学技术委员会以Nalini Srivastava个人研究项目的形式提供的财政支持。

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