这项研究评估了营养和安全质量卡利亚使用动物饲养实验进行加热和生化过程的种子。这卡利亚种子被清洗并加工成面粉样品。含20%加工食品的饮食卡利亚制备了种子粉样品和80%维生素A玉米粉样品,并喂给健康wistar大鼠。监测的参数包括采食量、生长性能、死亡率、使用标准方法进行的生化和组织病理学试验。使用适当的描述性和推理统计学方法对所得数据进行分析。结果表明卡利亚基础饲粮和基础饲粮不支持实验动物的生长,热加工样品的死亡率为100%
加入经生化处理的kariya种子(脱脂发芽)卡利亚饮食,脱脂发酵卡利亚饮食、脱脂germinated-fermented卡利亚饮食和发芽全面粉卡利亚饮食)的死亡率分别为80、80、40和80%。在一些喂食热处理的大鼠中,大鼠的肝脏发生了退化卡利亚种子面粉样品。
总之,生化过程是解毒的卡利亚种子比热处理过程更好。面粉来自卡利亚实验动物种子经生化处理后死亡率较低,无肝变性。
天冬氨酸转氨酶、采食量、发酵、发芽、肝脏、死亡率
农产品含有一些不受欢迎的成分,通常对消费者的健康有害;处理是用于灭活或去除任何不受欢迎的组分的方法之一。已经将包括发酵,萌发,烹饪,沸腾,焙烧等的几种方法被鉴定为降低,除去和排出生物材料的污染物的方法。发酵被定义为由微生物和它们在加工过程中对所需产品引起的理想的生化过程或生物化学变化[1]。它是一种自然的方式来减少要运输的材料的体积,以破坏不希望的组分,以增强食物的营养价值和外观,以减少烹饪时间和能量,并获得安全的食品[2]。发芽是所有优质植物的天然生物过程,通过该植物,种子出现在其延迟阶段。一些国家已经开发出来的萌发过程,作为减少与未经处理的谷物相关的一些缺点,例如不希望的味道和味道,以及胰蛋白酶抑制剂和植物的存在[3]。相关的最重要的生理过程发芽阶段是淀粉酶,蛋白酶和其他内源水解酶的合成[4]。烹饪通常被认为是提高谷物颗粒的质地,适应性和营养价值的手段,由于淀粉的凝胶化,蛋白质的变性,增加的养分可用性和热不稳定毒性化合物的灭活[5]。潜在有毒化学品,药物和环境污染物的解毒主要与适用和健康肝脏的功能有关[6]。 The hepatic gland performs a strategetic role in the digestive process by receiving the nutrients from the diet and orchestrating their transformation into useful biomolecules to be delivered to organs and tissues. Liver function tests are carried out to investigate hepatic integrity, and the synthetic, storage, transport, secretory, and other functions of this important organ. Measurement of aspartate transaminase (AST) and alanine transaminase (ALT) are two of the common tests. The serum activity presumably increases as a result of cellular membrane damage and leakage [7]. Histopathology is the study of microscopic changes or abnormalities in tissues that are caused as a result of diseases. Histology is the study of the microscopic anatomy (microanatomy) of cells and tissues of plant and animals. Histological staining is a series of technique processes undertaken in the preparation of sample tissues by staining using histological stains to aid in the microscope study [8]. Previous works on卡利亚显示,卡利亚种子富含蛋白质(17.5%)和脂肪(37.5%)。然而,最近的工作卡利亚种子与实验动物的死亡有关。这引起了人们对这些供人类食用的种子或其产品的安全性的严重关注。Ikujenlola之前的研究et al。[10]发现卡利亚种子含有一些内在的有害化合物,这些化合物在加工过程中没有被适当去除,因此有必要研究其他几种加工方法对安全性评估的影响在活的有机体内研究并可能建立了安全消费的最佳加工方法卡利亚种子及其产品作为食品和食品配料。因此,本研究的目的是研究卡利亚种子的各种热和生化处理和评估面粉使用生物学和组织病理学工具。
分散卡利亚豆荚采自观赏植物卡利亚Abafemi Awolowo大学的树木那Ile-Ife。从豆荚中提取坚果,并对其进行分类,以去除多余物质。果仁是通过手工剥去坚果壳获得的,然后将果仁清理干净,去除糠皮、破碎、枯萎和未成熟的果仁。所用试剂均为分析级,均来自美国Sigma Aldrich化学公司。
加工kariya面粉的生产
干卡利亚籽粒被分成8份,其中一份作为对照(即未加工的种子),接下来的5份分别进行不同的加工处理:沸腾(100°C, h),高压灭菌法(121°C, 15 psi, 30分钟),烤(100°C, h),发酵(28±2°C, 96 h)和组合的发芽(28±2°C, 96 h)和发酵(28±2°C, 96 h)和剩下的两个部分受到发芽(28±2°C, 96 h)治疗。五份加工过的种子被磨成面粉,每一份加工处理后的面粉被脱脂。然后将发芽的两份分成两份,第一份留作全面粉,第二份用冷丙酮萃取(1:5 w/v溶剂:面粉)去脂。
治疗饮食配方
根据Ikujenlola的方法,将玉米(维生素A玉米品种)与加工过的kariya面粉混合制成补充饲粮et al。[10,12]。表1显示了各种配方。表2显示了基础饮食的组成。
表1。治疗饮食配方
饮食 |
配方 |
RKD |
80%维生素A玉米+ 20%生的卡利亚面粉 |
DCKB |
80%维生素A玉米+ 20%熟卡利亚面粉 |
DGKD |
80%维生素A玉米+ 20%发芽卡利亚面粉 |
DRKD |
80%维生素A玉米+ 20%烘烤卡利亚面粉 |
DFKD |
80%维生素A玉米+ 20%发酵卡利亚面粉 |
DAKD |
80%维生素A玉米+ 20%高压灭菌卡利亚面粉 |
DGFKD. |
80%维生素A玉米+ 20%发芽-发酵卡利亚面粉 |
GKD |
80%维生素A玉米+ 20%发芽卡利亚面粉 |
BD. |
基底(非蛋白)饮食 |
CD |
商业饮食(控制) |
AF. |
动物饲料 |
rkd:原始卡利亚饮食;DCKD:脱脂熟kariya饮食;DGKD:脱脂发芽卡利亚饮食;DRKD:脱脂烤kariya饮食DFKD:脱脂发酵卡利亚饮食;DAKD:脱脂蒸压kariya饮食DGFKD:脱脂germinated-Fermented卡利亚饮食;GKD:发芽全麦粉卡利亚饮食;BD:基底的饮食;CD:商业饮食;AF.:动物饲料
表2。基础饲粮组成(g/kg)
组件 |
数量(g) |
蛋白质 |
0. |
玉米淀粉 |
800 |
糖 |
60 |
植物油 |
120 |
维生素混合 |
20. |
资料来源:Ikujenlola和Fashakin [13]
实验设计
采用Ikujenlola和Fashakin[13]方法。本研究选取55只成年成年wistar白化大鼠,雌雄体重各不相同。将其按性别分为3个不同的联合笼,在饲料颗粒和水条件下驯化7 d随意.将动物称重并分成11组,每组初始平均重量,它们分布到标记的个体代谢笼中。将1-8组喂食含有80%维生素A玉米和20%治疗的各种饮食卡利亚9组和10组分别饲喂阴性对照饲粮(基础饲粮)和阳性对照饲粮(商品饲粮),11组饲喂生长粉状饲料。提供了水随意饲料为期28天。在此期间,记录两天的重量测量,每天记录进料摄入量以测量增长率。
组织病理学研究
在28天后,大鼠在轻微的乙醚麻醉下麻醉,通过心脏穿刺进入普通瓶中收集血液样品。肝脏被切除,称重,右侧和中值裂片分开。右侧叶是冷藏的(4oC)在无菌容器中,叶中位用10%中性缓冲福尔马林固定48小时进行组织病理学研究。固定肝标本经石蜡包埋法处理,5µm厚切片,苏木精和伊红染色,Massons三色染色,周期性酸希夫(PAS)和Gordon and Sweets银染色,以评估其一般组织结构、胶原纤维、胶原蛋白纤维、胶原蛋白纤维和胶原蛋白纤维。分别是肝脏的糖原和网状纤维。染色切片在连接徕卡ICC 50高清数码相机的徕卡DM 750研究显微镜上观察,并在不同放大率下拍摄数码显微照片。
生化试验
血样凝固,3000 × g离心10分钟。血清标本分离,4℃冰箱保存。肝右叶也在磷酸盐缓冲盐水中进行均匀化(10% w/v)。匀浆在6000 x g离心15分钟,上清液分离保存于冰箱。采用标准方法,用酶比色分析试剂盒(Randox, Northern Ireland)分光光度法测定血清和肝脏匀浆中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)。
统计分析
所有测定均以三倍一次含量进行,并且使用SPS 20.0对于窗户进行5%的显着性的单向分析的单向分析。手段被Duncan的多个范围测试分开。
实验动物的采食量和生长速度
以商品饲粮(CD)和动物饲料(AF)作为对照饲喂(表3)的动物采食量(224.00 g)明显高于其他各组卡利亚基于饮食。观察到动物放置在卡利亚基于饮食记录了低进料摄入量,组中的进料摄入量有变化。对控制的高进料摄入和低进料摄入量卡利亚基础饲粮分别显示了饲粮的可接受性和适口性水平,并通过暗示饲粮对实验动物生命的支持/维持。这一观察证实了Jansman和Longstaff[14]的报道,即单宁的毒性作用可分为:抑制食物摄入量、抑制消化酶、增加内源性蛋白质的排泄。实验初期动物总平均体重为109.54±2 g,实验结束时总平均体重约为61.20 g ~ 149.76 g,与实验初期的总平均体重(109.54±2 g)存在正、负偏差。体重下降,从4th天与喂养的动物喂养试验实验饮食和基底饮食而逐渐增加体重观察在动物喂食商业饮食喂养试验和无关紧要的体重增加或减少动物美联储在动物饲料中可观察到的早期试验但随着饲养试验有进展,记录了显著的体重增加,但没有商业饲料组那么多。结果表明,商品日粮和动物饲料均对生长有促进作用,但与动物饲料相比,商品日粮喂养的动物体重更高。试验饲粮为加工后的饲料卡利亚籽粉和基础饲粮不支持生长,整个试验期间均有体重下降的记录。大多数情况下,增重或减重可以归因于动物的采食量,从表3和图1可以看出,增重或减重是采食量的函数。食用大量饲料的动物体重增加较多,而食用少量饲料的动物体重下降,这意味着食用少量饲料只能支持其代谢活动,而不能支持其身体生长。
图1所示。用配制的饮食和对照喂养的实验动物的生长速率
表3。在喂养试验期间饲料摄入实验动物
饲料摄入量 |
动物的饮食种类 |
RKD |
DCKD |
DGKD |
DRKD |
DFKD |
DAKD |
DGFKD. |
GKD |
BD. |
CD |
AF. |
总饲料 摄入/鼠/ 28天 |
70.71 |
120.20 |
141.41 |
123.57 |
129.79 |
90.42 |
122.03 |
114.89 |
156.40 |
224.00 |
224.00 |
意思是饲料 进气/老鼠 |
3.72 |
5.72 |
5.05 |
6.18 |
4.81 |
5.65 |
4.36 |
4.10 |
5.59 |
8.00 |
8.00 |
rkd:原始卡利亚饮食;DCKD:脱脂熟kariya饮食;DGKD脱脂萌发kariya饲料;DRKD:脱脂烤kariya饮食DFKD:脱脂发酵kariya饮食;DAKD:脱脂蒸压kariya饮食DGFKD:脱脂发芽发酵kariya饲料;GKD:发芽全粉kariya饮食;BD:基底的饮食;CD:商业饮食;AF.:动物饲料
根据以前的研究卡利亚通过炉边等.[15];Ogunsinaet al。[9];Adebayo等.[16]和Ikujenlola等.[10]的营养成分卡利亚粗蛋白质约为17.5-22.16 g/100 g,应足以满足实验动物的蛋白质需求,因此,可以认为处理饲料的适口性和固有的抗营养因素是正确的卡利亚种子可能负责低进料摄入量,导致体重增加的下降,这可能负责对在实验饮食中喂养的动物的高死亡率。此外,为基础饮食喂养的动物的生长速率下降可能归因于基础饮食中蛋白质的缺乏,这是增长下降的原因。Ikujenlola报道了类似的观察等.[10]为基础饮食。这与De Silva,[17]和Alais和Linden[18]的观察结果一致,即蛋白质是动物饮食中必不可少的部分,因为它们不能合成所有的氨基酸,它们必须从食物中获得这些必需的氨基酸。
试验动物在饲养试验期间的死亡率
实验动物在饲养试验期间的死亡率如图2所示。饲喂基础饲粮、商品饲粮和动物饲料组均无死亡记录。然而,在含有生食和加工食品的饮食组中,动物的死亡率有不同的百分比记录卡利亚.观察到,所有饲养动物的死亡率均≥20%卡利亚每周记录基础的饮食和平均死亡的死亡人数。喂食饮食Rakd,Dakd,Dckd和Drkd在喂养试验的(第三周和第四周)结束时死亡。Ikujenlola.et al。[10]报道所有的动物都用卡利亚混合精料在饲喂试验两周后死亡。然而,本研究记录了上述四组和其余四组(DGKD、DFKD、DGFKD和GKD)在实验期间的第3和第4周死亡率为100%卡利亚试验结束前均有存活者,死亡率分别为80、80、40和80%。这一结果表明,加工处理改善了安全状况卡利亚萌发和发酵治疗的膳食和结合表现出更有前景的前景,如果剂量和治疗良好协调,卡利亚基础饮食对消费者来说更安全。
图2。实验期间的死亡率
关键:RKD:未加工的kariya饮食;DCKD:脱脂熟kariya饮食;DGKD:脱脂发芽卡利亚饮食,DRKD:脱脂烤鲫鱼食谱,DFKD:脱脂发酵卡利亚饮食,DAKD:脱脂蒸压kariya饮食,DGFKD:脱脂germinated-Fermented卡利亚饮食,GKD:发芽全麦粉卡利亚饮食,BD:基础饮食,CD:商业饮食,AF.:动物饲料
实验动物肝功能检查
以谷丙转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)为酶标的肝功能生化指标:血清ALT、AST正常范围为10-55 UL-1和10-40 ul-1分别测定肝脏轻度、中度、重度损害程度为1-3倍、3-20倍、>20倍或1000 UL-1ALT和AST正常水平[19]。使用这种生化指标在这项研究中,考虑到值记录在表4显示血清和肝脏AST和ALT水平后实验动物的饲养试验,这是观察到动物的肝脏- ALT和AST水平在所有饮食组远高于血清转氨酶和AST水平。根据Thapa和Walia[19],这一趋势在正常情况下是可以预期的,除非有肝损伤,此外,除了慢性肝损伤,ALT水平通常比AST水平更频繁地增加,这与所有处理的记录值一致卡利亚除DGKD饲粮外,其余各组小鼠肝脏AST水平均高于ALT水平。这意味着细胞质膜受到了损伤,这表明这种饮食可能不安全。
表4。肝脏肝脏和患有治疗的Wistar白化大鼠的肝脏和Alt水平(U / L)卡利亚种子粉粉
样本 |
天冬氨酸转氨酶(AST) (U / L) |
丙氨酸转氨酶(ALT)(U / L) |
肝 |
血清 |
肝 |
血清 |
DGKD |
326.44±30.35一个 |
79.85±11.36一个 |
251.41±8.6一个 |
67.14±13.33b |
DFKD |
102.09±14.83e |
43.60±5.67公元前 |
223.38±6.57公元前 |
36.70±11.61c |
DGFKD. |
165.68±18.52d |
55.13±13.52b |
217.10±14.15c |
71.03±13.75.一个 |
GKD |
195.27±8.00公元前 |
14.77±0.83d |
217.49±6.67c |
53.04±3.70.公元前 |
BD. |
245.10±19.00b |
54.23±6.15b |
259.26±5.73一个 |
57.11±3.19ab |
CD |
167.15±15.56d |
13.15±1.60直流 |
254.97±3.91.一个 |
55.03±0.35ab |
AF. |
213.76±5.16c |
31.82±6.33.c |
234.61±2.24b |
49.68±8.80公元前 |
组下不同上标值差异显著(P < 0.05)
DGKD:脱脂熟kariya饮食;DFKD:脱脂发酵kariya饮食;DGFKD.:脱脂发芽发酵kariya饲料;GKD发芽全粉kariya日粮;BD.:基础饮食;CD:商业饮食;AF.:动物饲料
从这项研究中,动物的血清中酶活性与饮食DGKD美联储,DGFKD和BD高于正常范围的ALT和AST水平却在轻微的肝损害,因为他们的活动水平之间正常的ALT和AST水平的1 - 3倍。与对照组相比,饲料组血清酶活性显著升高(p<0.05),表明饲料组动物器官质膜细胞受损。此外,Ashafa等.[20]报道ALT被认为是肝脏炎症更特异的指标,因为高AST可能是由心脏、肌肉等其他器官的其他疾病引起的。根据生化指标观察,DGKD和DGFKD饲粮的动物血清ALT水平范围异常,损伤程度较轻,而DFKD、GKD、BD、CD和AF饲粮的动物血清ALT水平均在正常范围内。
AST: ALT比值对实验动物肝损伤的影响:表5显示了实验动物肝损伤程度的AST: ALT比值。AST: ALT比值提供了有关肝脏疾病[21]的病因和严重程度的有用的临床信息。当AST: ALT≥2时,表明肝脏有慢性损伤,而AST: ALT≥1则表明急性肝炎/肝损伤。利用该生化指标,本研究观察到饲料中DGKD和DFKD的动物AST: ALT≥1,提示急性肝炎或肝损伤,可能随时间[19]愈合。
表5所示。实验大鼠血清AST: ALT比值显示肝损伤严重程度
样本 |
血清AST |
血清ALT |
AST: ALT |
DGKD |
79.85 |
67.14 |
1.19 |
DFKD |
43.6 |
36.7 |
1.19 |
DGFKD. |
55.13 |
71.03 |
0.78 |
GKD |
14.77 |
53.03 |
0.28 |
BD. |
5.23 |
57.11 |
0.09 |
CD |
13.15 |
55.03 |
0.20 |
AF. |
31.82 |
49.68 |
0.64 |
DGKD:脱脂煮熟卡利亚饮食;DFKD:脱脂发酵卡利亚饮食;DGFKD.:脱脂发酵的脱脂卡利亚饮食;GKD:发芽的整个面粉卡利亚饮食;BD.:基础饮食;CD:商业饮食;AF.:动物饲料
实验动物的器官到体重比
表6显示了器官与体重的比例。器官与体重比的改变可能是器官损害的结果。评估的平均器官/体重比与对照组无显著差异(P>0.05),即与对照组相比,试验大鼠的器官/体重比没有显著影响。这说明在本研究中,以肝重比作为生化指标并不能反映肝脏的状况,而组织病理学的研究能更清楚地反映肝脏的状况。
表6所示。实验动物的器官与体重之比
样本 |
体重(g) |
肝脏大小(g) |
肝脏:体重 |
DGKD |
79.20±0.00c |
2.9±0.00c |
0.036 |
DFKD |
75.80±0.00c |
2.3±0.00德 |
0.030 |
DGFKD. |
73.60±5.20c |
2.57±0.25cd |
0.034 |
GKD |
61.20±0.00d |
2.10±0.00e |
0.034 |
BD. |
62.43±0.97d |
2.2±0.20德 |
0.035 |
CD |
137.30±6.97一个 |
4.47±0.41一个 |
0.032 |
AF. |
111.37±3.00b |
3.43±0.30b |
0.030 |
在P <0.05下,组的不同上标的价值观显着显着
DGKD:脱脂煮熟卡利亚饮食;DFKD:脱脂发酵卡利亚饮食;DGFKD.:脱脂发酵的脱脂卡利亚饮食;GKD:发芽的整个面粉卡利亚饮食;BD.:基础饮食;CD:商业饮食;AF.:动物饲料
实验动物肝切片的组织病理学检查
实验动物肝组织的肝细胞坏死、脂肪堆积、组织纤维化等组织学改变证实了上述生化结果。
苏木精-伊红染色:实验大鼠肝脏切片组织学检查的显微照片卡利亚血红素和伊红(H&E)染色显示在图3中。肝细胞以肝细胞(H)的片状排列在中心静脉(CV)周围,门静脉区由门静脉(PV)、肝动脉(HA)、胆管(BD)和窦状(箭头)组成。A、B组肝细胞部分变性,C、D、E组肝细胞正常。
图3。显示用苏木精和曙红染色染色的实验大鼠(A-F)的肝脏切片。注释肝细胞(H)的板位于它们之间的中央静脉(CV)周围的肝细胞(H)。还观察到门静脉(PV),肝动脉(HA)和胆管(BD)。比例尺= 50µm。一种:脱脂发芽卡利亚饮食,B.:脱脂发酵卡利亚饮食,C:脱脂发酵的脱脂卡利亚饮食,D.:发芽的整个面粉卡利亚饮食,E.:基底的饮食,F:商业饮食(对照)
用脱脂饲料喂养的动物发芽卡利亚饮食和脱脂发酵卡利亚A、B组均有部分肝细胞变性(肝坏死),而C、D、E、F组均为正常肝板(肝窦小体间箭头所示),即正常小叶结构。观察到的肝组织坏死,可能是由于实验动物在解毒过程中过度清除体内毒物的活动所致。Hussien[23]也报道了类似的观察结果甘草无毛喂给实验动物。然而,Patel和Bahadur[24]提示肝脏不能再生新细胞可能导致坏死。
马森毛状体染色:实验大鼠肝脏切片组织学检查的显微照片卡利亚Masson Trichome染色组和对照组如图4所示。中心静脉、门脉周围可见胶原沉积(绿色区域),肝细胞周围可见细胞间基质。D组实验大鼠肝脏胶原蛋白过度表达,表现为未脱脂萌发动物肝脏胶原蛋白过度表达卡利亚在A、B、C、E和f组的显微照片上观察到饮食和轻度胶原沉积。Masson Trichome染色显示胶原沉积,呈蓝绿色,显示富含胶原的纤维化区域,有助于显示组织的纤维化程度。在显微镜下观察到未脱脂萌发剂喂养的实验动物胶原蛋白的过度表达卡利亚饮食可能是由于钾的有害成分的影响亚太亚种子对肝脏脂质代谢的影响,这在样品D中很明显,因为他们的饮食中含有不同于其他食物的高脂肪含量卡利亚A组,B组和C组的饲料样品是脱脂的样品。这可能是由于脂肪酶活性的降低导致甘油水解[25]的降低。然而,Havel[26]提示其可能是肝实质细胞受损导致肝脏脂质代谢紊乱所致。穆勒等.[27]和Althnaian等.[28]报道了四氯化碳(CCL4.)中毒类似于肝炎的甘油三酯分解代谢。
图4.显微照片显示实验大鼠肝脏切片(A- F)经马尾松三色染色。比例尺= 50µm。一种:脱脂发芽卡利亚饮食;B:脱脂发酵卡利亚饮食;C:脱脂发酵的脱脂卡利亚饮食;D.:发芽的整个面粉卡利亚饮食;E.:基础饮食;F:商业饮食(对照)。
周期性酸-希夫(PAS)染色加工喂养实验大鼠肝脏肝脏肝脏组织学检查的显微照片卡利亚经周期性酸-希夫(PAS)染色的对照组和饲料组如图5所示。PAS染色突出显示了在所有组实验动物的显微照片的所有切片糖原。根据Diaz-Munoz等.[29],糖原染色强度在任意喂养组基本保持不变,这与本研究实验动物肝脏切片PAS染色记录的观察结果一致。PAS染色主要用于对含糖原、糖蛋白、蛋白多糖等碳水化合物较多的结构进行染色,这些结构通常存在于结缔组织、黏液和基底膜中。它常用于肾活组织检查、肝活组织检查、横纹肌中某些糖原储存疾病和怀疑的真菌感染的染色。PAS染色在识别糖原和揭示糖原储存障碍方面是有用的。
图5。显示用碘酸 - 席夫(PAS)染色染色的实验大鼠肝脏肝切片的显微照片。比例尺= 50µm。一种:脱脂发芽卡利亚饮食;B.:脱脂发酵卡利亚饮食;C:脱脂发酵的脱脂卡利亚饮食;D.:发芽的整个面粉卡利亚饮食;E.:基础饮食;F:商业饮食(对照)
戈登和糖果的污点:实验大鼠肝切片组织学检查的显微照片卡利亚diets and controls which were stained with Godon and sweets’ stain are shown in Figure 6. Reticular fibres are present in areas stained black, they are well demonstrated across all groups except group A. Godon and sweets’ stain highlighted reticular fibres which are well demonstrated across all the groups, they were seen to be well preserved with distinct inter-hepatic and arterial wall distributions in the liver section as revealed on the micrographs except group A, which were fed with defatted germinated卡利亚饮食。网状纤维支撑着肝脏、脾脏和肾脏等身体器官。网状纤维异常提示肝硬化或肝坏死,也可能提示存在某些肿瘤。A组显示网状纤维受压和塌陷的区域,这分别对应于网状纤维变性和细胞丢失的区域。网状纤维作为薄壁组织的支持物,网状纤维染色提供有关器官结构的信息。当肝细胞受损并发生坏死时,其周围的网状纤维在空腔内塌陷。网状蛋白聚集区域表明肝细胞的局灶性损失[30]。大面积细胞坏死表现为网状塌陷,这表明纤维的硬度和机械强度功能降低。
图6。显微照片显示实验大鼠肝脏切片(A- F)经Godon和Sweets银染色。比例尺= 50µm。一种:脱脂发芽卡利亚饮食;B.:脱脂发酵卡利亚饮食;C:脱脂发酵的脱脂卡利亚饮食;D.:发芽的整个面粉卡利亚饮食;E.:基础饮食;F:商业饮食(对照)
总体的组织学检查给人的印象是A(脱脂的)样品发芽了卡利亚饮食),B(脱乳膏发酵卡利亚D(发芽全麦粉)卡利亚而C样品(脱脂发芽发酵)则会引起肝变性卡利亚E(基础饲粮)和F(商品饲粮(对照))在不同染色的显微照片上均无肝变性的迹象,因此安全性较好。
评估的结果卡利亚种子面粉经过一系列的加工处理(热处理和生化处理)后,显示出解毒的重要性卡利亚54、种子确保安全。该研究得出结论,热处理(高压灭菌,蒸煮和焙烧)的影响卡利亚种子不足以排毒,以防止实验动物中的死亡率,而生物化学过程(萌发和发酵)的组合记录了更好的安全状况。肝脏退化也降低了喂养的大鼠卡利亚用生化过程治疗的种子。
- Cheftel JC(1995)评论:高压,微生物灭活和食品保存。国际食品科学技术杂志1: 75 - 90。
- 粮食及农业组织(粮农组织)(1995)人类营养中的高粱和小米。联合国粮食及农业组织,意大利,罗马。
- (in chinese)种子萌发对大豆营养品质的影响菜豆和Cajanus毛竹。科学技术杂志40: 116 - 120。
- 谷物科学与技术原理。第二版圣保罗:美国谷物化学协会。
- (in chinese)种子萌发期和水热处理对番茄幼苗生长的影响在体外发芽豆科植物的蛋白质和淀粉消化率。食品科学与技术杂志49: 184 - 191。
- Bechmann LP, Hannivoort RA, Gerken G, Hotamisligil GS, Trauner M, et al.(2012)肝脂糖代谢在肝脏疾病中的相互作用。肝脏病学杂志56: 952 - 964。
- 卡普兰MM(1993)实验室测试。在:希夫L,希夫ER,编辑。《肝脏疾病》第七版,费城,JB Lippincott。
- Anderson J(2011)常规和特殊染色介绍。2014年8月18日从http://www.leicabiosystems.com/pathologyleaders/an-introduction-to-routine-and-special-staining.
- Ogunsina BS,Olaoye IO,Adegbenjo Ao,Babawale BD(2011)营养和物理性质卡利亚种子(Hidergardia bateri).国际农业物理学25日:97 - 100。
- IKUJENLOLA AV,Ahmida AF,GBadamosi OS(2017)营养质量和安全评估来自生产的互补食品据(三叶草exilis)面粉和卡利亚(HILLEGARDIA BARTERI.)浓缩蛋白混合物。食品化学与纳米技术杂志3:能力。
- 联合国蛋白质咨询小组(1971)。准则八号。蛋白质丰富的混合物,用于断奶食品。纽约:联合国粮食及农业组织/世界卫生组织/联合国儿童基金会,第1-7页。
- 粮农组织/卫生组织(1991年)蛋白质质量评价。粮农组织/世卫组织联合专家磋商报告。
- Ikujenlola AV, Fashakin JB(2005)植物蛋白补充膳食的生物测定评估。食品、农业和环境杂志3: 20 - 22。
- (1)豆科植物种子中单宁和鹿茸的营养作用。在:第二届豆科植物种子抗营养因子国际研讨会论文集。豆科植物种子抗营养因子的研究进展。A.F.B. Van der Poel, J. Huisman, H.S. Saini)。EAAP出版社,瓦赫宁根,荷兰,pp: 301-316。
- Inglett GE, Cavins JF, Spencer GF (1973Hildergardia barteri。经济植物学杂志》27日:128 - 130。
- abdebayo WA, Ogunsina BS, Gbadamosi SO (2013卡利亚(Hildegardia baterii)内核面粉。IFE科学杂志15: 477 - 486。
- De Silva SS, Shim KF, Khim OA(1990)在鱼的消化率研究中对膳食成分消化率估算方法的评价,以及对外部和内部标记物和粪便收集时间的比较Oreochomis金黄色葡萄球菌(steindachner)。生殖、营养与发育杂志30: 215 - 226。
- Alais C, Linden G(1997)食品生物化学。口头的。出版公司,盖瑟斯伯里,马里兰州,1999,页119-129。
- (2007)肝功能检查及其解释。印度儿科杂志74: 663 - 671。
- Ashafa AOT, Yakubu MT, Grierson DS, Afolayan AJ (2009) Felicia (Muricuta thumb)叶水提物对wistar大鼠的毒理学评价。非洲生物技术杂志8:949-954。
- Nsiah K, Dzogbefia VP, Ansong D, Osei AA, Boateng H, et al.(2011)镰状细胞病中AST和ALT变化与溶血的关系。临床医学见解:血液疾病4:1-9。
- Busari MB,Muhammad HL,Ogbadoyi EO,Kabiru Ay,Sani S等人。(2015)在活的有机体内籽油抗糖尿病性能评价辣木果冻.国际应用生命与科学杂志2: 160 - 174。
- Hussein E(2013)不同浓度黄耆水提物对大鼠肝脏的生化和组织病理学研究甘草无毛.全球兽医杂志10:491-495。
- 铜离子亚致死毒性的组织病理学表现Catla Catla.美国-欧亚毒理学杂志4: 1 - 5。
- Jahn Ce,Schaegfetr EJ,Taam La(1985)原发性胆汁肝硬化与肝脂肪酶抑制的脂蛋白异常以及胆固醇酯化的改变。胃肠病学杂志》上89:1266-1278。
- Havel RJ(1986)肝脏脂蛋白受体的功能活性。运动生理学年鉴48: 119 - 134。
- Muller P, Fellin R, Lambreacht J(1974)肝病继发高甘油三酯血症。欧洲临床调查杂志4: 419 - 428。
- Althnaian T, Albokhadaim I, El-Bahr SM(2013)对四氯化碳中毒和骆驼奶处理大鼠的生化和组织病理学研究。施普林格+杂志2:57。
- Díaz-Muñoz M, Vázquez-Martínez O, Aguilar-Roblero R, Escobar C(2000)限食大鼠肝脏代谢和胰岛素、胰高血糖素和皮质酮携带的预期变化。美国生理学杂志279:2048-2056。
- Saxena RM(2010)肝脏活组织检查解释的特殊污渍。连接杂志1:92-103。
- Muhammed AO, Adeyemo IA, Olutunde OA, Afodun MA, Ajayi AS(2016)肉鸡肝脏和肾脏中胶原蛋白和网状蛋白纤维的安全性黑曲霉- 水解木薯果皮作为碳水化合物来源。医学检验与诊断杂志7: 5 - 12。
编辑信息
主编
Renee Dufault.
食品成分与健康研究所
文章类型
研究文章
出版的历史
收稿日期:2020年8月09日
录用日期:2020年9月4日
发布日期:2020年9月7日
版权
©2020 Ikujenlola AV。这是一篇开放获取的文章,在知识共享署名许可的条款下发布,该条款允许在任何媒体上无限制地使用、发布和复制,前提是注明原作者和来源。
引用
IKUJENLOLA AV,Aluko OE,GBadamosi So,Adeyemi Do(2020)生物化学和热加工Kariya种子的生物和组织病理学特征。Intent Food Nutr Metab 7:DOI:10.15761 / IFNM.1000290
图1所示。用配制的饮食和对照喂养的实验动物的生长速率
图2。实验期间的死亡率
关键:RKD:未加工的kariya饮食;DCKD:脱脂熟kariya饮食;DGKD:脱脂发芽卡利亚饮食,DRKD:脱脂烤鲫鱼食谱,DFKD:脱脂发酵卡利亚饮食,DAKD:脱脂蒸压kariya饮食,DGFKD:脱脂germinated-Fermented卡利亚饮食,GKD:发芽全麦粉卡利亚饮食,BD:基础饮食,CD:商业饮食,AF.:动物饲料
图3。显示用苏木精和曙红染色染色的实验大鼠(A-F)的肝脏切片。注释肝细胞(H)的板位于它们之间的中央静脉(CV)周围的肝细胞(H)。还观察到门静脉(PV),肝动脉(HA)和胆管(BD)。比例尺= 50µm。一种:脱脂发芽卡利亚饮食,B.:脱脂发酵卡利亚饮食,C:脱脂发酵的脱脂卡利亚饮食,D.:发芽的整个面粉卡利亚饮食,E.:基底的饮食,F:商业饮食(对照)
图4.显微照片显示实验大鼠肝脏切片(A- F)经马尾松三色染色。比例尺= 50µm。一种:脱脂发芽卡利亚饮食;B:脱脂发酵卡利亚饮食;C:脱脂发酵的脱脂卡利亚饮食;D.:发芽的整个面粉卡利亚饮食;E.:基础饮食;F:商业饮食(对照)。
图5。显示用碘酸 - 席夫(PAS)染色染色的实验大鼠肝脏肝切片的显微照片。比例尺= 50µm。一种:脱脂发芽卡利亚饮食;B.:脱脂发酵卡利亚饮食;C:脱脂发酵的脱脂卡利亚饮食;D.:发芽的整个面粉卡利亚饮食;E.:基础饮食;F:商业饮食(对照)
图6。显微照片显示实验大鼠肝脏切片(A- F)经Godon和Sweets银染色。比例尺= 50µm。一种:脱脂发芽卡利亚饮食;B.:脱脂发酵卡利亚饮食;C:脱脂发酵的脱脂卡利亚饮食;D.:发芽的整个面粉卡利亚饮食;E.:基础饮食;F:商业饮食(对照)
表1。治疗饮食配方
饮食 |
配方 |
RKD |
80%维生素A玉米+ 20%生的卡利亚面粉 |
DCKB |
80%维生素A玉米+ 20%熟卡利亚面粉 |
DGKD |
80%维生素A玉米+ 20%发芽卡利亚面粉 |
DRKD |
80%维生素A玉米+ 20%烘烤卡利亚面粉 |
DFKD |
80%维生素A玉米+ 20%发酵卡利亚面粉 |
DAKD |
80%维生素A玉米+ 20%高压灭菌卡利亚面粉 |
DGFKD. |
80%维生素A玉米+ 20%发芽-发酵卡利亚面粉 |
GKD |
80%维生素A玉米+ 20%发芽卡利亚面粉 |
BD. |
基底(非蛋白)饮食 |
CD |
商业饮食(控制) |
AF. |
动物饲料 |
rkd:原始卡利亚饮食;DCKD:脱脂熟kariya饮食;DGKD:脱脂发芽卡利亚饮食;DRKD:脱脂烤kariya饮食DFKD:脱脂发酵卡利亚饮食;DAKD:脱脂蒸压kariya饮食DGFKD:脱脂germinated-Fermented卡利亚饮食;GKD:发芽全麦粉卡利亚饮食;BD:基底的饮食;CD:商业饮食;AF.:动物饲料
表2。基础饲粮组成(g/kg)
组件 |
数量(g) |
蛋白质 |
0. |
玉米淀粉 |
800 |
糖 |
60 |
植物油 |
120 |
维生素混合 |
20. |
资料来源:Ikujenlola和Fashakin [13]
表3。在喂养试验期间饲料摄入实验动物
饲料摄入量 |
动物的饮食种类 |
RKD |
DCKD |
DGKD |
DRKD |
DFKD |
DAKD |
DGFKD. |
GKD |
BD. |
CD |
AF. |
总饲料 摄入/鼠/ 28天 |
70.71 |
120.20 |
141.41 |
123.57 |
129.79 |
90.42 |
122.03 |
114.89 |
156.40 |
224.00 |
224.00 |
意思是饲料 进气/老鼠 |
3.72 |
5.72 |
5.05 |
6.18 |
4.81 |
5.65 |
4.36 |
4.10 |
5.59 |
8.00 |
8.00 |
rkd:原始卡利亚饮食;DCKD:脱脂熟kariya饮食;DGKD脱脂萌发kariya饲料;DRKD:脱脂烤kariya饮食DFKD:脱脂发酵kariya饮食;DAKD:脱脂蒸压kariya饮食DGFKD:脱脂发芽发酵kariya饲料;GKD:发芽全粉kariya饮食;BD:基底的饮食;CD:商业饮食;AF.:动物饲料
表4。肝脏肝脏和患有治疗的Wistar白化大鼠的肝脏和Alt水平(U / L)卡利亚种子粉粉
样本 |
天冬氨酸转氨酶(AST) (U / L) |
丙氨酸转氨酶(ALT)(U / L) |
肝 |
血清 |
肝 |
血清 |
DGKD |
326.44±30.35一个 |
79.85±11.36一个 |
251.41±8.6一个 |
67.14±13.33b |
DFKD |
102.09±14.83e |
43.60±5.67公元前 |
223.38±6.57公元前 |
36.70±11.61c |
DGFKD. |
165.68±18.52d |
55.13±13.52b |
217.10±14.15c |
71.03±13.75.一个 |
GKD |
195.27±8.00公元前 |
14.77±0.83d |
217.49±6.67c |
53.04±3.70.公元前 |
BD. |
245.10±19.00b |
54.23±6.15b |
259.26±5.73一个 |
57.11±3.19ab |
CD |
167.15±15.56d |
13.15±1.60直流 |
254.97±3.91.一个 |
55.03±0.35ab |
AF. |
213.76±5.16c |
31.82±6.33.c |
234.61±2.24b |
49.68±8.80公元前 |
组下不同上标值差异显著(P < 0.05)
DGKD:脱脂熟kariya饮食;DFKD:脱脂发酵kariya饮食;DGFKD.:脱脂发芽发酵kariya饲料;GKD发芽全粉kariya日粮;BD.:基础饮食;CD:商业饮食;AF.:动物饲料
表5所示。实验大鼠血清AST: ALT比值显示肝损伤严重程度
样本 |
血清AST |
血清ALT |
AST: ALT |
DGKD |
79.85 |
67.14 |
1.19 |
DFKD |
43.6 |
36.7 |
1.19 |
DGFKD. |
55.13 |
71.03 |
0.78 |
GKD |
14.77 |
53.03 |
0.28 |
BD. |
5.23 |
57.11 |
0.09 |
CD |
13.15 |
55.03 |
0.20 |
AF. |
31.82 |
49.68 |
0.64 |
DGKD:脱脂煮熟卡利亚饮食;DFKD:脱脂发酵卡利亚饮食;DGFKD.:脱脂发酵的脱脂卡利亚饮食;GKD:发芽的整个面粉卡利亚饮食;BD.:基础饮食;CD:商业饮食;AF.:动物饲料
表6所示。实验动物的器官与体重之比
样本 |
体重(g) |
肝脏大小(g) |
肝脏:体重 |
DGKD |
79.20±0.00c |
2.9±0.00c |
0.036 |
DFKD |
75.80±0.00c |
2.3±0.00德 |
0.030 |
DGFKD. |
73.60±5.20c |
2.57±0.25cd |
0.034 |
GKD |
61.20±0.00d |
2.10±0.00e |
0.034 |
BD. |
62.43±0.97d |
2.2±0.20德 |
0.035 |
CD |
137.30±6.97一个 |
4.47±0.41一个 |
0.032 |
AF. |
111.37±3.00b |
3.43±0.30b |
0.030 |
在P <0.05下,组的不同上标的价值观显着显着
DGKD:脱脂煮熟卡利亚饮食;DFKD:脱脂发酵卡利亚饮食;DGFKD.:脱脂发酵的脱脂卡利亚饮食;GKD:发芽的整个面粉卡利亚饮食;BD.:基础饮食;CD:商业饮食;AF.:动物饲料