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摘要

乙醇和冷水提取物的抑菌作用Cymbopogon citratus，Chromolaena odorata,Newbouldia光滑的测定在体外得到的微生物致病菌为Botryodiplodia theobromae，黑曲霉，腐皮镰孢霉菌，青霉菌属和根霉stolonifer．分别加入10 g、20 g、30 g、40 g和50 g的叶粉，制备植物乙醇和冷水提取物Cymbopogon citratus，Chromolaena odorata而且Newbouldia光滑的分别倒入100毫升乙醇和冷水中。不同浓度的植物提取物均表现出抗真菌活性。植物提取物的抑菌效果随提取溶剂、提取浓度和被试生物的不同而不同。乙醇提取物Cymbopogon citratus对所有真菌的菌丝生长均有轻微抑制(11.10-18.00%)和中度有效抑制(29.65-46.00%)。此外，冷水提取物Cymbopogon citratus对所有真菌均有轻微抑制(4.00-19.92%)和中度有效抑制(37.7-39.00%)。乙醇提取物Chromolaena odorata对所有真菌病原菌均有轻度(11.18 ~ 15.03%)和中度(29.65 ~ 41.00%)有效。此外，冷水提取物Chromolaena odorata表现为轻度至中度有效抑制，抑制率分别为(8.00-19.05%)至(21.00-39.00%)。乙醇提取物Newbouldia光滑的对所有真菌均表现为轻度抑制(0.35 ~ 19.10%)和中度抑制(22.90 ~ 49.11%)。冷水提取物Newbouldia光滑的抑菌效果为(3.40 ~ 19.00%)~(22.00 ~ 44.01%)。在所有提取物中，50%乙醇提取物的抑菌作用最强Newbouldia光滑的对试验真菌病原菌均有显著抑制作用(P<0.05)。乙醇植物提取物表现出较高的抗真菌活性

测试病原体比冷水植物提取物多。采用方差分析(ANOVA)和邓肯多极差检验(DMRT)检验各处理间的差异。植物化学筛选表明，提取物中存在皂苷、生物碱、单宁和黄酮类化合物，但浓度不同。这项研究表明Cymbopogon citratus，Chromolaena odorata而且Newbouldia光滑的能抑制水山药变质的腐生真菌。这些提取物对水山药的抑菌作用较便宜、环保、易制备，可作为人工合成杀菌剂的替代品。

关键字

效果，叶提取物，香茅，臭草，新竹，山药

简介

山药(Dioscorea spp.)是山药科单子叶植物，一年生草本攀缘植物，地下块茎[1]可食。它是西非最重要的粮食作物[2,3]，也是东非、加勒比海、南美洲、印度和东南亚等其他热带国家的重要食物来源[2,3]。Okigbo[3]估计，世界每年的山药产量约为2000万吨。世界山药产量的大部分(超过90%)来自西非[2,3]，仅尼日利亚就生产了世界山药总产量的四分之三[3,4]。

在尼日利亚种植的10种山药中，最重要的6种是:薯蓣属rotundata白山药，薯蓣属alataL.(山药)，薯蓣属cayenensis林。(黄色山药),薯蓣属dumetorum(肯)Pax。(山药或苦山药)，黄药L.(空中山药)和薯蓣属耐(Loir)山药树皮[5,6]。

水山药(薯蓣属alata)是最具经济价值的山药品种，是热带和亚热带国家数百万人的主食[2,7]。薯蓣属alata是一种有潜力增加消费者需求的作物，因为它的低糖含量是糖尿病患者所必需的[8]。

据斯科特说et al。、水山药(薯蓣属alataL.)是分布最广的山药品种，但总产量不及白山药。水山药(d . alataL.)广泛生长于世界热带和亚热带地区。它们是块茎植物，淀粉含量占干物质的70% - 80%[9,10]。

根据Sangoyomi[11]的说法，块茎是这种作物唯一重要的经济成分，它可以烤、炸、煮、捣碎或制成面粉，用热水重新制成。山药块茎的价值非常高，在食物中，它是碳水化合物、钙、磷、铁和维生素B和C的主要来源[2,12]。根据Olayide和Heady[13]的说法，尼日利亚对山药的需求一直超过供应。

尽管山药作为主要主食的重要性及其在西非和中非次区域人民生活中的社会文化价值，但关于这种重要主食作物的研究和文献资料非常有限[11]。

在长时间的储存过程中，会发生相当大的损失。在山药仓中，头三个月可观察到10-20%的损失，六个月后可观察到30-60%的损失[2,14,15]。贮藏损失的原因是腐烂、虫害和发芽。然而，腐烂造成的损失最大，这主要是由于真菌、细菌和线虫的影响。真菌是最重要的，据报道，在西印度群岛，80%的山药块茎贮藏腐烂是由真菌造成的，在尼日利亚，这一比例为57-77%[16]。

与山药有关的主要微生物包括:Botryodiplodia theobromae帕特。尖孢镰刀菌Schlecht,青霉菌oxalicumCurrie和Thom。黑曲霉Van Tiegh和曲霉属真菌酱油基塔(5、17 - 19)。在25 ~ 39℃的相对湿度和温度条件下[5]，部分微生物在较高的温度(35℃)下表现出较强的腐烂力。山药腐烂通常在土壤中开始，并在储存中发展，当受感染的块茎还没有任何外部症状的迹象[12]时发生。

药用植物(包括本土和外来植物)的广泛使用可以追溯到植物中具有药用特性的天然产物的出现及其合成多种化合物的能力[20-23]。化学品的使用有助于控制腐烂，但由于可识别的问题，包括:生物降解、污染、化学残留物、植物毒性、高成本、目标生物体耐药性的发展，有时不可用，然后对人类和环境有害，使它们要么适应缓慢，要么农民由于某种文化原因完全未能采用它们[24,25]。近年来，人们在探索植物提取物作为合成化学品替代品的潜力方面作出了相当大的努力。这些植物提取物容易获得，价格便宜，无植物毒性，可生物降解，因此对人类和环境友好[26-28]。

柠檬草(Cymbopogon citratus直流。Poaceae, Ex Nees) Stapf科，是一种多年生草本植物，广泛分布于世界各地，尤其是热带和亚热带国家[29]。一些报告将其起源与亚洲(印度支那、印度尼西亚和马来西亚)、非洲和美洲联系起来。这种植物可以长到6英寸高，其球茎状茎由圆柱状和无毛线性脉状鞘状叶组成，基部窄，先端尖。叶高长约10℃m，宽约2 cm。经过挤压，叶子通常会产生黄色或琥珀色的芳香精油[30]。

柠檬草在民间医药中也有广泛的应用。传统上，由柠檬草叶子制成的茶在南美、亚洲和西非国家很受欢迎，被广泛用于杀菌、退热、抗消化不良、驱邪和抗炎作用。其他有退热、镇痛、解痉、解热、利尿、镇定剂和胃药[30,32-35]。

Chromolaena odorata(l)r。m。金和罗宾逊的前身主要(暹罗草)，属菊科，多年生草本植物，高约1.5-2.0 m，形成浓密的缠结灌木，具有特有的芳香气味[36]。它被认为是世界上许多热带和亚热带地区的重大经济和生态负担，对农业、生物多样性和生计产生负面影响[37,38]。

随着它在20世纪30年代被引入西非，在40年代被引入南非，该物种已经传播到非洲大陆的许多国家。

的药用Chromolaena odorata也没有被忽视。黄芪叶提取物的收敛性研究Chromolaena odorata在血管上[42]使它成为一种预防伤口失血的流行植物，它的抗菌特性也使它成为消毒和治疗开放性伤口[43]的流行选择。研究了黄芪水提物的8种驱虫性能c . odorata在亚洲和非洲的农民中也广为人知。它作为一种有效治疗腹泻、疟疾热、牙痛、糖尿病、皮肤病、痢疾和结肠炎的流行已分别被记录[43,44]。

Newbouldia光滑的(P. Beauv.)科，Bignoniaceae，通常被称为非洲边界树或边界树，在豪萨语中被称为“Aduruku”，在伊博语中被称为“Ogirisi”，在尼日利亚北部、东部和西部的约鲁巴语中分别被称为“Akoko”。

该植物在各种非洲热带目录中具有许多药用价值。从植物不同部位(叶、茎、树皮和根)提取的提取物已被证明具有抗菌、抗疟疾、抗氧化、伤害和抗炎特性[45,46]。水提取物和乙醇提取物均有子宫收缩作用[47]。

植物提取物已用于防治山药病害[12]。寻找一种经济、耐用和环保的方法来控制山药变质是很重要的。

本研究研究了黄芪叶提取物的抗真菌性能Cymbopogon citratus，Chromolaena odorata而且Newbouldia光滑的针对一些导致水山药变质的腐败真菌。

材料与方法

材料来源

水山药(薯蓣属alataL.)采自Umudike国家根茎作物研究所山药仓，有收后腐烂症状。新鲜健康的水山药采集自同一谷仓。根据先前的生物活性，叶Cymbopogon citratus，Chromolaena odorata而且Newbouldia光滑的被使用。Cymbopogon citratus而且Newbouldia光滑的分别采自Awka的Okpuno和Umudike国家根茎作物研究所。这些植物的植物学身份是由尼日利亚阿比亚州乌穆代克国家根茎作物研究所园艺部门鉴定的。

材料灭菌

所有设备按[48-51]所述方法消毒。玻璃器皿用70%乙醇表面消毒(去除表面污染物)，并用无菌蒸馏水彻底冲洗。它们被放在架子上晾干，然后装进高压灭菌器，在121度的温度下进行灭菌^℃在15psi的压力下工作15分钟。

培养基的制备

用于真菌生长和维持的培养基为马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)。根据制造商的建议，将39克PDA粉末溶解在1升蒸馏水中，放入1000毫升圆底烧瓶中。它被搅成漩涡，然后在加热器中煮沸融化。用高压灭菌器在121℃下灭菌15分钟。将培养基冷却至47℃后倒入无菌板(培养皿)中凝固。

腐水山药中真菌病原体的分离

用表面消毒的刀片从健康和感染水药部分交界处的组织上切下约2毫米立方体的切片，将水药样本接种在培养皿中。它们在70%乙醇中表面消毒(以去除表面污染物)，然后在无菌蒸馏水(SDW)中冲洗两次(每次清洗一分钟)。将切好的水薯片放在无菌纸巾上，放在层流风箱中10分钟晾干，然后放在PDA上。在27℃下培养4天，然后每天检查真菌生长的发展情况。

试验真菌病原体的传代/纯化和鉴定

当生长建立后，在混合培养中使用不同生物的接种剂进行传代培养，以获得纯培养物。这是通过将菌丝尖端从混合培养的菌落边缘转移到新鲜的PDA平板上，使用火焰消毒叶片。传代培养后，在27℃下培养，直至获得纯培养物。然后用石蜡密封测试真菌纯培养的培养皿，以防止污染。所得的纯培养物在复合显微镜和鉴定指南的帮助下用于真菌分离物的鉴定和随后的鉴定[52,53]。

致病性试验

这项试验是利用腐烂样品中的微生物进行的。新鲜健康水山药先用自来水冲洗，再用70%乙醇溶液表面消毒。将洗过的山药放在无菌纸巾上，在层流通风罩中干燥12分钟。无菌软木钻孔机(直径5毫米)在水山药上钻孔。在每个点上钻孔的水山药的部分被保存在无菌的盘子里。

从每个测试分离株的生长培养物(纯培养物)中取出一块4mm × 4mm的琼脂块接种到另一个软木钻孔器(直径4mm)帮助钻出的孔中。接种后，将被钻孔的山药部位仔细更换，用无菌蓝色密封凡士林密封，防止污染，并贴上标签。建立无分离物的对照实验(仅用琼脂栓接种)。

将所有测试菌株接种到各自健康的山药中后，所有山药在湿度室中孵育6天。每天检查山药是否腐烂，如软化、变色和难闻的气味。在6天的孵育期结束时，沿着孵育线小心地切开山药，露出山药内部区域，检查其是否腐烂。在可能的情况下，用透明尺测量腐烂区域和整个山药的长度和周长并记录。

植物提取物的制备

新鲜的叶子Cymbopogon citratus，Chromolaena odorata而且Newbouldia光滑的用自来水彻底清洗，然后用无菌蒸馏水(SDW)晾干5天进行碾磨。干燥后的样品分别在实验室磨粉机(美国Thomas Wiley ED-5型)中研磨，研磨后的样品进行筛分，得到用于提取的粉末状加工样品。

采用冷溶剂萃取法[54-56]。将各处理样品的10 g、20 g、30 g、40 g和50 g部分分别与各溶剂(水和乙醇)100 ml混合在一个瓶子中，分别得到10%、20%、30%、40%和50%的提取物浓度。提取液用四层无菌奶酪布筛选，保存于无菌锥形瓶中，用于抑制菌丝生长。

植物提取物对真菌生长的影响

采用[11]食物中毒技术，研究了植物提取物对试验真菌菌丝生长的影响。每种植物提取物浓度各1毫升(10%，20%，30%，40%和50%)分配到每个培养皿中，并将9毫升培养基(熔融PDA)添加到每个含有提取物的培养皿中，并小心地均匀地分布在培养皿上。这些被用于抑制菌丝生长。盘子轻轻旋转，以确保提取液均匀分散。让琼脂提取物混合物凝固，然后在中心接种一个4毫米直径的菌丝盘，菌丝盘取自7天前纯培养的试验真菌菌落边缘。每个处理重复进行。对照设置包括空白琼脂板(无提取物)接种试验真菌如上所述。

所有培养皿在27±2℃下孵育5天，每天检测其生长和抑制情况。菌落直径取在平板背面预先画好的两条垂线上沿两个方向生长的平均值。根据Whips所描述的方法，以百分比抑制的方式记录提取物的有效性。

百分比抑制=

在R₁为对照板中病原体的最远径向距离，R₂是含有琼脂的提取物中病原体的最远径向距离。

抑制率被确定为一个指南，在选择最低抑制浓度(MIC)，将有效控制引起腐烂的真菌。用三合美[11]量表评定提取物的抑制作用。

≤0% =无抑制作用

> 0-20% =轻微抑制

> 20-50% =中度抑制

> 50-100% =有效抑制

100% =高抑制

植物化学的分析

一些干燥的，磨碎的叶子citratus的词性，Chromolaena odorata，Newboludia光滑的采用标准方法进行植物化学筛选[54,57-59]，以确定生物碱、单宁、皂苷和类黄酮的存在。

Harbone[54]法测定生物碱

取5克样品称入250毫升烧杯，加入200毫升10%乙酸乙醇，盖上盖子静置4小时。这是过滤，并提取浓缩在水浴到原始体积的四分之一。将浓缩的氢氧化铵逐滴加入提取液中，直至沉淀完成。让整个溶液沉淀，收集沉淀物，用稀氢氧化铵洗涤，然后过滤。残渣是经过干燥和称重的生物碱。

Van-Burden - Robinson[57]法测定单宁酸

500毫克的样品被称量到一个50毫升的塑料瓶中。加入50毫升蒸馏水，在机械摇床中摇1小时。这是过滤到一个50毫升的容量瓶，并作出标记。然后将5毫升过滤后的液体移液到试管中，与2毫升0.1 M Fecl混合_3.0.1 NHCL和0.008 M亚铁氰化钾。在120 nm处测定10 min内的吸光度。

皂苷含量测定

使用的方法是Obdoni和Ochuko[58]。样品研磨后，各取20 g放入10℃m的锥形瓶中^3.加入20%的乙醇水溶液。样品在55℃左右的热水浴中持续搅拌加热4小时。对混合物进行过滤，用另外200毫升20%的乙醇重新提取残留物。组合提取物经90℃水浴还原至40 ml。将浓缩液转移到250毫升分离漏斗中，加入20毫升乙醚并大力摇晃。水层被回收，而醚层被丢弃。重复净化过程。加入60 ml正丁醇。组合的正丁醇提取物用10毫升5%氯化钠水溶液洗涤两次。剩余的溶液在水浴中加热。 After evaporation, the samples were dried in the oven to a constant weight; the saponin content was calculated as percentage.

Boham和Kocipal-Abyazan[59]法测定黄酮类化合物含量

在室温下，用100毫升80%的甲醇水溶液反复提取10克植物样品。整个溶液用Whatman 42号滤纸(125 mm)过滤。随后将滤液转移到坩埚中，在水浴中蒸发至干燥，并称至恒定重量。

统计分析

数据采用统计分析系统(SAS) 9.1版方差分析(ANOVA)进行分析，治疗手段采用邓肯多极差检验(DMRT)进行比较，P<0.05。采用社会科学统计包(SPSS Version 21)，以0.05显著水平进行t检验。

结果

腐水山药中真菌病原体的分离

真菌的发病与分离株的发生有关薯蓣属alata表明共分离出5种真菌，其中包括Botryodiplodia theobromae帕特。黑曲霉Van Tiegh,腐皮镰孢霉菌马特。，青霉菌spp．而且根霉stoloniferVuill。结果显示，最常发生的是Botryodiplodia theobromae频率为70%，而发生频率最低的是腐皮镰孢霉菌和青霉属(Penicillium spp)，频率各为1%(表1)。

表1。水山药相关真菌分离株的发病情况

生物	比例发生
Botryodiplodia theobromae	70
黑曲霉	14
腐皮镰孢霉菌	1
青霉菌spp	1
根霉stolonifer	14

致病性试验

测试的真菌包括b . theobromae，答:尼日尔，f .以上，青霉属和r . stolonifer在腐病感染样品上证实引起相同的疾病和腐病类型。真菌b . theobromae是毒性最强的，导致20%的腐烂薯蓣属alata而致死率最低的是青霉菌，致死率为0.5%薯蓣属alata(表2)。

表2。分离真菌的致病性试验

生物	比例发生
Botryodiplodia theobromae	20.
黑曲霉	10
腐皮镰孢霉菌	7
青霉菌spp	0．5
根霉stolonifer	2.5

粗提物的作用Cymbopogon citratus，Chromolaena odorata而且Newbouldia光滑的试验真菌菌丝生长的研究

所有植物提取物对试验真菌均表现出不同程度的抑制作用，这与提取物的浓度有关。关于乙醇，Cymbopogon citratus提取物浓度为50%时，对青霉的抑制效果最高，为46.00%(中效)，显著高于其他交互作用，而对青霉的抑制效果最低，为11.10%(略效)Botryodiplodia theobromae在10%和30%的提取液浓度下(表3)Cymbopogon citratus提取物浓度为50%时，抑制效果最高，为39.00%(中有效)黑曲霉抑菌效果最小，为4.00%(略有效)Botryodiplodia theobromae提取浓度为10%时(表4)。

表3。使用试验真菌的最低抑制率c . citratus用乙醇提取物

生物	10％	20％	30%	40%	50％
b . theobromae	11.10一个	13.11c	11.10ab	33.08交流	39.44ab
答:尼日尔	32.35ab	33.16ab	39.03交流	39.71交流	41.00cb
f .以上	13.11公元前	12.02公元前	11.23b	29.65c	43.30公元前
青霉菌spp	17.01交流	30.16ab	30.03cb	44.00ab	46.00ab
r . stolonifer	13.11c	11.12ab	11.23b	11.65c	18.00公元前

采用邓肯多极差检验(DMRT)，同一列中相同字母的平均值无显著差异(P<0.05)。

表4。使用试验真菌的最低抑制率c . citratus冷水萃取液

生物	10％	20％	30%	40%	50％
b . theobromae	4.00一个	9.00b	13.10c	22.00交流	29.00ab
答:尼日尔	33.88交流	36.33交流	29.00ab	37.71ab	39.00交流
f .以上	11.90c	18.12b	19.01b	19.05b	23.84公元前
青霉菌spp	24.05交流	23.00交流	26.00ab	24.71ab	33.20c
r . stolonifer	15.76ab	16.77ab	19.92cb	21.23公元前	21.00公元前

采用邓肯多极差检验(DMRT)，同一列中相同字母的平均值无显著差异(P<0.05)。

乙醇提取物Chromolaena odorata提取液浓度为50%时，抑制效果最高，分别为41.00%(中等有效)黑曲霉抑菌效果最小，为11.18%(略有效)Botryodiplodia theobromae提取液浓度为10%。冷水提取物Chromolaena odorata提取物浓度为50%时，抑菌效果最高，为39.00%(中有效)黑曲霉抑菌效果最低，为8.00%(略有效)Botryodiplodia theobromae提取浓度为10%时(表6)。

表5所示。使用试验真菌的最低抑制率c . odorata用乙醇提取物

生物	10％	20％	30%	40%	50％
b . theobromae	11.18一个	15.03b	31.05c	33.08交流	39.44ab
答:尼日尔	32.35交流	33.16ab	39.03ab	39.71ab	41.00ab
f .以上	13.11c	12.02ab	11.23b	29.65c	38.38公元前
青霉菌spp	32.35交流	33.16ab	39.03ab	39.71ab	41.00ab
r . stolonifer	13.11c	12.02ab	11.23b	29.65c	38.38公元前

采用邓肯多极差检验(DMRT)，同一列中相同字母的平均值无显著差异(P<0.05)。

表6所示。使用试验真菌的最低抑制率c . odorata冷水萃取液

生物	10％	20％	30%	40%	50％
b . theobromae	8.00c	17.88b	29.15c	31.16交流	32.10ab
答:尼日尔	9.06交流	16.33ab	29.00ab	37.71ab	39.00ab
f .以上	16.88c	18.12b	19.03b	19.05b	25.99公元前
青霉菌spp	21.05交流	22.00交流	24.00ab	24.71ab	30.20ab
r . stolonifer	14.00ab	16.77ab	18.00cb	22.01cb	21.00交流

采用邓肯多极差检验(DMRT)，同一列中相同字母的平均值无显著差异(P<0.05)。

乙醇提取物Newbouldia光滑的50%提取物浓度对青霉的抑制作用最高，为49.11%(中有效)(表7)，而对青霉的抑制作用最低，为0.35%(略有效)Botryodiplodia theobromae萃取液浓度为20%。冷水提取物Newbouldia光滑的50%提取物浓度对青霉的抑制效果最高，为44.01%(中有效)(表8)，而对青霉的抑制效果最低，为3.04%(略有效)Botryodiplodia theobromae提取液浓度为40%。

表7所示。使用试验真菌的最低抑制率n .光滑的用乙醇提取物

生物	10％	20％	30%	40%	50％
b . theobromae	7.10ab	0.35交流	0.38交流	6.40交流	10.00ab
答:尼日尔	9.48ab	23.95b	26.50c	27.03c	42.40公元前
f .以上	18.66c	13.02c	22.90cb	29.65c	40.20c
青霉菌spp	17.01交流	19.10一个	30.03cb	44.00ab	49.11公元前
r . stolonifer	9.00c	11.12ab	9.77ab	8.65c	11.00秒公元前

采用邓肯多极差检验(DMRT)，同一列中相同字母的平均值无显著差异(P<0.05)。

表8所示。使用试验真菌的最低抑制率n .光滑的冷水萃取液

生物	10％	20％	30%	40%	50％
b . theobromae	13.22b	12.95交流	23.80交流	3.40交流	22.00ab
答:尼日尔	10.33英航	10.95英航	26.50c	27.03c	42.40公元前
f .以上	14.06c	26.02c	22.90c	29.65cb	24.20cb
青霉菌spp	16.00交流	30.00一个	31.03cb	19.00ab	44.01公元前
r . stolonifer	13.33c	15.12ab	22.01ab	8.05c	31.10公元前

采用邓肯多极差检验(DMRT)，同一列中相同字母的平均值无显著差异(P<0.05)。

植物提取物的植物化学筛选c . citratus，c . odorata而且n .光滑的

定量分析

定量分析显示N.laevis其中生物碱、黄酮、皂苷和单宁含量最高，分别为3.06±0.03、2.09±0.08、2.05±0.01和2.05±0.01(表9)，其他植物化学物质含量也见表。

表9所示。的植物化学定量分析c . citratus，c . odorata而且n .光滑的

植物提取物	生物碱	类黄酮	皂苷	丹宁酸	T -统计数据
c . Citratus	-2.96±0.11	-1.72±0.11	0.06±0.05	0.06±0.05	0.021
c . Odorata	2.00±0.11	1.06±0.01	1.03±0.77	0.03±1.07	0.701
n .光滑的	3.06±0.03	2.09±0.08	2.05±0.01	2.05±0.01	0.035

乙醇提取物和冷水提取物的t检验比较Cymbopogon citratus，Chromolaena odorata而且Newbouldia光滑的

凉水提取物与乙醇提取物的比较c . citratus结果表明，乙醇提取物的平均抑制率为57.88±1.01，冷水提取物的平均抑制率为46.09±1.23，差异有统计学意义(P<0.05)。乙醇提取物的平均抑制率c . odorata(62.76±1.45)与冷水浸膏的平均抑制率(34.72±0.11)有极显著性差异(P<0.05)。乙醇提取物的平均抑制率n .光滑的(48.03±2.77)与冷水提取物的平均抑制率(39.88±2.44)有显著性差异(P<0.05)(表10)。

表10。乙醇提取物和冷水提取物的t检验比较c . citratus，C.odorata而且n .光滑的

植物提取物	冷水	乙醇	T -统计数据
Cymbopogon citratus	46.09±1.23	57.88±1.01	-1.035
Chromolaena odorata	34.72±0.11	62.76±1.45	-2.00
Newbouldia光滑的	39.88±2.44	48.03±2.77 OAT版权所有。版权所有	-2.701

讨论

与水山药变质有关的生物(薯蓣属alataL.)在这项研究中Botryodiplodia theobromae帕特。黑曲霉Van Tiegh,腐皮镰孢霉菌马特。，青霉菌属和根霉stoloniferVuill。b . theobromae最高的是什么时候f .以上青霉菌最少。这项研究的结果表明，植物提取物Cymbopogon citratus(直流),Chromolaena odorata(l)和Newbouldia光滑的(P.Beauv.)在不同浓度的植物提取物下均表现出抗真菌活性。

乙醇提取物和冷水提取物的抑制作用c . citratus，c . odorata而且n .光滑的在五种不同浓度(10%，20%，30%，40%和50%)下进行了评估，以开发出经济实惠且更简单的控制水山药变质的方法。各浓度的乙醇提取物和冷水提取物对被试生物均有抑制作用在体外,乙醇提取物更有效。这与Okigbo和Odurukwe[24]以及Sangoyomi[11]的观测结果一致。不同的提取材料和提取溶剂对被试真菌的抑制作用不同。一般来说，乙醇提取物比相应的冷水提取物更有效。这可以归因于乙醇是一种有机溶剂，会更好地溶解有机化合物，因此，提取抗微生物活性所需的活性化合物。萃取介质之间的抑菌潜力差异也可能是由于每个测试分离株对不同浓度的萃取物的不同敏感性所致。这也与一些工作者的发现相一致[24,27,60,61]。随着提取物浓度的增加，对真菌菌丝生长的抑制作用增强。这与Ekwenye和Elegalam, Okigbo和Igwe[62]的报道一致。这也与Suleiman[63]的研究结果相似，Suleiman在不同植物提取物浓度下记录的菌丝生长值存在显著差异。 This suggests that there is difference in the solvent soluble antifungal elements in the respective leaf extracts as reported by Iwu [42] and Sofowora [64].b . theobromae在所有测试的提取物浓度中均表现出轻微有效和中等有效的抑制作用。这与Sangoyomi[11]对山药采后腐病的处理结果相似，但使用了不同的植物提取物。她报告轻微有效的抑制c . odorata在b . theobromae．

根据Srinivauson的说法，等．[65]，据报道，生物活性物质的存在可以抵抗真菌、细菌和害虫。因此，这解释了在这项工作中使用的提取物抗真菌活性的演示。因此，这些植物提取物的抗真菌特性可能是由于植物化学物质作为抗菌剂[66]，并抑制这些病原体的生长[67]。植物提取物的植物化学分析表明n .光滑的与其他植物提取物相比，含有更多的植物化学物质，这证明了其在50%浓度时对测试生物体的最高抑制作用。乙醇提取物c . odorata乙醇提取物对被试生物的抑制作用最强n .光滑的对被试真菌的抑制作用最小。

所有这些植物化学物质的药理和药用潜力已被一些工作者的报告所证实[68,71]。

本研究揭示了黄芪乙醇提取物和冷水提取物的抑菌活性c . citratus，c . odorata而且n .光滑的在不同浓度下，可以进一步开发出天然的杀菌剂。这些植物物种中杀菌物质的存在与其他工作者的观点一致[11,24,27]。因此，从本工作得到的结果可以推断，乙醇和冷水提取物c . citratus，c . odorata而且n .光滑的可开发为天然杀菌剂，用于控制引起水药变质的微生物。

结论

这项研究表明c . citratus(柠檬草),c . odorata(暹罗草)和n .光滑的(ogirisi)对试验微生物表现出抗真菌活性。这一发现从控制与疾病相关的疾病的角度来看是重要的b . theobromae，答:尼日尔，f .以上、青霉属及r . stolonifer不使用导致环境污染的化学物质就能影响植物和动物。抗真菌的潜力c . citratus，c . odorata而且n .光滑的因此，正如本研究所观察到的，使用天然植物来控制真菌病原体，并取代目前使用的合成危险和昂贵的化学品，增加了希望。真菌学家、育种家、化学家、生态学家和其他农业领域的人的合作对于在这一重要研究领域取得最大进展是必要的。

参考文献

1. Orkwor GC(1998)尼日利亚山药生产。收录:J. Berthaud, N. Bricas和J. Mardand(编)山药，老植物和未来作物。国际学院行动。Cirad Intra-orstom-coraf。蒙彼利埃，法国，页:81-85。
2. 库西DG(1967)山药。Longmans Green London，第230页。
3. Okigbo RN(2002)白色山药(薯蓣圆形薯蓣)块茎表面真菌菌群和枯草芽孢杆菌在采收后对病原菌的控制。微生物学杂志156:81-85。
4. Igbeka JC(1985)尼日利亚山药的储存实践。亚非拉农业机械化16:55-58。
5. Adeniji MO (1970a)与尼日利亚山药贮藏腐烂有关的真菌。植物病理学60:590-592。
6. 尼日利亚东南部储存的收获后山药(Dioscorea spp.)生物防治方法综述。蒙古王技术，印版科学，4:207-215。
7. Hahn SK(1995)山药:薯蓣spp(薯蓣科)见:J. smartt and Simmonds, N.W(编)作物植物的进化。《科学与技术》，英国，pp: 112-120。
8. 王晓燕，王晓燕，王晓燕，等(2010)青海油桐品种抗营养价值评价。《印度日报》9:179-181。
9. 张涛，张志强(1999)甘薯淀粉淀粉理化性质与淀粉酶降解的关系。食品化学65:157-163。
10. 尚海峰，程海昌，梁海燕，刘淑云，侯卫武(2007)山药块茎粘液的免疫刺激活性。植物学研究生48:63-70。
11. Sangoyomi TE(2004)山药(Dioscorea rotundata Poir)采后真菌恶化及其防治。博士论文。尼日利亚伊巴丹大学179页。
12. Okigbo RN, Ogbonnaya UO(2006)两种热带植物叶片提取物(Ocimum gratissimum和Aframomum meleguata)对收获后山药(Dioscorea spp.)腐烂的抗真菌作用。非洲生物技术杂志5:727-731。
13. Olayide SO, Heady EO(1982)农业生产概论。伊巴丹大学出版社，伊巴丹，第319页。
14. Coursey DG, Booth RH(1972)易腐烂热带农产品的收获后植物病理学。植物病理学杂志51:751-765。
15. 国家根茎作物研究所(1983)，用miniett技术快速繁殖山药种子。第9号咨询公报。NRCRI，乌姆代克，尼日利亚。
16. Ikotun T (1983 b)微生物变质导致山药结穗发芽能力降低。肌病杂志8:455-461。
17. 杨晓明，王志明，王志明(1985)山药块茎病理病理的化学基础。山药块茎的生物化学与加工技术。尼日利亚生化学会。阿南布拉州立科技大学，尼日利亚，pp: 251-258。
18. 杨晓东，李志强，李志强(2000)利用绿木霉防治山药采后腐病的研究。植物病理学杂志148:351-355。
19. 枯草芽孢杆菌对山药(薯蓣spp.)采后真菌腐病的生物防治。真菌病理学杂志159:307-314。(Crossref)
20. 赖鹏飞，王志强，王志强(2004)中药和香料的抗菌和化学预防特性。高级医学化学11:1451-1460。(Crossref)
21. Azebaze AG, Meyer M, Valentin A, Nguemfo EL, Fomum ZT，等(2006)抗疟原虫活性的烯酰化克山酮衍生物(Crossref)
22. Tapsell LC, Hemphill I, Cobiac L, Patch CS, Sullivan DR，等(2006)草药和香料的健康益处:过去，现在，未来。医学杂志185:S4-24。(Crossref)
23. Rigiano D, Formisano C, Senatore F, Piacente S, Pagano E，等。(2013)斜孢菊(Roth) Don的肠道抗痉挛作用及其活性成分的化学鉴定。民族药理学杂志50:901-906。
24. 邬志波，陈志伟，陈志伟(2009)利用臭草、番木瓜和非洲山药叶提取物防治山药真菌腐病。尼日利亚真菌学杂志2:154-165。
25. Okigbo RN, Enweremadu EC, Agu KC, Irondi CR, Okeke CB，等。(2015)水山药(Dioscorea alata)果皮提取物防治白山药(Dioscorea rotundata)腐病病原。应用科学研究进展6:7-13。
26. Akueshi CO, Kadir CO, Akueshi EU, Agina SE, Ngurukwem C(2002)潜蚊科的抑菌潜力。尼日利亚植物学杂志15:37-41。
27. 杨晓明，王晓明，王晓明，等(2005)用木蠹和姜叶提取物防治山药块茎腐病。非洲生物技术杂志4:804-807。
28. Okigbo RN, Omodamiro OD(2006)鸽豌豆(Cajanus cajan (L.))叶提取物的抗菌作用Millsp)对一些人类病原体的研究。草本物种与药用植物杂志12:117-127。
29. Francisco V, Figueirinha A, Neves BM, Garcia-Rodriguez C, Lopes MC等(2011)citratus作为新型安全抗炎药物的来源:使用脂多糖刺激巨噬细胞的生物引导试验。民族药理学杂志133:818-827。
30. 阿登娜，阿格巴耶EO(2007)香茅鲜叶水提取物的降血糖和降血脂作用。在老鼠身上。中华药理学杂志112:440-444。(Crossref)
31. Fingueirinha A, Paranhos A, Perez-Alonso JJ, Santos-Buelga C, Batista MT(2008)香茅叶:黄酮的HPLC-PDA-ESI/MS/MS表征及其作为生物活性多酚来源的潜力。食品化学110:718-728。
32. Sawyerr E(1982)塞拉利昂的传统医学——一个批判性的评价。尼日利亚药学杂志13:28-33。
33. 陈建民，陈建民，陈建民，等(2000)香椿精油对小鼠的抗痛觉作用。中华药理学杂志70:323-327。(Crossref)
34. Negrelle RRB, Gomes EC (2007) Cymbopogon citratus (DC.)Stapf:化学成分和生物活性。巴西植物回顾9:80-92。
35. Bachiega TF, Sforcin JM(2011)柠檬草和柠檬醛对小鼠巨噬细胞细胞因子产生的影响。中华民族药物学杂志37(4):344 - 344。(Crossref)
36. 潘婷婷，王玲，见P(2001)臭藻酚类化合物对体外培养的皮肤细胞氧化损伤的保护作用。生物与制药通报24:1373-1379。
37. Zachariades C, Day M, Muniappan R, Reddy GVB (2009)King和Robinson(菊科)。出自:穆尼亚潘，R.(编)。节肢动物对热带杂草的生物防治。剑桥大学出版社，剑桥，英国，页:130-162。
38. 吴毅，李志强，李志强，等(2013)西非臭虫的生物防治现状。收录:Zachariades, C. Strathie, l.w.， day, M.D.和Muniappan, R.(编者)。第八届臭虫及其他尤托科生物防治与管理国际研讨会论文集。2010年11月1日至2日，肯尼亚内罗毕。ARC-PPRI，比勒陀利亚，南非。页:86 - 98。
39. Irvens GW(1974)尼日利亚的玉泽兰(L.)问题。有害生物文章和新闻摘要20:76-82。
40. Zachariades C, Strathie LW, Retief E, Dube N(2011)臭虫生物防治研究进展(l)R.M. King和H. Rob(菊科)在南非。In: Moran, V.C. Hoffmann, J.H, Hill, M.P. (Eds)。南非入侵性Allien植物的生物控制(1999-2010)。非洲昆虫学19:282-302。
41. 杨晓明，王晓明，王晓明，等(2003)植物对外来入侵灌丛的生物控制与管理。见:Neuenschwander, P, Borgemeister, C, Langewald, J. (eds)。非洲IPM系统中的生物控制。CAB国际，伦敦，页:145-160。
42. Iwu MM(1993)尼日利亚非洲药用植物手册。拉各斯大学出版社，拉各斯，尼日利亚，页:181-182。
43. Odugbem T(2006)尼日利亚药用植物的概述和图片。拉各斯大学出版社，拉各斯，尼日利亚，pp: 1-283。
44. Akinmoladun AC, Akinloye O(2007)臭草对高胆固醇血症相关代谢失衡的影响。aku - humbold Kellog Proc. aku - humbold Kellog/第三届SAAT年会，FUTA，尼日利亚，2007年4月16-19日，pp: 287-290。
45. 王志刚，王志刚，王志刚，王志刚(1997)新竹根中苯丙苷类化合物的研究进展。植物化学44:687-690。(Crossref)
46. Akunyili DN(2000)新bouldia laevis乙醇提取物的抗惊厥活性。在尼日利亚Zaria举行的第二届全国精神分析进步协会(NAAP)会议上发表的一篇论文，2000，页:155-158。
47. 王志刚，王志刚，王志刚，等(2009)牛耳草醇提物和水提物对牛耳草体外子宫收缩的影响。印度药理学杂志71:124-127。
48. Postagate J(1992)微生物与人类。第3版。剑桥大学出版社，页:906。
49. Singleton P(1997)细菌生物学，生物技术和医学(第4版)。Spectrum Books，伊巴丹，尼日利亚，页:289。
50. Cheesbrough M(2000年)热带国家微生物学医学实验室手册。Linacre House Jordan Hill，牛津，页:260。
51. Jawetz M, Adelberg BGF, Brutel JS, Morse SA(2004)医学微生物学(第3版)megaw - hill companies, Inc.。新加坡，第818页。
52. Sulton BC(1980)腔菌真菌不完美与棘球绦虫和叠层。英国萨里郡邱郡共同财富真菌学研究所。页:696。
53. Barnett HL, Hunter BB(1987)《不完美真菌图解概论》(第4版)Burgress出版公司，第218页。
54. Harbone JB(1973)植物化学方法。伦敦。查普曼和霍尔，有限公司，页:49-188。
55. Juanid SA, Olabode AO, Owuliri FC, Orkworlu AEJ, Agina SE(2006)羊草提取物对一些精选的胃肠道细菌分离物的抗菌性能。非洲生物技术杂志5:2315-2321。
56. 杜丽丽，王志强，王志强，等。(2007)番木瓜根提取物的抑菌活性研究。中国微生物学杂志，1:37-41。
57. Van-Burden TP, Robinson WC(1981)蛋白质与单宁酸配合物的形成。农业与食品化学杂志1:77。
58. Obdoni BO, Ochuko PO(2001)尼日利亚江户州和三角洲州一些稳态植物粗提取物的植物化学研究和比较功效。全球纯粹与应用科学杂志8b: 203-208。
59. 黄志刚，王志刚，王志刚，等(1974)夏威夷果楸叶和茶楸叶的黄酮类化合物及缩合单宁。太平洋科学48:458-463。
60. Amadioha AC(2000)部分叶提取物对引起马铃薯块茎腐烂的米根霉的抑菌作用。植物病理学档案34:1-9。
61. 张志刚(2002)印楝的抑菌作用。林芝的提取物。全球纯粹与应用科学杂志6:423-428。
62. 陈志伟，陈志伟，陈志伟，等(2007)豚鼠吹笛菌和黄花吹笛菌对白念珠菌和粪链球菌的抑菌作用。微生物与免疫学报，匈牙利，54:353-366。
63. Suleman MN(2010)楝树和木瓜叶提取物对山药腐烂的致病生物茄链孢菌的抑菌活性。环境生物学进展4:159-161。
64. Sofowora A(1997)非洲传统医学中使用的药用植物。John Wiley and Sons，纽约，第128-129页。
65. 史瑞尼沃索，李志强，李志强(2001)印度民间药用植物的抑菌活性。民族药理学杂志94:217-222。
66. 邬德武，乔希亚C(2006)尼日利亚两种药用植物的化学成分评价。非洲生物技术杂志5:361。
67. 李志刚，李志刚，李志刚，李志刚，等(2009b)大蒜、香椿和凤尾草粗提物对山药属真菌的抑菌作用。尼日利亚植物学杂志22:359-369。
68. Caragay AE(1992)癌症预防食品和成分。食品技术46:65-69。
69. Okwu DE(2004)尼日利亚东南部本土物种的植物化学物质和维生素含量。非洲可持续环境杂志6:30-34。
70. (2005)热带植物提取物对人体病原菌的抑制作用:臭臭草、柑橘和一些抗生素。分子医学与前沿科学杂志1:34-40。
71. Okigbo RN, Anuagasi CL, Amadi JE, Ukpabi UJ(2009)部分非洲块茎植物提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的潜在抑制作用。国际整合生物学杂志(IJIB) 6: 91-98。