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摘要

介绍：在临床病理学中使用血清或血浆仍有争议。使用凝胶分离管是耗时的，可能无助于临床分析期间的紧急情况。比较了肝素、K₂EDTA、柠檬酸钠抗凝剂对凝胶分离管脂质谱的影响。

方法:这项横断面研究是在北桂政府医院进行的。这项研究共招募了115名参与者。每例患者空腹血样均采集至肝素、K₂EDTA，柠檬酸钠和凝胶分离管同时进行。抗凝试管中的样品立即离心获得血浆，凝胶分离器试管中的样品在离心获得血清前进行凝血。使用自动化学分析仪测定血浆和血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-c)和高密度脂蛋白(HDL-c)。

结果：与凝胶分离管相比，肝素管中的Tc（P <0.001），Tg（P <0.001），LDL-C（P <0.0001）的平均水平降低，显着不同。使用K.₂EDTA与凝胶分离管相比，TG（P> 0.05）的平均水平没有不同但TC（P <0.001）和LDL-C（P <0.001）和显着不同。同时，与凝胶分离管相比，在柠檬酸钠管中降低和显着不同，Tc（P <0.05），Tg（P <0.05），LDL-C（P <0.05）的平均水平降低，与柠檬酸钠。使用肝素，k的平均HDL-C水平没有显着不同。₂EDTA和柠檬酸钠抗凝管与凝胶分离管比较(p>0.05)。

结论：K₂EDTA抗凝管可能没有在TG水平显著的变化。肝素，K₂EDTA和柠檬酸钠抗凝管可替代凝胶分离管用于紧急病例HDL-c分析。

关键字

抗凝血剂，凝胶分离，肝素，K2EDTA，脂蛋白，柠檬酸钠

缩写:

CVD：心血管疾病;HDL：高密度脂蛋白;K₂EDTA：乙烯二胺四乙酸二钾;LDL：低密度脂蛋白;TC：总胆固醇;TG：甘油三酯

介绍

虽然心血管疾病（CVD）仍然是死亡的主要原因，但在过去的25-30秒内，年龄相关的CVD死亡率也跌破。众多的研究表明，危险因素减少和治疗既定疾病的每种疾病约为CVD死亡率下降的约40-60％，其另外0-10％可归因于未确定的原因[1]。

血脂是心脏风险评估的最重要的验血。脂质配置文件用于帮助确定心脏疾病和什么是否有边缘或高风险的治疗可能是最好的帮助决策的个体风险。它测量在个体中[2]的血TC，TG，HDL-C和LDL-C。

抗凝血剂是抑制血液凝固，从而确保被测定物质的浓度改变时尽可能少之前的分析[3]的添加剂。抗凝是由钙离子的螯合（K或者实现₂EDTA，柠檬酸盐）或通过抑制凝血酶（肝素）。从凝结的血液血清是用于与适当的抗凝血剂得到可以是同样有效的样本的临床化学分析，但血浆和优选血清[4]某些条件下，优选的试样。虽然这些抗凝剂是不是免费的干扰，它仍然是由像罗氏一些实验室，这可能是由于血浆，血清不同，可立即取血样后离心最近使用过。此外，凝结的血液可防止堵塞自动分析仪的探针的与血液颗粒和胆固醇[5]其预期的影响可以忽略的凝块。

由于血清的收获需要15-30分钟等待在离心前等待凝固完成，因此在紧急情况下使用血浆加快分析。此外，来自给定体积的全血的血浆产量总是大于血清的产率[4]。因此，必须对具有各种类型的抗凝血剂的血浆抗凝固物进行分析，最常见的是K.₂EDTA，柠檬酸钠和锂肝素。在临床病理学中使用血清或血浆仍有争议。血清是许多实验室首选的生化检测，因为它避免了加入抗凝剂，这可能会干扰一些分析方法或改变被测参数的浓度[6]。然而，一些中心更倾向于使用血浆，因为血浆样品可以在样本采集后直接离心，不像血清需要等待凝固完成。因此，使用血浆可以在紧急情况下快速分析生化测量。在加纳，关于不同类型的抗凝剂对脂质谱参数的影响的信息很少。正是在这种背景下，本研究确定了K₂EDTA、锂肝素和柠檬酸钠对脂质谱的影响，并与凝胶分离管进行比较。

材料和方法

该研究是将其在Bekwai政府医院进行的横断面研究。Bekwai政府医院是一家政府机构，旨在向参观设施的所有患者提供全面的医疗服务。在所有的共有115名患者去医院的实验室设施都同意吸收进了书房。考虑到所有受试者病人谁是18岁以上，并已禁食至少12小时。谁没有禁食8-12小时的患者被排除。经批准的研究资料单张的形式被提供给潜在参与者来决定，如果他们想成为研究的一部分。

样品采集和生化分析

在经过12小时或至少8小时的夜间禁食后，通过静脉切开取6ml静脉血。采集的血液约1.5ml分配到四支试管中(K₂EDTA，柠檬酸钠，锂肝素和凝胶分离管)，并立即分析总胆固醇(TC)，甘油三酯(TG)和hdl -胆固醇(HDL-c)使用美国MINDRAY诊断有限公司的BS-130化学分析仪。采用Friedewald公式(LDL-c=TC-HDL-c-(1∕5)TG)计算ldl -胆固醇浓度。所有样品重复生化测定。

酶解氧化后测定总胆固醇浓度。比色指示剂为4-氨基安替比林与苯酚在过氧化物酶催化作用下由过氧化氢生成的醌亚胺(Tinder’反应)。

在用脂蛋白脂肪酶酶促分离后测定甘油三酯。指示剂是醌胺，在过氧化物酶的催化作用下由过氧化氢产生的4-氨基丙氨酸和4-氯苯。

HDL-c的测定方法采用免疫抑制试剂，直接测定HDL-c。该方法采用双试剂形式。第一个试剂含有抗人β-脂蛋白抗体，它能结合除HDL以外的脂蛋白(LDL-c, VLDL-c和乳糜微粒)。第二种试剂含有酶，然后选择性地与HDL颗粒中的胆固醇反应。因此，只有高密度脂蛋白胆固醇需要进行胆固醇测量。

数据分析

所有受试者的信息都记录在Excel电子表格中。然后使用Graph Pad Prism版本6进行分析。对离散变量计算百分比或比例，而对连续变量计算平均值及其标准差。配对样本t检验用于比较抗凝管和凝胶分离管的脂质水平。计算95%置信区间或p值。在所有的统计检验中，p值<0.05被认为是显著的。

结果

如图1，女性占55.7%(64/115)，男性占47.5%(51/115)。

参与者的平均年龄为40.2年。最有代表性的年龄组为40-59岁56.5％（115分之65），其次是60-79岁21.7％（115分之25），20-39岁14.8％（115分之17）和<20岁7.0％（115分之8）（图2）。表1显示了血脂指标抗凝剂的作用。总胆固醇，甘油三酯和LDL-C的平均水平在肝素的试管中，K是显著下₂与血清凝胶相比，EDTA和柠檬酸钠抗凝血管（P <0.05）。然而，与凝胶分离器相比，抗凝血管中HDL-C的水平没有显着差异。

	凝胶分离器	肝素管	K2乙二胺四乙酸	柠檬酸钠
参数(更易/ l)	（N = 115）	（N = 115）	（N = 115）	（N = 115）
T.胆固醇	4.52±0.06	4.37±0.04Arunachal Pradesh，	4.44±0.03Arunachal Pradesh，	4.48±0.02＊
甘油三酸酯	0.65±0.03	0.60±0.02＊＊	0.64±0.02	0.62±0.03＊
HDL-C	1.47±0.04	1.47±0.01	1.46±0.01	1.48±0.03
LDL-C.	2.86±0.06	2.74±0.06***	2.78±0.05Arunachal Pradesh，	2.80±0.06＊

表格1。在抗凝剂管的脂质谱标记平均水平相比于凝胶分离管．数值为平均值±标准差。*p<0.05、**p<0.001、***p<0.0001为与凝胶分离器管差异显著程度。HDL:高密度脂蛋白;LDL:低密度脂蛋白。

数字1．研究参与者的性别分布。

图2。学习参与者的年龄分布。

表2显示了血清凝胶分离管与血浆肝素、K₂EDTA和柠檬酸钠。总胆固醇，甘油三酯，HDL-C并使用肝素管与凝胶分离管比较LDL-C的平均差异分别为0.15毫摩尔/升，0.05毫摩尔/升，0.0毫摩尔/升和0.12毫摩尔/升。总胆固醇，甘油三酯，HDL-C和LDL-C用k平均差₂EDTA与凝胶分离管比较分别为0.08毫摩尔/升，0.01毫摩尔/升，0.01毫摩尔/升和0.08毫摩尔/升。总胆固醇，甘油三酯，HDL-C并使用柠檬酸钠与凝胶分离管比较LDL-C的平均差异分别为0.04毫摩尔/升，0.03毫摩尔/升， - 0.01毫摩尔/升和0.06毫摩尔/升。

	肝素管	K2乙二胺四乙酸	柠檬酸钠
参数(更易/ l)	（N = 115）	（N = 115）	（N = 115）
T.胆固醇	0.15	0.08	0.04
甘油三酸酯	0.05	0.01	0.03
HDL-C	0.00	0.01	-0.01
LDL-C.	0.12	0.08	0.06

表2。凝胶分离管与抗凝管的平均效应差(偏倚)。

讨论

在临床病理学中使用血清或血浆仍有争议。因此，本研究确定了K的作用₂EDTA，肝素锂和柠檬酸钠对脂质分布和它相比凝胶。这项研究的结果表明，TC，LDL-C和TG肝素时，K的统计显著降低平均水平₂与凝胶分离器管相比，使用EDTA和柠檬酸钠抗凝剂管（P <0.05）。同时，当肝素，k时，HDL-C水平是非显着降低的₂与凝胶分离管相比，使用EDTA和柠檬酸钠抗凝剂管。与凝胶分离管相比，该研究观察到使用肝素抗凝血管的TC，TG和LDL-C水平显着降低（表1）。

TG水平的降低与Yang等人[7]的横断面研究一致，该研究发现，在血液透析的高脂血症糖尿病患者中，使用低分子肝素可显著降低TG水平。Katopodis等人[8]的另一项研究表明，在接受肾替代治疗的患者中，第1、2和3小时静脉注射未分离肝素可降低TG水平。虽然上述研究通过测定肝素对脂质TG的影响，但本研究采用体外肝素抗凝管。肝素诱导体外TG水平降低的机制尚不清楚。然而，肝素直接刺激脂蛋白脂肪酶(LPL)从上皮细胞释放到血浆。LPL的增加增强了机体清除TG的能力，从而降低血浆浓度[9]。

本研究的另一个发现是，肝素抗凝曾在HDL-C水平没有变化显著相比于使用凝胶分离管由0.0毫摩尔/升的平均差如所描绘。通过Sassolas等人的研究。[10]未发现使用肝素抗凝与本研究的结果同意任何显著差异。这意味着，肝素抗凝管同样可以被用于在临床化学实验室测量HDL测定。然而，需要研究的大样本，以证实这一发现。

当K₂采用EDTA抗凝管(表1)₂EDTA抗凝在TG浓度没有显著改变和高密度脂蛋白胆固醇水平相比,使用凝胶分离器管描绘的平均差0.0更易与l虽然降低浓度观察相比,凝胶分离器管(表2)。·沙里夫et al .[11]的研究没有发现任何在TG显著差异使用K浓度₂EDTA抗凝血剂和这项研究结果很好。这意味着k₂EDTA抗凝管同样可以被用于测量HDL-C和TG测定在临床化学实验室。然而，需要研究的大样本，以确认此发现。然而，在水平非显著变化甘油三酯和用k HDL-C₂EDTA抗凝剂尚不清楚。

TC、TG和LDL-c水平显著降低，平均差异为0.04 mmol/l、0.03 mmol/l、与凝胶分离管相比，使用枸橼酸钠抗凝管时的浓度分别为0.06 mmol/l和0.06 mmol/l(表2)。我们认为，收集到枸橼酸管中的血液数量的微小变化，如>1:10的稀释，可能是导致枸橼酸血浆浓度较低的原因。枸橼酸还能抑制TC、TG、HDL-c和LDL-c[12]的反应。然而，造成这一结果的确切原因尚不清楚。本研究的另一个发现是，与凝胶分离管相比，使用柠檬酸钠管的HDL-c水平增加且不显著，平均偏差为-0.01 mmol/l。HDL-c的浓度可能不受柠檬酸抗凝剂的影响，可能在紧急临床化学分析中有用。

结论

使用K.₂EDTA管用于甘油三酯估计和肝素，K₂与凝胶分离管相比，EDTA和柠檬酸钠抗凝剂用于估算HDL-c的浓度没有显著变化，因此应在紧急情况下的常规临床化学分析中使用。还需要进一步的研究来证实这一发现，研究对象是大量的健康人群。

伦理批准和同意参与

该研究经委员会批准了人类研究出版物和道德，Kwame Nkrumah科技大学Kumasi Ghana。从每个参与者获得书面知情同意书。受访者保证，收集的信息仅用于研究和学术目的。此外，受访者被赋予了任何时候选择他们认为无法继续研究的自由。

作者的贡献

EOA促成了研究思路，数据收集，解释，纸起草和修订的概念。WKBAO促成了研究思路的概念。CO，EA，BOA，BA，和SD促成了纸张起草和修订。SPS促成了数据采集和样品分析。AAO促成患者招募和样品收集。所有作者批准发布前的最后手稿，并同意对工作的各个方面负责。

承认

我们真诚地感谢管理层和Bekwai政府医院，实验室单位的工作人员。

参考

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