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摘要

有机茉莉嫩稻的植物化学成分及潜在的健康功效(栽培稻l)叶茶，cv。以Khao dok mali 105 (KM)和Homnil (HN)为研究对象。用有机溶剂(丙酮、乙醇、水)依次提取，结果表明，所有提取物的主要成分为酚酸，主要成分为绿原酸。总酚含量最高(113.8 mg GA E/g DW)，抗氧化能力最强[FRAP: 1484.2 μmol Fe^{+ 2}/g DW, DPPH: EC₅₀KM丙酮基提取物为1.31 mg/mL, ORAC: 4093.1 μmol T E/g DW]。该提取物具有明显的α-淀粉酶(IC₅₀=73.96±2.7 μg/mL)和胰脂肪酶(IC₅₀=65.7±5.8 μg/mL)抑制活性。两种米叶茶都含有挥发物(三十六烷、石竹烯和二氢锕内酯)，这是它们迷人而独特的香气的原因。这项研究表明，茉莉花米的有机嫩叶可以用于生产一种促进健康的新型草本茶(图1)。

图1所示。图形抽象。

关键字

功能饮料，茉莉花米茶，多酚，挥发物，α-淀粉酶，胰脂肪酶，抗氧化活性

简介

花草茶是植物性植物化学物质的丰富来源，有助于降低慢性疾病的发病率[1]。绿茶叶子(卡梅利娅sinensis(l)Kuntze)是植物基饮料的经典例子，由于其健康特性，被广泛应用于营养和功能性食品行业[2]。儿茶素是绿茶中主要的酚类化合物，它具有独特的感官[2]和促进健康的特性，包括抗氧化和抗菌[3]，缓解代谢综合征的临床特征，记忆障碍[4]，减少病理性血管生成[5]和预防癌症[6]。

当地种植的植物被用于生产草药茶，显示出相当的抗氧化能力c . sinensis叶子茶[7]。同样，从路易波士、迷迭香、柠檬草、桑葚、竹子、莲花、薄荷、柿子和马黛茶中提取的草药茶富含抗氧化剂和抗菌化合物[3]。在众多睡莲品种中，“征服者”和“弗吉尼亚”生产的茶具有出色的香味，总多酚含量最高，抗氧化能力优越[8]。

最近，泰国政府启动了“一区一品”计划。这一举措是一项重要战略，通过推广当地产品和可持续利用当地植物群来支持当地社区。在这个项目下，对生产功能性茶的新植物来源进行了评估。大米(栽培稻L.)是泰国[9]的主要粮食作物，水稻种植面积最大的地区是中部平原和东北地区[10]。由于市场对茉莉花米的需求很大，其在东北地区的种植正在增长。茉莉花米的独特香味可以在嫩叶茶中捕捉到。本项目旨在开发一种从茉莉嫩叶中提取的具有独特感官和促进健康特性的功能茶。

材料与方法

植物材料

从泰国素林省有机市场购买的两种茉莉花水稻品种，白色长粒Khao dok mali 105 (KM)和黑色长粒Homnil (HN)的种子在水中浸泡一夜，并放置在含有土壤混合物的托盘(40×50×15 cm)中。它们在日光下被保存在室温下，每两天浇水一次。在10号^th每天收集叶子，用MilliQ水洗净，切成3厘米长的段，在黑暗中(室温)风干。随后在70°C下烘烤，置于铝箔塑料袋中，室温保存至分析(<2个月)。这些样品代表了从各自的水稻品种中获得的凉茶。市售绿茶(GT;以福建龙青绿茶(China Imex)为参考样品。

化学物质

所用溶剂和化学品均为分析级。绿原酸，2 '，7 ' -二氯荧光素二乙酸酯(DCFH)， D-(+)葡萄糖溶液(45%)，4-(二甲基氨基)肉桂醛(DMAC)，乙酸，氯化铝六氢化(AlCl_3.•6小时₂O)和Folin-Ciocalteu试剂来自Merck公司(Darmstadt, Germany)， 2,4,6- tri(2-吡啶基)-s-三嗪(TPTZ)来自Fluka公司(Madrid, Spain)。盐酸(HCl)，(+)-水合儿茶素，氯化铁(FeCl_3.)，硫酸铁(FeSO₄)、乙醇、甲醇、氢氧化钠和亚硝酸钠_3.)从QReC(新西兰)购买。丙酮、2,2’-偶氮酶(2-氨基丙烷(AAPH)、DPPH、大鼠肠丙酮粉、蔗糖、甲酸、马来酸、4-甲基伞形油酸酯、猪胰脂肪酶(Sigma II型)、三氟乙酸和荧光素(120 nM)来自Sigma- aldrich公司(Darmstadt，德国)。阿卡波糖是从Glucobay(拜耳医疗保健制药公司，勒沃库森，德国)获得的。

米叶茶冻干浸膏的制备

根据Dalar和合作者[11]制备了茶叶(KM, HN, GT)的冻干提取物。简单地说，将茶叶样品研磨，与20倍体积的酸化丙酮(80%丙酮、19% MilliQ水和1% 0.1%三氟乙酸，v/v/v)混合，在室温下摇晃2小时，在4℃下以10,000 rpm离心20分钟(Centurion, K2R, Centurion Scientific, UK)，收集上清液。接下来，用酸化乙醇(80%乙醇，19% MilliQ水和1%的0.1%三氟乙酸，v/v/v)提取颗粒，然后用MilliQ水(Synergy^®，超纯I型，Merck，法国)，每次收集上清液。使用旋转蒸发器(型号N-1N, lia, Tokyo Rikakikai, Chuo-ku, Tokyo, Japan)在37°C的减压下分别蒸发从三种有机溶剂萃取得到的上清液。将得到的浓缩提取物溶解在最小量的MilliQ水中，在−51℃的真空条件下预冷冻(Eyela PFR1000, Tokyo Rikakikai, Chuo-ku, Tokyo Tokyo, Japan)和冷冻干燥(Eyela FDU2100, Tokyo Rikakikai, Chuo-ku, Tokyo, Japan)，以获得精细的冻干粉末。

抗氧化能力

总酚含量(Folin - Ciocalteu测定)和铁还原抗氧化能力(FRAP)测定:总酚(TP)水平和提取物的总还原能力测定如前所述[12]。

自由基清除活性(DPPH测定):用2,2-二苯基-1-苦甘酰基测定自由基清除活性

(DPPH)方法根据Sharma和Bhat[13]。简单地说，将冻干的茶叶提取物溶解在80%的丙酮中(浓度范围为0.01至10.0 mg/mL)，将0.06 mM的DPPH溶解在100%甲醇中。DPPH自由基溶液在甲醇(3.5 mL, 0.06 mM)中与100 μL茶提取物溶液混合均匀。然后将混合物在室温下在黑暗中孵育30分钟。用分光光度计(Libra S22, Holliston, MA, USA)在517 nm处测量吸光度。DPPH自由基吸光度降低50%所需的一半有效浓度(EC₅₀)计算并表示为每mL溶液中冻干茶提取物的mg DW (mg/mL)。

氧自由基清除能力(ORAC)测定:ORAC检测方法如前所述[11]。采用trolox标准曲线，以每克冻干提取物干重(μmol TE/g DW) μmol trolox当量表示样品的抗氧化能力。

糖的决心

还原糖和总糖的测定采用AOAC[14]。所有结果均以每克干重(mg G E/ G DW)的冻干提取物的mg葡萄糖当量表示。

酚类化合物的鉴定和定量

液相色谱-二极管阵列质谱(LC-DAD-MS/MS)鉴定酚类化合物:酚类化合物在量子三级四极杆(TSQ)质谱仪(Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA)的帮助下鉴定，如Dalar和Konczak[15]所述，除了梯度洗脱修改如下:0%溶剂B 2分钟，然后40% B 6分钟，60% B 8分钟，100% B 4分钟。

高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)定量酚类化合物:酚类化合物按照Dalar和Konczak[16]进行定量。用改良的线性梯度洗脱溶剂B，从0 ~ 20%洗脱3 min，到40%洗脱5 min，到60%洗脱5 min，到100%洗脱5 min，再以100% B洗脱5 min。

挥发性化合物的鉴定

顶空固相微萃取(HS-SPME)程序:将两克冻干植物提取物称量到40毫升小瓶中，进行固相微萃取(SPME)程序。使用二乙烯基苯/羧酸/聚二甲基硅氧烷纤维，膜厚50/30 mL，分析前进行预处理。小瓶配备了“微型惰性”阀门，并通过永久内部搅拌保持在35°C。样品平衡30分钟。然后将SPME纤维放置在顶空40分钟。然后将纤维引入GC注入器，热解吸3分钟，以增加化合物的挥发性。根据Verzera及其合作者[17]对微萃取工艺进行了优化。

气相色谱质谱(GC-MS)分析

用Dool和Kratz[18]所描述的气相色谱-质谱法进行分析。脂肪酸和挥发性化合物用Uzun和合作者[19]描述的Varian 3800气相色谱仪进行分析。

酶抑制活性

-淀粉酶抑制活性:通过Dalar和合作者[11]描述的香菜- Somogyi碘/碘化钾(IKI)方法抑制α-淀粉酶。α-淀粉酶抑制活性以每克干重的微量阿卡波糖当量(μM A E/g DW)表示。

脂肪酶抑制活性:脂肪酶抑制活性测定是根据Dalar和合作者[11]使用4-甲基伞形油酸酯(0.1 mM)作为底物进行的。在微摩尔奥利斯特当量(μM奥利斯特E/g DW的冻干茶提取物)中，脂肪酶被抑制。

统计分析

基于至少3次独立评估(n=3)计算结果的平均值和标准偏差(SD)。一半有效浓度(EC₅₀)值使用Microsoft Excel根据至少四个反应点的最佳拟合形状从相应的剂量抑制曲线计算。使用Graphpad Prism 5 (Graphpad Software, CA, USA)进行统计相关分析。

结果与讨论

茶叶冻干提取物的得率、糖含量及抗氧化能力

分别用1)酸化丙酮、2)酸化乙醇、3)酸化MilliQ水作为溶剂依次提取干茶样品(KM、HN、GT)。该方法可在未知植物源[20]的提取过程中实现植物化学物质的最大回收率和良好的化合物分化。

GT丙酮基提取物的产率最高(28.9%)(表1)。KM和HN米叶茶的水基提取物的产率是GT水提取物的2.5- 2.0倍，表明米茶中极性化合物含量相对较高。KM米茶的三种提取物(丙酮提取物、乙醇提取物和水基提取物)中总糖含量最高，GT提取物次之。总糖含量最低的是水基和丙酮基的HN茶提取物(表1)。在每种提取物类别中，水基GT提取物和乙醇基和丙酮基KM提取物的还原糖含量最高(表1)。这些还原糖水平与茶提取物相当或更高Eryngium bornmuelleri茶叶提取物(丙酮基提取物:71.1±0.6 mg G E/ G DW，乙醇基提取物:49.0±0.9 mg G E/ G DW，水基提取物:37.0±1.1 mg G E/ G DW[11]。

采用四种试剂法，包括总酚(TP, Folin-Ciocalteu法)、1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH•)自由基法、总还原能力(铁还原能力功率，FRAP)和氧自由基吸收能力(ORAC)，对顺序叶茶提取物的抗氧化潜力进行了评价。

所有茶叶中总酚含量最高的是丙酮提取物(表1)，其含量约为乙醇提取物的3倍。酚类化合物中水基提取物的含量最低，但KM除外。综上所述，绿茶中TP含量最高，其次是KM和HN茶(表1)。

DPPH自由基测定法允许测定反应溶液中DPPH自由基吸光度降低50%所需的冻干提取物的量(用EC表示)₅₀)．所有茶叶的丙酮基提取物清除DPPH自由基的能力最高(表1)。这一结果与同一提取物中检测到的总酚类化合物的最高水平相关(表1)。在其提取物类别中，清除DPPH自由基能力最低的是hm -丙酮基、KM -乙醇基和KM -水基提取物。HN丙酮基和乙醇基提取物具有相当的DPPH自由基清除能力，并且比HN水提取物的清除能力略强(表1)。FRAP和ORAC值也有相似的趋势;在所有提取物中，丙酮基提取物的FRAP值最高，其次是乙醇和水基提取物(表1)。绿茶在每一类提取物中都获得了更高的FRAP和ORAC值(表1)。在丙酮基提取物中，KM的表现优于HN，而在水基提取物中则观察到相反的结果(表1)。丙酮基茉莉米叶茶提取物(KM和HN)和参考样品绿茶(GT)均表现出更高的ORAC和FRAP值Eryngium bornmuelleri通过同样的提取工艺获得的茶叶提取物。然而，本研究评估的乙醇和水基提取物的ORAC和FRAP值与各自的乙醇和水基提取物相当Eryngium bornmuelleri叶茶提取物[11]。这些结果表明，就抗氧化能力而言，茉莉花米叶茶不如绿茶，但与其他传统使用的由当地种植的植物制成的民族茶相当或更好。

表1。从茉莉米幼叶茶、Khao Dok Mali 105和Homnil品种和参考样品绿茶中提取的冻干馏分，还原糖和总糖，总酚和抗氧化能力

提取 溶剂	茶 样本	收益率 （％）	还原糖 (mg G E/ G DW)一个	总计糖 (mg G E/ G DW)一个	TP (mg GA E/g DW)b	DPPH (EC50；毫克/毫升)	收紧 （米摩尔菲+ 2/ g DW)	氧自由基吸收 （米mol TE/g DW)
丙酮(A)
	公里	6．0	58.8±1.8一个	112.5±1.6一个	113.8±2.7b	1.31b	1484.2±43.4b	4093.1±177.0b
	接下来的	3.6	12.01±1.2b	32.2±2.1c	107.5±5.5c	3.67一个	1285.9±50.2c	3452.8±146.4c
	GT	28.9	4.8±0.3c	87.2±0.7b	346.7±5.1一个	1．25c	9596.4±70.5一个	5115.1±170.7一个
乙醇(E)
	公里	5.1	61.6±5.8一个	125.3±2.8一个	31.3±1.0b	6.41一个	747.8±41.4b	2320.8±123.5c
	接下来的	2．3	42.0±2.1c	98.4±1.4b	28.9±1.6c	3.79c	543.8±32.0c	2906.0±76.9b
	GT	6.4	44.6±1.8b	92.1±2.1c	142.7±2.2一个	4.73b	4577.3±61.4一个	3981.0±79.5一个
水(W)
	公里	7.6	65.2±2.6b	128.2±1.6一个	36.6±1.6一个	4.76一个	215.3±13.1c	1762.1±68.5c
	接下来的	6.3	6.24±2.1c	77.5±2.8c	16.4±1.1c	4.52b	441.9±13.1b	1784.2±41.0b
	GT	3．0	71.0±1.3一个	105.3±3.0b	32.8±2.2b	3.57c	685.5±21.7一个	2024.9±72.0一个

数据代表至少三个独立实验的平均值±标准差。对于每个参数，没有相同字母的值有显著差异(p<0.05)。a: mg GE/gDW;毫克葡萄糖当量每克干重;b: mg GA E/gDW毫克没食子酸当量每克干重;FRAP:铁还原抗氧化能力;ORAC:氧自由基吸收能力;µmol Fe+2/g DW:每克冻干提取物干重的亚铁当量µmol;EC50:降低反应一半的浓度的一半;KM:茉莉米Khao Dok Mali 105; HN: Jasmine rice Homnil; GT: Green tea

数据代表至少三个独立实验的平均值±标准差。对于每个参数，没有相同字母的值有显著差异(p<0.05)。a: mg GE/gDW;毫克葡萄糖当量每克干重;b: mg GA E/gDW毫克没食子酸当量每克干重;FRAP:铁还原抗氧化能力;ORAC:氧自由基吸收能力;µmol Fe+2/g DW:每克冻干提取物干重的亚铁当量µmol;EC50:降低反应一半的浓度的一半;KM:茉莉米Khao Dok Mali 105; HN: Jasmine rice Homnil; GT: Green tea

茶提取物中酚类化合物的鉴定与定量

通过高效液相色谱(HPLC)和液相色谱质谱分析(LC-MS)对米叶茶连续提取物中酚类化合物进行了鉴定(表2)。除了丙酮提取物中酚类化合物的浓度更高外，两种茉莉米叶茶丙酮提取物和乙醇提取物的HPLC图谱非常相似(图2和3)。KM和HN中存在大部分化合物在326 nm波长的高效液相色谱图上可以看到茶(图2)。HPLC峰的光谱特征显示，绿原酸(4-和5-绿原酸)是两种茉莉花米茶的主要酚类化合物。在280 nm处发现了绿茶提取物中的大部分化合物，并鉴定出没食子酸、儿茶素和表没食子儿茶素(图3C)。KM水提物中没食子酸也是主要的酚类化合物(图4A)，而HN水提物中绿原酸是主要的酚类化合物(图4B)。与HPLC色谱图一致，质谱数据证实，羟基肉桂酸是两种茉莉米叶茶中鉴定出的主要酚类化合物(表2)p-香豆酸是KM丙酮和乙醇提取物的主要酚类化合物，分别占总酚类化合物的36%和34%(表2)。在HN乙醇和水提取物中鉴定的绿原酸分别占总酚类化合物的59%和54%。还检测到大量的没食子酸和儿茶素(表2)。GT提取物的主要化合物是儿茶素和没食子儿茶素没食子酸表酯(图2-4)。Dai和Mumper[20]报道乙醇是低分子多酚的高效提取溶剂，而丙酮水溶液更适合高分子黄烷醇的提取。这项研究发现，乙醇和丙酮茉莉花叶茶提取物的酚成分相似(表2)。这些结果表明，在所评估的茉莉花叶茶中，高分子量化合物的含量非常低，或者不存在。报告了类似的结果Eryngium bornmuelleri叶子茶[11]。

图2。从茉莉花米叶和绿茶(A: Khao Dok Mali 105 (KM);B: Homnil (HN);C:绿茶(GT);1:没食子酸;2:儿茶素;3:4 -绿原酸;4:5 -绿原酸;5:咖啡酸;6:香豆酸;7:没食子儿茶素没食子酸酯

图3。茉莉花米叶和绿茶(A: Khao Dok Mali 105 (KM);B: Homnil (HN);C:绿茶(GT);1:没食子酸;2:儿茶素;3:4 -绿原酸;4:5 -绿原酸;5:咖啡酸;6:香豆酸;7:没食子儿茶素没食子酸酯

图4。茉莉花米叶和绿茶(A: Khao Dok Mali 105 (KM);B: Homnil (HN);C:绿茶(GT);1:没食子酸;2:儿茶素;3:4 -绿原酸;4:5 -绿原酸;5:咖啡酸;6:香豆酸)

表2。在茉莉米幼叶茶、Khao Dok Mali 105和Homnil品种以及参考样品绿茶中鉴定出酚类化合物

酚类化合物	女士/小姐		浓度(mg/g提取物)
	(M + 1)+/ (m - 1)-	片段 (m / z) (+ / -)	丙酮	乙醇	水
公里
p香豆酸	——/ 163	——/ 119	52±4.2	11.2±0.6	T
没食子酸	——/ 169	——/ 125	7.2±0.1c	13.0±0.6b	32.1±1.4一个
咖啡酸	——/ 179	——/ 135	19.2±1.8一个	9.6±0.2b	ND
儿茶素	——/ 289	——/ 245	17.1±0.5一个	4.4±0.0b	T
儿茶素	——/ 305	——/ 225	ND	ND	ND
绿原酸	——/ 353	——/ 191	54.7±6.4一个	25.3±1.1b	T
接下来的
p香豆酸	——/ 163	——/ 119	36.8±2.5一个	16.3±0.9b	3.3±0.0c
没食子酸	——/ 169	——/ 125	8.1±0.4b	12.6±0.0一个	13.8±0.4一个
咖啡酸	——/ 179	——/ 135	15.1±0.6一个	12.6±1.0b	4.2±0.2c
儿茶素	——/ 289	——/ 245	28.4±1.6一个	3.6±0.1b	1.6±0.0c
儿茶素	——/ 305	——/ 225	ND	ND	ND
绿原酸	——/ 353	——/ 191	8.2±0.4c	65.3±1.7一个	26.6±1.8b
GT
p香豆酸	——/ 163	——/ 119	ND	ND	ND
没食子酸	——/ 169	——/ 125	ND	20.1±0.9	24.6±1.2
咖啡酸	——/ 179	——/ 135	ND	ND	ND
儿茶素	——/ 289	——/ 245	32.5±1.4b	55.4±3.8一个	8.0±0.0c
儿茶素	——/ 305	——/ 225	52.5±3.9b	98.2±6.5一个	T
绿原酸	——/ 353	——/ 191	ND	ND	ND

T:痕迹;ND:未检测到;KM:茉莉米Khao Dok Mali 105;HN:茉莉花米;GT:绿茶

气相色谱质谱法(GCMS)鉴定挥发性化合物

挥发性化合物在食品开发中是必需的，因为它们能提供令人愉悦的气味。此外，它们还具有抗氧化、抗炎、抗癌和抗肥胖等药理活性[21,22]。茉莉花米以其诱人的香气而闻名，因此研究了茉莉花米叶茶中挥发性化合物的存在。KM、HN和GT挥发物的GC-MS图谱显示，在所有茶叶中都存在类似的化合物(图5-7)(表3和表4)。KM丙酮提取物的主要挥发物是三十六烷，其次是2,6-二叔丁基酚和十五烷。在KM乙醇提取物中以石竹酚和2,6-二叔丁基酚为主。KM水提液中鉴定出5种化合物:二十烷、3-乙基-5-(2-乙基丁基)十八烷、二十烷、十一-乙基丙基和十二烷。在丙酮和乙醇提取物中也发现了相同化合物的痕迹(表3)。在HN丙酮提取物中发现了二氢锕内酯，而在乙醇和水基提取物中分别检测到十二烷异构体和十二烷(表3)。在HN和KM水基提取物中发现了三种挥发性化合物(三十六烷、十二烷和2,6-二叔丁基苯酚)。在GT丙酮提取物中鉴定出5种挥发性化合物，包括三十六烯、1-十二烯、十二烷、1-十四烯和2,6-二叔丁基酚。绿茶乙醇和水基提取物分别含有3种化合物(三十六烷、十二烷、α-茴香乙酸酯)和4种化合物(十二烷、1-十四烯、2,6-二叔丁基酚、二十烷)(表4)。结果表明，KM和HN水基提取物中存在类似的挥发性化合物。这一发现表明，这些挥发性化合物将在冲泡过程中释放到茶中，并可能影响其感官特性和消费者的偏好。

图5。茉莉米Khao Dok Mali 105 (KM)冻干连续提取物中挥发性化合物的总离子谱(A:丙酮;B:乙醇;C:水;1:十三烷;2:十二烷;3:十五烷;4:石竹烯;5: 2; 6-Di-tert-butylphenol;6: 3-乙基-5-(2-乙基丁基)十八烷;7:二十四烷; 8: Nonadecane l; 9: Eicosane; 10: Heneicosane 11-(1-ethylpropyl))

图6。茉莉花米(HN)冻干连续提取物中挥发性化合物的总离子谱(A:丙酮;B:乙醇;C:水;1:十三烷;2: Cyclohexasiloxane;dodacamethyl -;3:十二烷;4:环己酮;4-hydroxy-4-methyl;5:十二烷异构体; 6: Cycloheptasiloxane; tetradecamethyl; 7: Tetradecane; 8: 2;6-Di-tert-butylphenol l; 9: Dihydroactiniolide)

图7。绿茶(GT)连续提取液中挥发性化合物的总离子分布(A:丙酮;B:乙醇;C:水;1:十三烷;2: 1-Dodecene;3: Odecane;4: 1-Tetradecene;5: Alpha-Fenchylacetate;6: 2; 6-Di-tert-butylphenol;7:二十烷)

表3。Khao Dok Mali 105茉莉米幼叶茶中挥发性化合物的鉴定

不。	保留 时间	化合物名称	分子 公式	分子 质量	碎片离子	相对浓度(%)
						丙酮	乙醇	水
1	15.494	十三烷	C13H28	184	57 71 85 99 127 155	35.91	ND	ND
2	20.169	十二烷	C12H26	170	57 71 85 99 127 170	ND	ND	5.19
3.	21.909	十五烷	C15H32	212	57 71 85 99 141 212	3.97	T	T
5	29.181	石竹烯	C15H24	204	55 69 79 93 133 147 189	ND	36.48	ND
6	31.727	2, 6-Di-tert-butylphenol	C14H22O	206	57 74 91 163 191 206	9.12	18.14	T
7	37.553	(3-Ethyl-5) - 2-Ethylbutyl十八烷	C26H54	366	57 71 85 99 183 281	ND	ND	17.30
8	40.219	二十四烷	C24H50	338	43 57 71 85 99 113 141 155	ND	ND	10.93
9	40.356	十九烷	C19H40	268	43 57 71 85 99 113 154	T	ND	T
10	42.628	二十烷	C20.H42	282	43 57 71 85 99 113 127	ND	ND	17.68
11	45.100	二十一烷11 - (1-ethylpropyl)	C26H54	366	57 71 85 99 295	ND	ND	6.70

T:痕迹;ND:未检测到

表4。茉莉叶茶和参考样品绿茶中挥发性化合物的鉴定

不。	保留 时间	化合物名称	分子 公式	分子 质量	碎片离子	相对浓度(%)
						丙酮	乙醇	水
茉莉花米
1	15.495, 19.883	十三烷	C13H28	184	57 71 85 99 127 155	ND	ND	11.17
2	19.883	Cyclohexasiloxane dodacamethyl -	C14H36O6如果6	444	73 117 147 207 341 429	ND	ND	3.02
3.	20.175	十二烷	C12H26	170	57 71 85 99 127 170	ND	ND	23.12
4	20.478	环己酮,4-hydroxy-4-methyl	C7H12O2	128	71 85 95 110 128	28.47	ND	ND
5	21.897	十二烷异构体	C12H26	170	57 71 85 99 127 170	T	21.21	8.90
6	24.163	Cycloheptasiloxane, tetradecamethyl	C14H42O7如果7	518	73 147 221 281 327 415 503	ND	ND	3.37
7	26.034	十四烷	C14H30.	198	57 71 85 99 198	ND	ND	11.35
8	31.722	2, 6-Di-tert-butylphenol	C14H22O	206	57 74 91 163 191 206	10.82	T	T
9	36.546	Dihydroactiniolide	C11H16O2	180	67 111 137 180	47.01	ND	ND
绿茶
1	15.483	十三烷	C13H28	184	57 71 85 99 127 155	10.82	29.15	ND
2	20.238	1-Dodecene	C12H24	168	55 69 83 97 168	21.25	ND	ND
3.	21.909	十二烷	C12H26	170	57 71 85 99 127 170	2.61	7.78	7.01
4	26.109	1-Tetradecene	C14H28	196	55 69 97 196	20.53	ND	9.88
5	28.249	Alpha-Fenchylacetate	C12H20.O2	196	69, 80, 95, 121, 136, 154, 196	ND	5.60	ND
6	31.716	2, 6-Di-tert-butylphenol	C14H22O	206	57 74 91 163 191 206	12.56	ND	3.10
7	42.714	二十烷	C20.H42	282	43 57 71 85 99 113 127	ND	ND	17.89

T:痕迹;ND:未检测到

脂肪酸组成鉴定

在生命细胞中，食物中的脂肪酸(羧酸)被用来将营养物质的生化能量转化为三磷酸腺苷(ATP)。脂肪酸的气相色谱色谱分析显示，所有被评估的茶叶中都存在类似的脂肪酸(表5)。此外，在所有提取物类别(丙酮、甲醇和水)中都检测到类似的化合物。kkm丙酮提取物中含有α-亚麻酸、棕榈酸和亚油酸。KM和HN乙醇提取物和水基提取物的脂肪酸组成具有可比性(表3)。KM和HN乙醇提取物中还含有α-亚麻酸、棕榈酸和亚油酸。也有硬脂酸的痕迹。水提液中含有α-亚麻酸、棕榈酸和亚油酸。除了在丙酮和乙醇提取物中检测到的疫苗酸和在水提取物中检测到的硬脂酸外，在GT提取物中发现了类似的脂肪酸组成和含量。小林和他的合作者[23]表示，绿茶中主要的脂肪酸衍生物:C6和C9醇和醛是绿茶清新气味的关键因素。

表5所示。对茉莉米嫩叶茶、Khao Dok Mali 105 (KM)和Homnil (HN)品种和参考样品绿茶(GT)的丙酮、乙醇和水基提取物的脂肪酸组成进行了鉴定

化合物	丙酮(A)	乙醇(E)	水(W)
公里
棕榈酸	21.10	25.53	27.17
硬脂酸	T	2.52	T
Vaccenic酸	ND	ND	ND
亚油酸	16.6	21.33	22.66
α亚麻酸	56.74	47.62	44.73
接下来的
棕榈酸	21.81	25.39	26.90
硬脂酸	T	T	4.02
Vaccenic酸	ND	ND	ND
亚油酸	15.97	19.70	19.43
α亚麻酸	57.79	49.37	46.11
GT
棕榈酸	24.11	29.63	33.13
硬脂酸	T	T	23.92
Vaccenic酸	6.72	9.38	T
亚油酸	17.76	21.97	7.64
α亚麻酸	45.12	33.99	20.12

T:痕迹;ND:未检测到

酶抑制活性

肥胖——全球健康的最大威胁之一，目前正在用合成的消化酶抑制剂治疗，如阿卡波糖和奥利司他。由于摄取合成抑制剂可能会导致不必要的副作用，研究人员的注意力转向了来自植物的天然化合物，这些化合物提供了更安全的替代方案。本研究评估了茉莉米叶茶的酶抑制活性。

α -淀粉酶和胰脂肪酶抑制活性

KM和HN茶提取物对α-淀粉酶活性的抑制呈剂量效应(数据未显示)。KM丙酮提取物的抑菌活性是KM乙醇提取物的2.3倍，KM水基提取物的9.8倍。丙酮提取物和乙醇提取物对α-淀粉酶的抑制活性相当，是水提取物的6.6倍。所有评价样品的水提取物的α -淀粉酶抑制活性具有可比性(表6)。

kkm的丙酮提取物和GT的丙酮提取物对胰腺脂肪酶的抑制作用最强且相似。HN丙酮提取物对胰脂肪酶的抑制活性降低3.5倍(表6)。KN和HN的乙醇提取物和水提取物对胰脂肪酶的抑制活性相似。茉莉花米叶茶的脂肪酶抑制活性低于普通茶Eremochloa ophiuroides(蜈蚣草)叶甲醇提取物(IC₅₀33.6±2.0 μM = 0.019±0.001 mg/mL)[24]。

绿原酸具有明显的α-淀粉酶抑制特性。在以乙醇和丙酮为基础的茉莉花叶茶提取物中，高水平的绿原酸的存在可能是本研究中观察到的酶抑制的原因。KM和HN水基提取物中较低的绿原酸水平与较低的IC相关₅₀值(表6)。膳食多酚的结构影响其α-淀粉酶抑制作用(肖et al。, 2013)。这种效应随着类黄酮的羟基化和/或与4-羰基结合的不饱和2,3键的存在而增强。黄酮类化合物的糖基化以及甲基化和甲氧基化削弱了抑制作用[25,26]。同样，在本研究中，从KM和HN米茶中提取的富含绿原酸的提取物表现出明显的酶抑制活性。这些活性与土耳其常用药用植物茶[11]相当。

表6所示。茉莉米嫩叶茶、Khao Dok Mali 105 (KM)和Homnil (HN)品种和参考样品绿茶(GT)丙酮、乙醇和水基提取物的a-淀粉酶和胰腺脂肪酶抑制活性

茶 抑制活性样本		丙酮(A)	乙醇(E)	水(W)
公里
	a-amylase(集成电路50；毫克/毫升)	73.96±2.7一个	168.65±19.2b	724.99±21.3c
	阿卡波糖e (mM/g提取物)	656.22±48.0一个	288.87±32.8b	66.85±2.03c
	胰脂肪酶(IC50毫克/毫升)	65.7±5.8一个	329.6±0.7b	870.9±33.6c
	奥利司他e (mM/g提取物)	42.2±3.9一个	8.4±0.0b	3.2±0.1c
接下来的
	a-amylase(集成电路50；毫克/毫升)	113.6±7.07一个	116.2±0.05一个	752.48±0.67b
	阿卡波糖e (mM/g提取物)	426.92±26.6一个	415.15±2.01一个	64.32±0.06b
	胰脂肪酶(IC50毫克/毫升)	227.0±1.4一个	353.8±5.1b	821.0±14.9c
	奥利司他e (mM/g提取物)	12.2±0.1一个	7.8±0.1b	3.4±0.1c
GT
	a-amylase(集成电路50；毫克/毫升)	93.86±2.54一个	102.4±0.79b	700.02±5.18c
	阿卡波糖e (mM/g提取物)	515.92±13.95一个	472.48±3.59b	69.51±0.02c
	胰脂肪酶(IC50毫克/毫升)	63.3±1.2c	147.4±3.3b	788.9±6.9一个
	奥利司他e (mM/g提取物)	43.6±0.8一个	18.7±0.4b	3.5±0.0c

^一个集成电路_50：最大抑制浓度的一半
同一原始数据中不同字母的平均值在(p< 0.05);N = 3

结论

茉莉米叶的丙酮和乙醇提取物主要含有绿原酸，并伴有其他羟基肉桂酸(p-香豆酸，咖啡酸)和酚酸(没食子酸)。KM的丙酮基提取物和HN的乙醇基提取物主要含有绿原酸，并表现出相当的α-淀粉酶抑制活性。本研究表明，茉莉叶茶提取物可能通过抑制相关消化酶来调节糖和脂肪的代谢。嫩茉莉叶可作为一种新型功能茶的替代植物来源。

确认

作者感谢泰国拉贾曼加拉理工大学(RMUTI)素林校区的农业与技术学院和土耳其Van Yuzuncu Yil大学药学院为开展这项研究提供了必要的设施和资金支持。

利益冲突

作者声明在进行这项研究或准备发表这篇文章时没有利益冲突。

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