意大利维博瓦伦西亚省卫生当局的儿科医生
Università大希腊，医学和外科科学，卡坦扎罗，意大利
DOI: 10.15761 / CCRR.1000454
背景疫苗与神经炎症的关系具有一致的分子生物学基础。在最近的一篇论文中，我们已经分析了这种关系。
假设：在本文中，我们获得了更多的证据来支持疫苗与神经炎症之间的联系。此外，我们还发现了支持HPV疫苗与某些不良事件（AE）之间联系的分子基础。注射疫苗后表达的外周促炎细胞因子（IL-1β、IL-6和TNF-α）可到达大脑，并可在小胶质细胞激活后引起神经炎症。注射疫苗后，可能出现明显的全身免疫激活，并伴有反应性脑炎症的迹象，如急性哭闹、发烧、躁动和不进食。这是对大脑危险的警告，在造成不可逆转的损害之前，我们应该反思一下。我们还假设存在由HPV疫苗注射后强烈表达的促炎细胞因子引起的疫苗接种后炎症综合征。此外，对影响世界上许多女孩的慢性疼痛的分子解释，包括日本女孩的复杂区域疼痛综合征（CRPS）。
结论:所有的疫苗都能引起神经炎症。HPV疫苗可引起以慢性疼痛和神经炎症为特征的接种后炎症综合征。在这种情况下，中枢敏感化现象是导致所有与慢性疼痛相关的症状的原因。在接种HPV疫苗后分泌的促炎细胞因子的强烈表达，导致接种HPV的女孩产生不可逆的神经系统结果。
疫苗接种后炎症综合征、神经炎症、小胶质细胞激活、疫苗与自闭症、ASD、自闭症谱系障碍、HPV疫苗、HPV疫苗不良事件、HPV疫苗AEs、日本女孩复杂区域疼痛综合征(CRPS)、CRPS I型、慢性疼痛、中枢敏化。
疫苗是一项重要的卫生政策工具，改变了传染病的历史。近年来，婴儿注射疫苗的数量有所增加，许多疫苗是在婴儿出生后的第一年接种的，当时免疫系统和中枢神经系统尚未发育完成。此外，免疫系统和大脑终生相连，无论疾病还是健康都相互依赖。此外，与此同时，每一种免疫挑战都是对大脑的挑战，每一种疫苗接种都是对两者的挑战。每次注射疫苗，无论哪种类型，都会产生不同数量的促炎细胞因子，这既会产生局部效应，也会在远离生产地点的地方产生。
由于注射疫苗后产生的外周细胞因子能够到达中枢神经系统，我们在最近的论文[2]中假设，这些细胞因子可以对小胶质细胞(中枢神经系统的巨噬细胞)产生作用。小胶质细胞是对免疫挑战的主要应答者，也是大脑中细胞因子和趋化因子的主要生产者。小胶质细胞活化是急性神经炎症发生的初始细胞事件。此外，由于认知功能和免疫功能不可分割地联系在一起，发育性免疫挑战的时机对于决定大脑和行为的长期结果至关重要。
因为疫苗接种后不良事件(AEs)与生命的不同时期(儿童或青少年)有关，与涉及的不同神经区域(大脑或脊髓)有关;在这篇文章中，我们将讨论asd的退化形式，并提出我们的假设，即由HPV疫苗引发的一种新的疫苗接种后炎症综合征。在我们的讨论中，我们将只讨论分子生物学，我们的工作不适合与疫苗的流行病学研究进行不可能的比较。在这种情况下，我们的任务将是描述将疫苗注射与这两个临床实体联系起来的生物学上的合理性。因此，我们也将继续回顾发表在这两个主题上的具体科学文献，以找到支持我们的科学假设的证据。
在我们之前的文章[2]中，我们讨论了ASD的免疫学方面，在这篇文章中，我们报告了其他的发现。ASD是一种广泛性神经发育疾病，其特征是在交流和社会互动方面的各种障碍，以及兴趣限制和重复行为。在退化性自闭症的情况下，儿童出生时是健康的，有明显的正常发育，已经达到了他们的发展里程碑(在他们的医疗记录中清楚地记录了)，并在接受预定的[5]疫苗后不久突然出现类似自闭症的症状。
有越来越多的工作支持炎症细胞因子在ASD中的作用。ASD病因学研究的一个新热点表明，神经炎症是[5]生物模型的主要候选对象之一。ASD患儿血浆IL-1β、IL-6和IL-8水平升高，并与自闭症退化、沟通障碍和行为异常相关[6,7,8]。Vargas[9]在自闭症患者的大脑皮层、白质和小脑中表现出活跃的神经炎症过程。免疫细胞化学研究显示小胶质细胞[5]明显激活。
由于大脑和免疫系统密不可分地交织在一起，免疫激活事件会影响发育过程的长期轨迹和功能[10].出生时，新生儿免疫系统面临着从无菌环境转移到充满病原体、微生物和毒素的世界的严峻挑战，在那里它必须有效地保护新生儿。早期感染不是激活免疫系统并影响发育中大脑和行为的唯一挑战[1]，疫苗接种是重要的免疫挑战。
1.1基因与环境
参与免疫过程的基因网络在ASD患者的大脑中过度表达[11,12]。人类的沟通和行为模式是由大量的基因和这些基因之间复杂的管弦乐队般的沟通控制的，这些基因形成和组织在人类胚胎发育的早期阶段[13]。
正在发育的人类大脑极容易受到环境中有毒物质[14]的影响。此外，胎儿大脑可能是一些合成化学物质的主要目标，这些化学物质可能导致突变和/或中断胎儿大脑发育的良好模式。任何干扰胎儿大脑发育的环境因素甚至在出生后都会造成严重的不良影响。事实上，污染物可以诱导胎儿脑细胞[13]基因突变。这些影响取决于暴露的时间，受污染化学混合物的组成，以及胎儿在特定发育阶段的特殊脆弱性。例如，对细胞祖细胞的损害会导致细胞成分的更大损失，因为依赖于该祖细胞的细胞群已经消失。此外，表观遗传修饰可以使一种类型的脑前神经元转变为另一种类型的[15]。表观遗传变化在不改变基因型的情况下产生表型的变化。柴油废气等毒素、吗啡、安非他命和酒精等药物可以触发TLR信号[16]。不同的环境刺激可以直接或间接地通过报警通路触发TLR信号。 HMGB1 is a ubiquitous component of chromatin which can be released by necrotic cells, and is actively secreted by cells undergoing an inflammatory challenge or biological stress. HMGB1 activates microglia in the brain via TLR4 [16].
1.2 ASD患者的外周细胞因子
促炎细胞因子，包括IL-1β、IL-6和TNF-α，似乎在免疫和神经系统之间的通信中处于前沿地位，在正常脑功能或有害的和与脑疾病相关的生理和神经保护作用中发挥双重作用，特别是当[17]浓度升高时。细胞因子谱的改变一直与产后儿童ASD有关。细胞因子可能通过影响神经递质功能、神经内分泌活动、神经发生和脑回路的改变来影响行为。外周细胞因子信号被认为通过三种途径进入大脑:体液、神经和细胞[19,20]。血脑屏障(BBB)对细胞因子(主要是IL-1、IL-6和TNF-α)具有能量依赖、饱和、载体介导的转运系统[21,22]。当构成血脑屏障的内皮细胞与这些外周细胞因子接触时，它们向脑实质分泌各种免疫分子，包括NO、前列腺素E2、IL-1和IL-6，这些都是已知的影响神经功能的促炎细胞因子[23]。
外周细胞因子进入大脑决定了不同的影响。大脑识别促炎细胞因子IL-1α、IL-1β、TNF-α和IL-6等细胞因子作为疾病的分子信号[24].IL-1β和IL-6的升高与刻板行为的增加有关。正常水平的IL-1β及其IL-1ra受体拮抗剂是实现正常发育和正常脑功能所必需的。TNF-α是炎症的中枢调节因子，在ASD儿童的脑脊液中升高[25]。
1.3小神经胶质细胞
小胶质细胞与神经元、突触和血管有关。小胶质细胞是大脑的多功能免疫细胞，参与神经实质的防御和大脑的免疫反应．小胶质细胞也集中于血脑屏障功能不完全的部位，如室周器官或终板的血管瀑、连合下器官、穹窿下器官、瘤后区、垂体后叶、正中隆起、松果体和脉络膜丛[26]。变形虫样小胶质细胞去除不适当的多余轴突和细胞碎片。[27]最近的一项研究表明，在发育中的胚胎大脑中，小胶质细胞在突触修剪和回路发育中起着重要作用。
据报道，神经胶质激活及其先天免疫反应与自闭症有关。据报道，小胶质细胞的激活存在于自闭症患者的整个生活中(包括早期发育阶段)，并在自闭症的发展中起着关键作用。对自闭症患者大脑进行的尸检研究显示，小胶质细胞[28]的显著激活和持续的神经炎症反应是由于皮质、皮质下白质以及小脑的小胶质细胞激活。自闭症患者的大脑表达了大量的促炎细胞因子。
在激活状态下，小胶质细胞会分泌促炎细胞因子/趋化因子，而像MCP-1这样的促炎趋化因子的存在，是由于活化的小胶质细胞或单核细胞/巨噬细胞聚集到皮质神经元异常[28]位点导致自闭症的发病。此外，由激活的小胶质细胞释放的兴奋性谷氨酸毒素也很重要，因为大脑中过量的谷氨酸会损害神经元和突触连接[30]。小胶质细胞还通过分泌毒性因子如一氧化氮(NO)、活性氧(ROS)和细胞因子[31]发挥细胞毒性作用。
1.4小胶质细胞活化
在全身免疫激活后，小胶质细胞的激活非常迅速，通常在几分钟内就会导致免疫兴奋性毒性。在刺激下，小胶质细胞也产生大量的细胞因子，其中一些已知具有神经营养和神经保护功能[31]。事实上，已知IL-10和TGF-β具有抗炎活性，IL-6也具有神经营养活性和促炎活性[31]。
小胶质细胞可以通过不太强烈的初始免疫刺激从静息状态转换为启动状态。例如，轻度头部损伤或缺氧可将小胶质细胞从静息状态转换为酶和基因激活上调的功能状态，但活性免疫分子prima促炎细胞因子和趋化因子不会释放[32]。在第二次免疫刺激下，这些启动的小胶质细胞开始释放比未启动的小胶质细胞浓度高得多的促炎细胞因子和趋化因子[32]。
全身性免疫刺激可以使小神经胶质细胞发育，这意味着随后的大脑紊乱或全身性免疫激活会在大脑[32]内引发放大的免疫反应。一生中的免疫事件，接触神经毒性金属，接触农药/除草剂和杀真菌剂，头部损伤，以及其他因素，都可能导致小胶质细胞启动和激活相关的事件，导致中枢神经系统最脆弱部位的神经元逐渐丧失，如下丘脑，颞叶(海马、纹状体、杏仁核和内嗅皮层)和前额叶皮层[32]。
在婴儿或幼儿中，启动事件可能来自多个来源，如母亲在怀孕期间接种疫苗或宫内或出生后早期感染[33,34]。在其他情况下，启动事件可能发生在第一次接种疫苗时，通常是在出生时(乙型肝炎)。一旦启动，后续接种，特别是在前一次接种的几个月内，将触发小胶质细胞的完全激活，并在发育中的大脑中导致异常的通路发育[35-38]。虽然自然感染也会产生这种神经破坏反应，但接种疫苗会产生更高水平的免疫激活，免疫反应可以比自然感染持续更长时间——有时持续数年[32]。
已经证实，外周炎症可以促进大脑[39]的免疫反应。与长期以来认为免疫记忆只存在于适应性免疫系统细胞的假设相反，最近的证据表明髓细胞也具有记忆效应[40,41]。例如，某些免疫刺激训练血液单核细胞对随后的免疫损伤产生增强的免疫反应[42,43]。相比之下，其他刺激则诱导免疫耐受/抑制对后续刺激的炎症反应[43,44]。
先天免疫记忆在体外可持续数天，在体内循环单核细胞可持续长达3个月，在培养细胞中由表观遗传重编程介导，在体内染色质变化也很明显[43,45,46]。然而，虽然训练可能对外围有益，因为增强了病原体消除[47,48]，而耐受可能有害，因为免疫抑制[44]导致较高的感染率，训练促进了[49]，而耐受减轻了神经病理。
总之，先天免疫记忆是髓细胞可塑性的一个重要机制，它发生在对环境刺激的反应中，并改变随后的免疫反应[49]。免疫印迹可分为训练和耐受两种类型。这些是表观遗传介导的，分别增强或抑制随后的炎症，[49]。外周炎症刺激诱导急性免疫训练和脑内耐受，导致小胶质细胞的不同表观遗传重编程，持续至少6个月。外周应用的单个细胞因子也可能引起大脑[49]中的免疫记忆效应。
1.5危险的氧化物种
小胶质细胞分泌的许多有毒物质都是活性氧和氮种(RONS)，包括超氧阴离子自由基、过氧化氢、一氧化氮、过氧亚硝酸盐和二氧化氮(Blaylock, 2004)。超氧化物是由NADPH氧化酶产生的。小胶质细胞产生的RONS不仅能够杀死健康的神经元，还能够引起氧化应激，并产生启动小胶质细胞进一步激活(Kaur和Eng-Ang, 2012)。活性氮是由一氧化氮合酶产生的，包括在小胶质细胞激活[31]时上调的诱导亚型(iNOS)。iNOS仅在某些条件下(如缺氧损伤和感染[31])被激活的小胶质细胞炎症时表达。活性氮具有神经毒性，能够破坏血管系统和线粒体呼吸链。NO在大脑中有多种作用，从调节血液流动到成为一种强大的神经毒素。这些效应取决于细胞来源和产生[31]的量。小胶质细胞中iNOS和吞噬细胞NADPH氧化酶同时激活导致过氧亚硝酸盐的形成，过氧亚硝酸盐是一种非常强大的氧化剂[31]。
在疫苗接种后不良反应(AEs或AEFI)领域，存在两个主要问题:
2.1第一个问题:世卫组织
2018年1月，世卫组织编制了一份关于如何对首字母缩写为AEFI的不良反应进行分类的文件。世卫组织声明：“因果关系评估是对AEFI病例数据的系统回顾;它的目的是确定事件和接种疫苗之间的因果关系的可能性。”[50]。它还指定了:“在个人层面，通常不可能根据单一的AEFI病例报告，在特定的AEFI和特定的疫苗之间建立明确的因果关系。”[50]。由于所有不良反应都是病例报告（因为它们发生在一个接种过疫苗的个体身上），因此排除这些不良反应将导致所有接种后不良反应的消除。此外，报告病例构成了一系列报告，这些报告将永远不会存在于排除个别病例报告的评估系统中。
一个实际的例子表明，AEs的报告并没有在监管机构的报告中结束。这是两例由MMRV疫苗(麻疹、腮腺炎、风疹和水痘)引起的短暂中性粒细胞减少症，在向意大利药品管理局[52]报告后发表了[51]，但在该局报告[53]中没有出现。
2.2第二个问题：疫苗数据表
以一种在欧洲广泛使用的疫苗[54]为例，我们立即注意到不良反应被分类报告了单一症状的频率，但没有关于同一受试者联合反应的数据(GSK, 2018)。六角Infanrix适用于婴幼儿白喉、破伤风、百日咳、乙型肝炎、以下是临床研究(来自16000多名受试者的数据)和上市后监测期间报告的药物相关不良反应(GSK, 2018)。
非常常见的不良事件(≥1/10剂量)
在同一受试者中出现所有这些症状表明，疫苗注射后分泌的促炎细胞因子产生了一种接种后反应性脑炎症。
2.3接种后反应性脑炎症
在生命的头两年里，特别是在冬季的几个月里，免疫系统经常会遇到一些传染性的挑战。这些是在免疫挑战的基础上增加的免疫刺激，与疫苗接种计划的采用有关。
在注射疫苗后，特别是在一次就诊期间给予幼儿多剂量疫苗时，可能出现明显的全身免疫激活，提示反应性脑炎症的迹象，如急性哭闹、发烧、烦躁不安和不进食[32,36]。当这种反应发生时，有必要暂停接种疫苗至少6个月，让先天免疫系统"忘记它在大脑中的容忍度已经变得如此之小"．否则，神经炎症可能会产生严重的损害，特别是如果小胶质细胞继续受到每次接种后产生的周围细胞因子的压力。这是对大脑的警告，可以选择继续接种疫苗(危及幼儿的健康)，也可以选择停止接种疫苗“非nocere运转”．
人类乳头瘤病毒疫苗(HPV疫苗)既不安全也不有效，许多科学文献声称。这些疫苗是抗病毒疫苗，但不是抗肿瘤疫苗[2]，在我们之前的出版物中，我们讨论了这些疫苗[2]的所谓安全性和有效性问题。在本文中，我们将讨论支持我们的假设的分子生物学，即HPV疫苗引发的一种新的接种后炎症综合征。
让我们记住,这是表明,接种疫苗的年轻女性有更高的患病率感染人乳头状瘤病毒类型(癌症类型有高和低风险),和一个高流行的病毒感染的高风险非疫苗类型,尽管疫苗接种的患病率较低类型[55]。
3.1不良反应史
在日本，HPV疫苗接种期与疫苗接种患者出现HPV疫苗相关症状的时间重叠，包括慢性局部疼痛综合征(CRPS)和自主和认知功能障碍[56]。Brinth[57]报道了一些与HPV疫苗接种密切相关的站立不耐受、头痛、疲劳、认知功能障碍和神经性疼痛综合征患者的特征。荷兰的Lareb公司收到了大量关于接种Cervarix®疫苗后出现长效AEs的报告[58,59]。
3.2 HPV疫苗与疼痛
Cervarix包装说明书[54]中报告：20%的受试者疼痛，20%的受试者有疲劳感。Gardasil 4包装说明书[60]中报告：头痛、发烧、恶心和头晕；以及局部注射部位反应（疼痛、肿胀、红斑、瘙痒和瘀伤）发生在服用Gardasil后。在Gardasil 9包装插页[61]中，据报告，几乎90%的接种疫苗的女孩出现疼痛。
3.3 HPV疫苗与疼痛:分子基础
接种疫苗总是会引起炎症。在炎症过程中，组织驻留和招募的免疫细胞分泌分子介质，作用于痛觉神经元的周围神经末梢，产生疼痛敏化。疼痛感受器外周神经末梢具有感受器和离子通道，可检测炎症释放的分子介质。痛觉神经元表达免疫细胞源性细胞因子、脂类、蛋白酶和生长因子的受体。第一剂Gardasil 4®疫苗后，循环血浆细胞因子/趋化因子水平高，而第一剂和第三剂Cervarix疫苗后促炎细胞因子水平升高[62,63,64]。
综上所述，疫苗注射后产生的促炎细胞因子能够刺激疼痛感受器神经元上的特定受体。事实上，肥大细胞、巨噬细胞和中性粒细胞产生的TNF-α、IL-1β和IL-6也可致敏痛觉神经元[63]。所有这些促炎细胞因子都是在注射疫苗后产生的。
3．4疼痛处理
了解疼痛过程是确定HPV疫苗引起的疫苗接种后炎症综合征根源的基础。这是一条复杂的途径，从疫苗注射部位的促炎细胞因子表达开始，然后到达体感皮层。
3．5痛觉受器
生理疼痛是由特殊的感觉痛觉纤维引起的，这些纤维支配周围组织，只有在有害刺激下才会被激活[61]。痛觉感受器的刺激决定了动作电位的开始，动作电位沿着痛觉Aδ和C纤维轴突传播，通过背根神经节(DRG)到达脊髓背角的轴突终端[63]。在没有神经损伤的情况下，短时间的低频c纤维刺激足以激活小胶质细胞，导致行为痛觉过敏[64]。
痛觉感受器可以直接对细胞因子做出反应“感觉”炎症组织中的免疫反应;因此，从本质上说，它们不仅是有害刺激探测器，也是炎症传感器[65]。此外，TNF-α是炎症反应的关键调节因子，参与促痛觉药物的增加[64]。
3.6二级神经元
参与疼痛回路的第二级背角神经元存在于两个大致特征的群体中。在脊髓突触后，第二个神经元在脊髓束中旅行，穿过中线，向上跑到丘脑，在那里它们再次突触，下一个神经元旅行到体感皮层。在这里，脉冲在不同的区域被处理，统称为“疼痛矩阵”所以疼痛的本质是可以感知的。
3.7神经性和炎性疼痛
周围神经损伤激活脊髓小胶质细胞。这导致启动中枢敏化和神经性疼痛的背角神经元特性的持久改变[66]。反之，炎症性疼痛是由组织损伤/炎症引起的。两者均表现为损伤部位和相邻正常组织的超敏反应[67]。
3.8慢性疼痛
现在已经确定慢性疼痛，如炎症性疼痛、神经性疼痛和癌症性疼痛，是一种神经可塑性的表达，在外周神经系统中作为外周增敏[68,69]，在中枢神经系统(CNS)中作为中枢增敏[69,70]。
慢性疼痛中感知和疼痛管理的规则发生变化。事实上，在外周水平，伤害感受器经历致敏和高兴奋性（外周致敏）；而在中枢水平，脊髓、脑干和皮层神经元的兴奋性突触传递增加（中枢致敏），由转录、翻译和翻译后调节引起[71]。
3．9外围的敏化作用
国际疼痛研究协会(IASP)对外周致敏的定义是:“外围痛觉神经元对接受区刺激的反应性增加，阈值降低”[72]。然后，外周敏化诱导传入伤害性神经元的超兴奋性[63]。
3.10中枢敏化
IASP对中枢敏化的定义是:中枢神经系统的痛觉神经元对正常或阈下传入输入的反应性增加[73]。中枢致敏是指中枢神经系统机制对疼痛的放大作用。在细胞水平上，中枢致敏是由多个改变伤害性神经元功能状态的过程造成的[74]。中枢敏感增强对痛觉的反应。高度敏感导致对非疼痛刺激的疼痛感(异常性疼痛)，以及比正常疼痛刺激所预期得到的更大的疼痛(痛觉过敏）.
3.11外周和中枢敏化作用
痛觉感受器的外周增敏对慢性疼痛的发展至关重要[75]，并从急性疼痛过渡到慢性疼痛[74]，而中枢增敏调节疼痛的慢性，导致疼痛扩散到损伤部位以外，并影响疼痛的情绪和情感方面[62]。
3.12脊髓小胶质细胞
脊髓小胶质细胞可对远离脊髓的外周损伤作出反应，在中枢神经系统中产生神经炎症[70]。脊髓神经胶质细胞的活化对于诱发神经性疼痛是必要且充分的[74]。星形胶质细胞具有许多重要功能，如神经递质循环、血脑屏障的形成、细胞外离子浓度的调节和突触传递的调节等[75]。
3.13痛觉受器激活小胶质细胞和星形胶质细胞
在强烈和重复的有害刺激情况下，大量和额外的信号分子从伤害性神经纤维的脊髓末梢释放，导致小胶质细胞和星形胶质细胞的激活[76]，在某些情况下，导致硬脑膜肥大细胞脱颗粒，血管扩张，血液脊髓屏障的损伤，以及t细胞向脊髓实质的募集[77]。这进而导致脊髓炎症介质的释放，包括趋化因子和细胞因子[76]。Hathway[63]研究表明，在没有神经损伤的情况下，短时间的低频c纤维刺激足以激活小胶质细胞，导致行为痛觉过敏。
3.14慢性疼痛中的神经炎症
神经炎症(在外周和中枢神经系统)驱动和维持广泛的慢性疼痛通过中枢敏化是突触可塑性的一种现象，在遭受痛苦后，中枢疼痛通路的神经元反应性增加[78]。神经炎症的一个特征是激活脊髓和大脑中的胶质细胞，如小胶质细胞和星形胶质细胞，导致促炎细胞因子和趋化因子的释放[78]。中枢神经系统中细胞因子和趋化因子的持续增加也促进了影响身体多个部位的慢性广布性疼痛[78]。
3.15 CRPS I型
未确认神经损伤的个体被归类为CRPS I型，而在CRPS II型中，则存在相关且已确认的神经损伤。当在没有神经损伤的情况下出现疼痛时，即为伤害性疼痛。伤害性疼痛一词用于描述正常功能的体感神经系统发生的疼痛o与神经病理性疼痛中的异常功能形成对比[71]。CRPS描述了一系列以持续（自发和/或诱发）为特征的疼痛状态（CRPS I型中的伤害性疼痛）肢体疼痛在时间或程度上似乎与任何已知创伤或其他病变的正常过程不成比例。这种疼痛是局部性的（不在特定的神经区域或皮肤部位），通常以远端为主[79]。CRPS-I的症状包括自发性疼痛（“皮肤灼痛”和“疼痛”）疼痛（指深部组织），以及各种刺激诱发的异常疼痛感觉，包括机械性痛觉过敏、机械性痛觉超敏、冷性痛觉超敏，有时还有热性痛觉过敏。其他症状包括血管舒缩和汗运动调节障碍；皮肤、头发、指甲和骨骼的营养性变化，以及肌张力障碍和其他运动异常[80]。
因此，最突出的机制似乎是炎症过程，因为所有经典的炎症体征(水肿、红肿、热症和功能受损)在CRPS的早期阶段都很明显[81]。在CRPS患者患肢与未患肢的皮肤水疱液中发现了高水平的促炎细胞因子(TNF-α和IL-6)[82]。CRPS患者脑脊液(CSF)中IL-1β和IL-6水平较其他受试者显著升高[83,84]。在疼痛性神经病变受试者的血液中，TNF-α水平是健康受试者和非疼痛性神经病变患者的两倍[85]。IL-1β可以调节感觉神经元的传递，因为它增加了P物质的释放[86,87]。因此，CRPS I型与CSF中高水平的IL-1β和IL-6以及血液中高水平的TNF-α有关。此外，这些促炎细胞因子在注射HPV疫苗后强烈表达。
每次疫苗注射都决定在注射部位强制干预树突状细胞，而树突状细胞同时也是抗原呈递细胞（APC）和组织巨噬细胞。巨噬细胞被激活时分泌促炎细胞因子，如IL-1β、IL-6和TNF-α。此外，免疫活性细胞是细胞因子的最大来源之一，能够在身体几乎所有组织中迁移，代表局部微环境的移动调节器[88].细胞因子与神经递质和激素一起，是具有独特免疫调节功能的信号分子。实际上，它们可以影响每一个生理系统，包括神经内分泌相互作用、神经递质代谢和神经可塑性，从而影响行为和认知功能[89]。
每一次疫苗注射都导致促炎细胞因子的强烈表达。细胞因子在协调免疫反应中处于中心地位[90]。在大多数情况下，它们的作用距离较短(IL-1、IL-6和TNF等除外)。
在之前的[2]论文中，我们假设了疫苗接种和神经炎症之间的联系。注射所有疫苗后表达的外周促炎细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)可到达大脑，激活小胶质细胞后可引起神经炎症。升高的促炎细胞因子，特别是TNF-α，已经在有关自闭症儿童细胞因子谱的研究中被描述。IL-1β是一种控制局部促炎级联反应的细胞因子，从而影响保护性免疫和破坏性炎症之间的平衡。ASD患儿的一个亚组已经发展为神经炎症。一些尸检研究证实了小胶质细胞的激活和神经炎症。最近的一项研究表明，ASD患者的脑组织中存在铝。在小胶质细胞中也发现了铝[91]。疫苗中的铝被重新分配到包括大脑在内的许多器官中，并在那里积累。每一种疫苗都向组织中添加不同水平的铝。 Aluminum, like mercury, activates microglia leading to chronic brain inflammation and neurotoxicity.
Gardasil和Cervarix疫苗(图1)含有铝，可通过NLRP3炎症小体激活caspase-1酶。caspase-1酶以其活性形式转化前白细胞介素1β和18。IL-18决定IFN-γ的产生。IL-1β是一种控制局部促炎级联反应的细胞因子，并有助于激活转录因子NF-κB。Cervarix佐剂AS04含有氢氧化铝和MPL。第二种刺激TLR4。Gardasil 4疫苗被非b构象的外来DNA污染[92]，激活TLR9。TLRs通过接合蛋白MyD88起作用，MyD88增加NFκB的活性，进而增加IL-1β、IL-6和TNF-α的表达和分泌(参考文献见[2])。因此，有很强的免疫刺激和促炎细胞因子的产生，包括IL-1β IL-6和TNF-α，它们能够在远离产生位点的地方发挥作用。
图1所示。Gardasil和Cervarix疫苗含有铝，通过NLRP3炎症小体激活caspase-1酶。caspase-1酶可转化白介素1β (IL-1β)和18的活性形式。TLRs通过增加NF-κB活性的适配器蛋白MyD88起作用。IL-1β和toll样受体(TLR) 4和9的激活决定了转录因子NF-κB的激活，从而增加IL-1β、IL-6和TNF-α的表达和分泌。
所有的佐剂都能调节一组共有的168个基因，并促进抗原提呈细胞募集。明矾调控着312个基因[93]。大量体外实验[94]表明，明胶可激活巨噬细胞中NLRP3炎性小体，进而激活caspase-1，进而产生白细胞介素- (IL-) 1β (IL-1β)。在激活后，NLR家族的成员，如NLRP3，与ASC和前caspase-1形成复合物。由这些分子形成的复合物称为炎性小体。NLRP3炎性小体可被多种物质激活，包括明矾。无论炎性小体激活的原因是什么，其结果都包括活性caspase-1的产生，从而将IL-1家族的非活性前体细胞因子，包括IL-1β、IL18和IL-33，转化为其活性形式[95]。
总之，作为疫苗佐剂注射的铝盐被天然免疫细胞(特别是树突状细胞)摄取，它们与一种叫做NLR (NLRP3)的受体结合，这种受体与其他蛋白质一起组成细胞内的大分子复合物，激活caspase-1酶。这种酶将IL-1β和IL-18转化为它们的活性形式(IL-1β和IL-18)。caspase-1的作用不仅局限于将IL-1β转化为IL-1β，它还强烈影响促炎细胞因子:IL-1β、IL-1α、IL-6、TNF-α、IL-18和IFN-γ的分泌。IL-1是炎症和免疫反应的主要调节因子。通过其I型受体，它激活特定的蛋白激酶，包括核因子κ轻链增强子(NF-κB)诱导激酶(NIK)和三种不同的丝裂原活化蛋白(MAP)激酶级联。这些因子可以调节许多转录因子，包括NF-κB、AP1和CREB，其中每一个因子都可以调节大量对炎症反应至关重要的即时早期基因[96]。因此，每次注射疫苗都会产生促炎反应。如果没有由佐剂产生的促炎反应，对疫苗抗原(对目前疫苗中存在的数量)的免疫反应是不可能的。
在(图2)中，铝的作用机制总是被描述出来，但是一种新的抗乙型脑膜炎球菌疫苗产生TLR- 2和TLR- 4的激活。OMV囊泡含有激活TLR2的脂蛋白和激活TLR4的LPS。外周促炎细胞因子的强烈产生能够产生小胶质细胞活化和神经炎症。
图2。铝的作用机制总是被描述，但一种新的抗脑膜炎球菌B疫苗产生TLR- 2和4的激活。OMV囊泡含有激活TLR2的脂蛋白和激活TLR4的LPS。外周促炎细胞因子的强烈产生能够产生小胶质细胞活化和神经炎症。
在右侧(图3)可以看到，注射疫苗后表达的外周促炎细胞因子可到达大脑，除神经炎症外，还可引起接种后炎症综合征[97]，与HPV疫苗的情况类似。如果存在神经炎症，则可能随后出现自身免疫反应和神经退行性变。外周细胞因子可产生启动小胶质细胞和参与神经炎症的炎症表型M1。神经炎症会增加促炎细胞因子的产生并激活星形胶质细胞，产生氧化应激并增加大脑中前列腺素的产生。氧化应激和星形胶质细胞的激活会导致血脑屏障的破裂，从而使T淋巴细胞和B淋巴细胞进入大脑变得容易。氧化应激也对自身抗原产生损伤，可能有助于产生自身免疫和神经退行性疾病，参见[2]。
图3。外周促炎细胞因子在注射疫苗后表达，可到达大脑，除了神经炎症外，还可导致疫苗接种后炎症综合征，就像HPV疫苗一样。
至于疫苗与疼痛之间的关系，现在很明显，在共同的细胞因子底物下，注射HPV疫苗的促炎症反应与CRP I型的炎症特征是相同的。当然，个体易感性和其他可能的干扰因素决定了谁应该接种HPV疫苗在注射HPV疫苗后（两类受试者）表达高水平的促炎性细胞因子[2]时，患者和世卫组织不存在这种情况，这一点很明显，在HPV疫苗的情况下，疼痛最初是由促炎性细胞因子（如IL-1β、IL-6和TNF-α）的强烈产生引起的随后出现与中枢神经系统炎症体征相关的外周和中枢致敏现象（脑脊液中细胞因子升高，如IL-1β和IL-6）。
图4显示了一些女孩在注射HPV疫苗后可能导致神经炎症的两种机制(血液和神经)。
图4。注射HPV疫苗可引起小胶质细胞活化和神经炎症。促炎细胞因子(如IL-1β、IL-6和TNF-α)的强烈表达可以通过血液和/或通过伤害感受器激活脊髓中的小胶质细胞和星形胶质细胞。小胶质细胞的双激活途径可引起神经炎症。
最后，（图5）展示了伤害感受器对注射HPV疫苗后产生的细胞因子的异常反应如何产生慢性疼痛中存在的外周和中枢致敏现象，包括日本报告为HPV疫苗的CRP I型的体征和症状。
图5。HPV疫苗注射后产生的细胞因子的异常痛觉感受器反应可产生外周和中枢致敏现象。这种新情况解释了慢性疼痛的机制，并产生与之相关的症状。
在神经系统和免疫系统之间存在着广泛的通信线路，这是神经炎症的一个基本原理。脑内免疫记忆是神经病理学的重要修饰因子。全身性炎症产生信号，与大脑沟通，导致代谢和行为的变化，小胶质细胞假定为促炎症表型。免疫印迹可以区分为两种类型:训练和耐受。这些是表观遗传介导的，分别增强或抑制随后的炎症。
本文提出的分子机制表明，在接种后表达的外周细胞因子如何在小胶质细胞激活后引起一些受试者的神经炎症，这取决于免疫遗传背景和先天免疫记忆。小胶质细胞的激活以及随后的神经炎症所产生的影响，根据年龄的不同而有所不同:在出生的前两年，它们可能导致ASD的产生(在一些ASD受试者中，存在神经炎症和脑内铝的积累);而接种HPV疫苗的女孩可能出现不同的神经症状。事实上，HPV疫苗注射后表达的促炎细胞因子可以引起神经炎症和慢性疼痛，我们假设上述细胞因子能够产生一种免疫后炎症综合征，在这种综合征中慢性疼痛和神经炎症几乎总是存在的。
书中提到的所有女孩“HPV疫苗试验”[98]，慢性疼痛总是存在，并高度衰弱。此外，许多女孩表现出中枢敏感化的症状和体征，并伴有相关的精神和运动症状(表1)。人类乳头瘤病毒疫苗接种期与独特的疫苗接种后症状发展期(症状包括接种患者的慢性局部疼痛综合征和自主和认知功能障碍)相当重叠。
表1。中枢致敏产生的症状和体征（Smith，2010）。
中枢致敏。 |
恶性过程，疼痛越来越严重，变得自主。 |
影响 |
|
二级痛觉过敏 |
阈值降低、多病、感觉异常、麻木。 |
形态的影响 |
痛觉超敏。 |
交感神经系统 |
自主神经异常，持续过度活跃，对压力的反常低反应，心理问题。 |
自主的影响 |
多水，觉醒/非觉醒，局部变化，神经源性水肿，温度变化，痛觉减退;应激引起的痛觉过敏，血管变化，营养变化，头发和指甲问题。 |
运动的影响 |
启动、维护困难，小动作精度高。虚弱，肌张力障碍，活动范围减少，震颤，痉挛，肌阵挛，忽略样综合征，复杂区域疼痛综合征(CRPS)的病理生理学。 |
系统的影响 |
睡眠障碍，疲劳，昼夜节律紊乱，发展其他疼痛综合症，疾病行为。 |
心理效应 |
恐惧，愤怒，社会登录，疼痛行为，动机，无助效应，抑郁效应，对疼痛的关注，和身体自我。 |
在本文中,我们提供了解释,在分子生物学方面,[99]发表的流行病学观察,我们已经表明,女孩所呈现的症状与AEs的分子基础和临床实体众所周知的科学世界(c反应蛋白I型和中枢敏感化)。
表1的阅读粉碎了否认者科学家的不在场证明，因为患有这些HPV疫苗AEs的女孩都有中枢致敏的所有症状[100]，这是由这些注射产生的，我们在图4和图5中描述了分子机制。
为了进一步确认促炎细胞因子在神经系统疾病中的作用，我们在(表2)中列出了一些具有相关促炎细胞因子的神经综合征，如:病理性疼痛[100]、外周神经性疼痛[101]、痛觉过敏[102]、CRPS[103,104105]、慢性疲劳[106107]、CFS/ME[108,109]、POTS[110,111]。
表2。神经临床综合征和促炎细胞因子。
并发症状 |
促炎细胞因子 |
||||
il - 1β |
肿瘤坏死因子-α |
IL-6 |
IFN-γ |
IL-8 |
|
病理性疼痛 |
是的 |
是的 |
是的 |
是的 |
|
外围neuropatic疼痛 |
是的 |
是的 |
|||
痛觉过敏 |
是的 |
||||
c反应蛋白 |
是的 |
是的 |
是的 |
是的 |
|
慢性疲劳 |
是的 |
是的 |
是的 |
||
慢性疲劳综合症 |
是的 |
是的 |
|||
锅 |
是的 |
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资金信息
这项工作没有收到任何资金和出版费用由本文的作者支付。
作者的贡献
Giannotta N.进行了文献研究，并准备了论文中涉及疼痛的部分。此外，他还准备了论文中的数字。
Giannotta G.，研究了神经炎症并准备了分子生物学的部分，特别是他研究了疫苗和神经炎症之间的关系。
利益冲突
作者声明他们没有利益冲突。
道德
我们认为，这篇论文为理解疫苗的分子生物学做出了明确的贡献，因此，我们认为它发表后不会产生任何伦理问题。
安迪征服
罗马大学“G.Marconi”，意大利罗马
评论文章
收稿日期:2019年5月13日
接受日期:2019年5月22日
发布日期：2019年5月25日
©2019 Giannotta G.这是一篇根据创作共用署名许可条款发布的开放获取的文章，该条款允许在任何媒体上无限制地使用、发布和复制，前提是注明原作者和来源。
Giannotta G和Giannotta N(2019)疫苗接种后炎症综合征:一种新的综合征。临床病例报告5:DOI: 10.15761/CCRR.1000454
图1所示。Gardasil和Cervarix疫苗含有铝，通过NLRP3炎症小体激活caspase-1酶。caspase-1酶可转化白介素1β (IL-1β)和18的活性形式。TLRs通过增加NF-κB活性的适配器蛋白MyD88起作用。IL-1β和toll样受体(TLR) 4和9的激活决定了转录因子NF-κB的激活，从而增加IL-1β、IL-6和TNF-α的表达和分泌。
图2。铝的作用机制总是被描述，但一种新的抗脑膜炎球菌B疫苗产生TLR- 2和4的激活。OMV囊泡含有激活TLR2的脂蛋白和激活TLR4的LPS。外周促炎细胞因子的强烈产生能够产生小胶质细胞活化和神经炎症。
图3。外周促炎细胞因子在注射疫苗后表达，可到达大脑，除了神经炎症外，还可导致疫苗接种后炎症综合征，就像HPV疫苗一样。
图4。注射HPV疫苗可引起小胶质细胞活化和神经炎症。促炎细胞因子(如IL-1β、IL-6和TNF-α)的强烈表达可以通过血液和/或通过伤害感受器激活脊髓中的小胶质细胞和星形胶质细胞。小胶质细胞的双激活途径可引起神经炎症。
图5。HPV疫苗注射后产生的细胞因子的异常痛觉感受器反应可产生外周和中枢致敏现象。这种新情况解释了慢性疼痛的机制，并产生与之相关的症状。
表1。中枢致敏产生的症状和体征（Smith，2010）。
中枢致敏。 |
恶性过程，疼痛越来越严重，变得自主。 |
影响 |
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二级痛觉过敏 |
阈值降低、多病、感觉异常、麻木。 |
形态的影响 |
痛觉超敏。 |
交感神经系统 |
自主神经异常，持续过度活跃，对压力的反常低反应，心理问题。 |
自主的影响 |
多水，觉醒/非觉醒，局部变化，神经源性水肿，温度变化，痛觉减退;应激引起的痛觉过敏，血管变化，营养变化，头发和指甲问题。 |
运动的影响 |
启动、维护困难，小动作精度高。虚弱，肌张力障碍，活动范围减少，震颤，痉挛，肌阵挛，忽略样综合征，复杂区域疼痛综合征(CRPS)的病理生理学。 |
系统的影响 |
睡眠障碍，疲劳，昼夜节律紊乱，发展其他疼痛综合症，疾病行为。 |
心理效应 |
恐惧，愤怒，社会登录，疼痛行为，动机，无助效应，抑郁效应，对疼痛的关注，和身体自我。 |
表2。神经临床综合征和促炎细胞因子。
并发症状 |
促炎细胞因子 |
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il - 1β |
肿瘤坏死因子-α |
IL-6 |
IFN-γ |
IL-8 |
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病理性疼痛 |
是的 |
是的 |
是的 |
是的 |
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外围neuropatic疼痛 |
是的 |
是的 |
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痛觉过敏 |
是的 |
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c反应蛋白 |
是的 |
是的 |
是的 |
是的 |
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慢性疲劳 |
是的 |
是的 |
是的 |
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慢性疲劳综合症 |
是的 |
是的 |
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锅 |
是的 |
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